、质粒DNA的提取
一、质粒DNA的提取
asia DNA ennio Di The genomic DNA of E coli: a single circular double-stranded DNA, with the contour length about 850 times longer than the cell
plasmid DNA The genomic DNA of E. coli: a single circular double-stranded DNA, with the contour length about 850 times longer than the cell. Genomic DNA
1.碱抽提法提取质粒DNA (1)原理 变性 强碱 DNA双链 DNA单链 中性 复性 闭合环状的质粒DNA,在变性后不会分离, 复性快
闭合环状的质粒DNA，在变性后不会分离， 复性快。 （1）原理 1 .碱抽提法提取质粒DNA DNA双链 变性 DNA单链 复性 强碱 中性
染色体线性DNA或有缺口的质粒DNA变性后双链分 离,难以复性而形成缠绕的结构,与蛋白质—SDS复 合物结合在一起,在离心的时候沉淀下去 变性 心
染色体线性DNA或有缺口的质粒DNA变性后双链分 离，难以复性而形成缠绕的结构，与蛋白质—SDS复 合物结合在一起，在离心的时候沉淀下去。 变性
(2)所用的试剂作用 ①溶菌酶 能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖 中的β-1,4糖苷键 在碱性条件(pH>8)下有活性 ②葡萄糖 增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受 机械力(震荡)的作用而降解
（2） 所用的试剂作用 ① 溶菌酶 能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖 中的-1，4糖苷键。 在碱性条件（pH>8）下有活性。 ② 葡萄糖 增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受 机械力（震荡）的作用而降解