1.质粒载体的生物学特性 (6)质粒的存在形式有超螺旋、开环双螺旋和 线状双螺旋三种, 双螺旋共价闭合 开环双螺旋 线状双螺旋 环(超螺旋) 个裂口) (两个裂口)
1.质粒载体的生物学特性 (6)质粒的存在形式有超螺旋、开环双螺旋和 线状双螺旋三种, 双螺旋共价闭合 环(超螺旋) 开环双螺旋 (一个裂口) 线状双螺旋 (两个裂口)
第一节质粒载体 (plasimid vectors) 1、质粒载体的生物学特性 2、质粒载体相关知识介绍
第一节 质粒载体 (plasimid vectors) 1、质粒载体的生物学特性 2、质粒载体相关知识介绍
质粒:是一种裸露的双链闭环DNA分子,它们在寄主细胞中 能够独立地自我复制从而得到不断的繁殖。作为基因工程载体, 质粒至少应该具备复制的起始区、选择标记基因区、多克隆位 点等部分。 S Xml PatIl Adel EcoRI Narl bacterium Smal pGEM-3Z BamH 2743 Xbal plasmid Accl Hic‖ bacterial Pstl n Sphl chromosome SP6
质粒:是一种裸露的双链闭环DNA分子,它们在寄主细胞中 能够独立地自我复制从而得到不断的繁殖。作为基因工程载体, 质粒至少应该具备复制的起始区、选择标记基因区、多克隆位 点等部分
多克隆位点:克隆载体中的一段用于插入外源DNA片段的 特定区域,由一系列的紧密相连的限制性内切酶位点组成,而 且每个限制性内切酶位点应该在整个载体中是唯一的。 选择标记基因:在基[xm Hall 因工程中的一类用于选择 Scal Ndel EcOR 转化细胞(菌)的抗性基 因,通常是一些抗生素抗 NarI Kpnl Aval 性基因,比如对氨苄青霉 mp Smal pGEM-3Z BamhI 素、四环素、氯霉素、卡 2743 Lacz 那霉素以及潮霉素等具有 Accl 抗性的基因。这样,通过 Hinc 在培养基中加入特定的抗 Pstl Or Sphl 生素就可以选自得到转化 Hin dll 的细胞(菌)。 SP6
多克隆位点:克隆载体中的一段用于插入外源DNA片段的 特定区域,由一系列的紧密相连的限制性内切酶位点组成,而 且每个限制性内切酶位点应该在整个载体中是唯一的。 选择标记基因:在基 因工程中的一类用于选择 转化细胞(菌)的抗性基 因,通常是一些抗生素抗 性基因,比如对氨苄青霉 素、四环素、氯霉素、卡 那霉素以及潮霉素等具有 抗性的基因。这样,通过 在培养基中加入特定的抗 生素就可以选自得到转化 的细胞(菌)
2.质粒载体相关知识介绍 Plasmids are double-stranded closed circular dna molecules They are self-replicating and, therefore, propagate in the host cell. They do not insert themselves into the host chromosome. In order to be a useful vector in genetic engineering,a plasmid must have an origin of replication, a dominant selectable marker and one or (preferably)more cloning sites. The origin of replication allows the plasmid to replicate within an E. coli cell. Commercial vectors have origins of replication that allow the plasmid to replicate even if the host chromosomal replication and cell division is inhibited with protein synthesis inhibitors such as chloramphenicol(氯霉素 This allows a convenient way of increasing the plasmid copy number per cell, a useful procedure if the plasmid is to be extracted from the cell
2. 质粒载体相关知识介绍 Plasmids are double-stranded closed circular DNA molecules. They are self-replicating and, therefore, propagate in the host cell. They do not insert themselves into the host chromosome. In order to be a useful vector in genetic engineering, a plasmid must have an origin of replication, a dominant selectable marker and one or (preferably) more cloning sites. The origin of replication allows the plasmid to replicate within an E. coli cell. Commercial vectors have origins of replication that allow the plasmid to replicate even if the host chromosomal replication and cell division is inhibited with protein synthesis inhibitors such as chloramphenicol(氯霉素). This allows a convenient way of increasing the plasmid copy number per cell, a useful procedure if the plasmid is to be extracted from the cell