(GleNAc (MurNAc N乙限D葡萄嗽装 N-乙酰D胞壁 H N-H L丙氨酸 HaC-C-C=0 (L-Ala) H-N 谷氨酸 HoCFICHalzC-o (D-Glul L二氨基庚二酸 1O NHz (L- DAPI 0=C-C-CH, ①DAla) N-H 图1肽聚塘的基本结构单位
③E EDTA g2、Ca2的螯合剂,可抑制DNA酶的活性, 防止DNA被酶降解。 ④NaOH-SDS NaOH:强碱,提供pH>12的碱性条件,使DNA 双链变性。 SDs:溶解细胞膜蛋白和细胞内蛋白,并结合成 “蛋白—SDS”复合物,使蛋白质(包括DNA酶) 变性沉淀
③EDTA Mg2+ 、Ca 2+的螯合剂,可抑制DNA酶的活性, 防止DNA被酶降解。 ④NaOH-SDS NaOH:强碱,提供pH>12的碱性条件,使DNA 双链变性。 SDS: 溶解细胞膜蛋白和细胞内蛋白,并结合成 “蛋白—SDS”复合物,使蛋白质(包括DNA酶) 变性沉淀
⑤ KAC-HAC缓冲液 冰醋酸把醋酸钾溶液的pH调到48。 用来中和NaOH变性液,使DNA复性。 高氵 浓度的NaAc有利于变性的大分子(蛋白质 DNA、RNA等)沉淀。 ⑥乙醇 用于沉淀DNA DNA分子以水合状态“溶于”水里,乙醇能夺去 DNA分子的水环境
冰醋酸把醋酸钾溶液的pH调到4.8。 用来中和NaOH变性液,使DNA复性。 高浓度的NaAc有利于变性的大分子(蛋白质、 DNA、RNA等)沉淀。 用于沉淀DNA。 ⑥ 乙醇 DNA分子以水合状态“溶于”水里,乙醇能夺去 DNA分子的水环境。 ⑤ KAc-HAc缓冲液
⑦ RNase A 降解RNA渣滓。 以免提取后的DNA中含有小分子的RNA。 ⑧TE缓冲液 DNA保存液。 由Tris-HC和EDTA配制。 Tris-HC不含金属离子(不同于磷酸缓冲液或硼 酸缓冲液),有利于以后操作 EDTA抑制DNA酶,防止DNA被酶降解
⑦ RNase A 降解RNA渣滓。 以免提取后的DNA中含有小分子的RNA。 ⑧ TE缓冲液 DNA保存液。 由Tris-HCl和EDTA配制。 Tris-HCl不含金属离子(不同于磷酸缓冲液或硼 酸缓冲液),有利于以后操作; EDTA抑制DNA酶,防止DNA被酶降解
⑨酚-氯仿 选用 蛋白变性剂,进一步抽提DNA溶液中的蛋白质, 使蛋白质沉淀。 但苯酚会残留在DNA溶液中 (现多用各种商品化的层析柱纯化DNA) 以上试剂有商业试剂盒;也 可以自己配制
蛋白变性剂,进一步抽提DNA溶液中的蛋白质, 使蛋白质沉淀。 但苯酚会残留在DNA溶液中。 (现多用各种商品化的层析柱纯化DNA)。 ⑨ 酚-氯仿 选用 以上试剂有商业试剂盒;也 可以自己配制