间期:第二次减数分裂前期:染色体缩短变粗,开始变清晰,核膜消失第二次减数分裂中期:染色体排在赤道面上第二次减数分裂后期:两条染色单体分离,移向两极第二次减数分裂未期:染色体解旋,呈丝状,核膜形成,胞质分裂,各形成2个子细胞(每一精母细胞共形成四个子细胞)六、思考问题:1、减数分裂各时期的染色体数目变化2、不同物种中减数分裂的过程(四分体、二分体等)并不完全相同3、伴随核分裂的胞质分裂过程4、减数分裂和有丝分裂的异同七、布置作业撰写一份短角斑腿蝗精母细胞减数分裂的观察研究报告实验三果蝇的睡腺染色体观察三、实验原理:双翅目类昆虫的幼虫期的睡腺染色体很大,宽约5u,长约400u,相当于普通染色体的100-150倍。睡腺染色体经过多次复制而不分开,大约有1000-4000根染色体丝的拷贝,又称多线染色体,经染色后出现深浅不同、疏密各别的横纹。果蝇4对睡腺染色体上已确定了6000多条染色带,它们宽窄、疏密、顺序、数目恒定,有种的特异性,同种个体的是相同的,不同的种则不一样,因此果蝇多线染色体可以建立染色带及间带分布图,它们的表现和遗传学图大致平行,多数遗传学家认为这些横纹与基因有对应关系,所以果蝇睡腺染色体是研究染色体结构畸变,基因定位及基因表达(mRNA合成)的良好材料。四、实验目的1.使学生学会取出果蝇睡腺的技术和制作睡腺染色体标本的技术方法。2.观察睡腺染色体的特征:巨大、异染色质多的染色中心、横纹。3.绘多线染色体图三、实验材料:果蝇的三龄幼虫。四、实验器具和药品5、用具:显微镜、染色液、石蜡、玻片、刀片、镊子、酒精灯、培养血、烧杯6、药品:1%醋酸洋红、无水乙醇、冰醋酸、洋红、甘油、松香、石蜡、生理盐水
间期: 第二次减数分裂前期:染色体缩短变粗,开始变清晰,核膜消失 第二次减数分裂中期:染色体排在赤道面上 第二次减数分裂后期:两条染色单体分离,移向两极 第二次减数分裂末期:染色体解旋,呈丝状,核膜形成,胞质分裂,各形成 2 个子细胞(每一精母细胞共形成四个子细胞) 六、思考问题: 1、减数分裂各时期的染色体数目变化 2、不同物种中减数分裂的过程(四分体、二分体等)并不完全相同 3、伴随核分裂的胞质分裂过程 4、减数分裂和有丝分裂的异同 七、布置作业 撰写一份短角斑腿蝗精母细胞减数分裂的观察研究报告 实验三 果蝇的唾腺染色体观察 三、实验原理: 双翅目类昆虫的幼虫期的唾腺染色体很大,宽约 5u,长约 400u,相当于普 通染色体的 100-150 倍。唾腺染色体经过多次复制而不分开,大约有 1000-4000 根染色体丝的拷贝,又称多线染色体,经染色后出现深浅不同、疏密各别的横纹。 果蝇 4 对唾腺染色体上已确定了 6000 多条染色带,它们宽窄、疏密、顺序、数 目恒定,有种的特异性,同种个体的是相同的,不同的种则不一样,因此果蝇多 线染色体可以建立染色带及间带分布图,它们的表现和遗传学图大致平行,多数 遗传学家认为这些横纹与基因有对应关系,所以果蝇唾腺染色体是研究染色体结 构畸变,基因定位及基因表达(mRNA 合成)的良好材料。 四、实验目的: 1.使学生学会取出果蝇唾腺的技术和制作唾腺染色体标本的技术方法。 2.观察唾腺染色体的特征:巨大、异染色质多的染色中心、横纹。 3.绘多线染色体图。 三、实验材料: 果蝇的三龄幼虫。 四、实验器具和药品 5、用具:显微镜、染色液、石蜡、玻片、刀片、镊子、酒精灯、培养皿、烧杯 6、药品:1%醋酸洋红、无水乙醇、冰醋酸、洋红、甘油、松香、石蜡、生理盐 水
五、实验步骤:1、实验准备:实验前6、7天在培养瓶中引入果蝇6对,实验前移出成虫(以后如子代有羽化成虫时,隔1一2天移出一次),酵母粉可隔几天补充一点,幼虫密度较小和营养丰富易获得睡液腺较大的幼虫。15℃一18℃温度下培养,或培养在20℃—25℃下。2、睡腺示范:这是不起眼但有时确是实验顺利进行至关重要的一步。多数学生没有见过果蝇睡腺,光凭书本和老师介绍不易建立准确形象,容易把白色脂肪体或胃腺体甚至消化道片段误认为是睡液腺。应把睡腺放在解剖镜下进行示范,由于剖取完整的唾液腺(包括两个腺体、两条分泌管及它们汇合的总管)是比较麻烦的,实验时学生可分成几组先后几次分别实验。制作了睡腺的永久制片,树胶封藏,睡腺几乎透明,轮廓不如在生理盐水中清晰可见。用石蜡沿盖片四周密封水装片,可以保存几个星期以上,只要准备一次,就能满足前后几次实验的示范要求。3、唾腺剖取:选取果蝇三龄幼虫放在载片上,加一滴0.7%生理盐求,幼虫以体型大、虫龄长的为好。将载片置双筒解剖镜下,因为虫体乳白色半透明,应使用解剖镜黑色载物台一面,利于观察操作。