④具有较小的分子量和较高的拷贝数。 Region into which Plasmid DNA can cloning vector be inserted
④ 具有较小的分子量和较高的拷贝数
⑤应属于松驰型质粒 能在氯霉素存在下大量扩增其拷贝数。 ⑥应为非传递性质粒 具有较小的宿主范围
⑤ 应属于松驰型质粒 ⑥ 应为非传递性质粒 具有较小的宿主范围。 能在氯霉素存在下大量扩增其拷贝数
(3)质粒的选择标记及其工作原理: 卩·选择标记 ①抗菌素抗性 绝大多数质粒载体都是用抗菌素抗性标记: 氨苄青霉素抗性(Ampf) 卡那霉素抗性(Kan) 四环素抗性 (7et) 链霉素抗性 (Strr 氯霉素抗性 (Cm/)
氨苄青霉素抗性（Ampr） 卡那霉素抗性 （Kanr） 四环素抗性 （Tetr） 链霉素抗性 （Strr） 氯霉素抗性 （Cmlr） （3） 质粒的选择标记及其工作原理： • 选择标记 ① 抗菌素抗性 绝大多数质粒载体都是用抗菌素抗性标记：
常用抗菌素的抗性工作原理 i)氨苄青霉素( Ampicillin,Amp) 青霉素的衍生物。 a)抑菌原理 通过干扰细菌细胞壁合成的末端反应, 杀死生长的细菌。 b)细菌抗性原理 Amp基因编码β-内酰胺酶,特异地切割 氨苄青霉素的β-内酰胺环
常用抗菌素的抗性工作原理 i）氨苄青霉素（Ampicillin，Amp） 青霉素的衍生物。 通过干扰细菌细胞壁合成的末端反应， 杀死生长的细菌。 a）抑菌原理 b）细菌抗性原理 Ampr基因编码-内酰胺酶，特异地切割 氨苄青霉素的-内酰胺环
i)氯霉素( chloramphenicol,cm|) a)抑菌原理 通过与50S核糖体亚基结合,干扰细胞蛋白 质的合成并阻止肽键的形成。杀死生长的细 b)细菌抗性原理 Cm编码乙酰转移酶,特异地使氯霉素乙 酰化而失活
ii）氯霉素（chloramphenicol，Cml） 通过与50S核糖体亚基结合，干扰细胞蛋白 质的合成并阻止肽键的形成。杀死生长的细 菌。 b）细菌抗性原理 Cmlr 编码乙酰转移酶，特异地使氯霉素乙 酰化而失活。 a）抑菌原理