生物技术专业按心课程 基因工 华东理工大学张惠展
生物技术专业核心课程 生物技术专业核心课程 基因工程 华东理工大学 张惠展 华东理工大学 张惠展
基因工程 1重组DNA技术与基因工程的基本概念 2重组DNA技术与基因工程的基本原理 3重组DNA技术所需的基本条件 4重组DNA技术的操作过程 5目的基因的克隆与基因文库的构建 6外源基因在大肠杆菌中的表达 7外源基因在酵母菌中的表达 8外源基因在哺乳动物细胞中的表达 9外源基因表达产物的分离纯化
基因工程 5 2 3 4 1 6 7 8 9 重组重组DNA DNA技术与基因工程的基本概念 技术与基因工程的基本概念 重组DNA技术与基因工程的基本原理 技术与基因工程的基本原理 重组DNA技术所需的基本条件 技术所需的基本条件 重组DNA技术的操作过程 技术的操作过程 目的基因的克隆与基因文库的构建 目的基因的克隆与基因文库的构建 外源基因在大肠杆菌中的表达 外源基因在大肠杆菌中的表达 外源基因在酵母菌中的表达 外源基因在酵母菌中的表达 外源基因在哺乳动物细胞中的表达 外源基因在哺乳动物细胞中的表达 外源基因表达产物的分离纯化 外源基因表达产物的分离纯化
3重组DNA技术所需的基本条件 A用于核酸操作的工具酶 B用于基因克隆的载体 C用于基因转移的受体菌或细胞
3 重组DNA技术所需的基本条件 技术所需的基本条件 C 用于基因转移的受体菌或细胞 用于基因转移的受体菌或细胞 B 用于基因克隆的载体 用于基因克隆的载体 A 用于核酸操作的工具酶 用于核酸操作的工具酶
3重组DNA技术所需的基本条件 A用于核酸操作的工具酶 狠制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 核酸酶 ●核酸修饰酶
A 用于核酸操作的工具酶 用于核酸操作的工具酶 3 重组DNA技术所需的基本条件 技术所需的基本条件 限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 DNA DNA聚合酶 聚合酶 核酸酶 核酸酶 核酸修饰酶 核酸修饰酶
限制性核酸內切酶 限制性核酸内切酶的发现及其生物功能 只别双链DNA分子中的特定序列,并切割DNA双链 主要存在于原核细菌中,帮助细菌限制外来DNA的入侵 细菌的限制与修饰作用 hsdR:编码限制性核酸內切酶 hsdM:编码限制性甲基化酶 hsds:编码限制性酶和甲基化酶的协同表达 1968年, Smith等人首先从流感嗜血杆菌d株中分离出 Hind‖和HindⅢl
限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶 限制性核酸内切酶的发现及其生物功能 限制性核酸内切酶的发现及其生物功能 识别双链DNA分子中的特定序列，并切割 分子中的特定序列，并切割DNA双链 主要存在于原核细菌中，帮助细菌限制外来 主要存在于原核细菌中，帮助细菌限制外来DNA DNA的入侵 的入侵 细菌的限制与修饰作用 细菌的限制与修饰作用 hsd hsd R：编码限制性核酸内切酶 编码限制性核酸内切酶 hsd hsd MM：：编码限制性甲基化酶 编码限制性甲基化酶 hsd hsd SS：：编码限制性酶和甲基化酶的协同表达 编码限制性酶和甲基化酶的协同表达 1968 1968年，年，Smith Smith等人首先从流感嗜血杆菌 等人首先从流感嗜血杆菌dd株中分离出 株中分离出 Hind II Hind II和和Hind III Hind III