解剖针不宜过于尖锐,避免用力时刺破头部,拉不出睡腺,反而不便第二次拉取了。左手持解部针按在虫体后1/3处,右手持解剖针按在头部黑点状口器的后侧,下按不宜太重,主要是平稳往外用力拉,撕下头部并带出睡腺,它是位于消化道前端两侧的两个半透明的长囊状腺体。如唾腺被拉断或未被拉出,可用解剖针在虫体前部1/3处向前轻压出来。如学生辨认感到实在困难,也可滴一滴染色液,稍待几分钟在低倍显微镜下可看到较大型的细胞和核,染色时间稍长些还可看到盘曲在圆型核内的带状多线染色体,再结合睡腺外观长囊形,便可辨认。4、解离:在睡腺上加一滴INHC1,处理3分钟,这样粘附在睡腺上的脂肪体容易剔除,也有利于细胞分离和染色体伸展。之后反复用清水把HC1洗净,以免影响染色。5、染色:改良苯酚品红或蜡酸洋红染色液均可,我们用的是1%蜡酸地衣红染色液。使用时,染色20一30分钟,注意根据情况滴加染色液,勿使干燥。我们在使用过程中感觉到地衣红染液存放了1年比刚配制时效果为好。6、压片:加上盖片,在酒精灯上微热几次,覆上吸水纸,用解剖针柄轻敲几下,再以拇指垂直向下压片,用力力度可以试着掌握,以细胞核被压破,染色体伸展而不破碎为限。为了避免一次压片失败又需重新剖取和染色,可将两条染色的睡腺用解部针共分成4份分装在几个载片上。压片后在低倍显微镜下检查,如染色体已破碎就需要重新压制;如核未破,染色体仍包裹核内,可重新用力压片或用左手姆、食指按住盖片的两角,再用右手食指指端垂直向下敲击盖片。用手指敲击容易感觉和掌握力度。注意压片过程中盖片不可搓动。制好装片就可以进行观察了。五、布置作业绘制果蝇睡腺染色体图
五、实验步骤: 1、实验准备:实验前 6、7 天在培养瓶中引入果蝇 6 对,实验前移出成虫(以 后如子代有羽化成虫时,隔 1—2 天移出一次),酵母粉可隔几天补充一点,幼虫 密度较小和营养丰富易获得唾液腺较大的幼虫。15 ℃—18 ℃温度下培养,或培 养在 20℃—25℃下。 2、唾腺示范:这是不起眼但有时确是实验顺利进行至关重要的一步。多数 学生没有见过果蝇唾腺,光凭书本和老师介绍不易建立准确形象,容易把白色脂 肪体或胃腺体甚至消化道片段误认为是唾液腺。应把唾腺放在解剖镜下进行示 范,由于剖取完整的唾液腺(包括两个腺体、两条分泌管及它们汇合的总管)是比 较麻烦的,实验时学生可分成几组先后几次分别实验。制作了唾腺的永久制片, 树胶封藏,唾腺几乎透明,轮廓不如在生理盐水中清晰可见。用石蜡沿盖片四周 密封水装片,可以保存几个星期以上,只要准备一次,就能满足前后几次实验的 示范要求。 3、唾腺剖取:选取果蝇三龄幼虫放在载片上,加一滴 0.7%生理盐求,幼 虫以体型大、虫龄长的为好。将载片置双筒解剖镜下,因为虫体乳白色半透明, 应使用解剖镜黑色载物台一面,利于观察操作。解剖针不宜过于尖锐,避免用力 时刺破头部,拉不出唾腺,反而不便第二次拉取了。左手持解剖针按在虫体后 1/3 处,右手持解剖针按在头部黑点状口器的后侧,下按不宜太重,主要是平稳 往外用力拉,撕下头部并带出唾腺,它是位于消化道前端两侧的两个半透明的长 囊状腺体。如唾腺被拉断或未被拉出,可用解剖针在虫体前部 1/3 处向前轻压出 来。如学生辨认感到实在困难,也可滴一滴染色液,稍待几分钟在低倍显微镜下 可看到较大型的细胞和核,染色时间稍长些还可看到盘曲在圆型核内的带状多线 染色体,再结合唾腺外观长囊形,便可辨认。 4、解离:在唾腺上加一滴 INHCl,处理 3 分钟,这样粘附在唾腺上的脂肪 体容易剔除,也有利于细胞分离和染色体伸展。之后反复用清水把 HCl 洗净,以 免影响染色。 5、染色:改良苯酚品红或蜡酸洋红染色液均可,我们用的是 1%蜡酸地衣 红染色液。使用时,染色 20—30 分钟,注意根据情况滴加染色液,勿使干燥。 我们在使用过程中感觉到地衣红染液存放了 1 年比刚配制时效果为好。 6、压片:加上盖片,在酒精灯上微热几次,覆上吸水纸,用解剖针柄轻敲 几下,再以拇指垂直向下压片,用力力度可以试着掌握,以细胞核被压破,染色 体伸展而不破碎为限。为了避免一次压片失败又需重新剖取和染色,可将两条染 色的唾腺用解剖针共分成 4 份分装在几个载片上。压片后在低倍显微镜下检查, 如染色体已破碎就需要重新压制;如核未破,染色体仍包裹核内,可重新用力压 片或用左手姆、食指按住盖片的两角,再用右手食指指端垂直向下敲击盖片。用 手指敲击容易感觉和掌握力度。注意压片过程中盖片不可搓动。制好装片就可以 进行观察了。 五、布置作业 绘制果蝇唾腺染色体图