一、DNA聚合反应和聚合酶 1957 Arthur Kornberg首次发现DNApol I DNApol II DNApolⅢ (E.coli) 聚合反应: 底物-一dNTP Poly核苷酸)n一3'-OH+dNTP→Poy(核苷酸)n+1一3'-OH 2Pi
一、DNA聚合反应和聚合酶 1957 Arthur Kornberg 首次发现 DNApolⅠ DNApol Ⅱ DNApol Ⅲ (E.coli) 聚合反应: 底物--dNTP Poly(核苷酸)n-3’-OH + dNTP → Poly(核苷酸)n+1-3’-OH + 2Pi
二、三种DNA聚合酶的结构和功能 (P112) 表子1大质杆曹DNA豪合藤特性 DNA聚合前】 DNA聚合酶I DNA豪合酶I 分子结构 单链分子 单链分子 接心藤有3个亚基 全有22个亚基 分子量(KDa) 109 20 900 分子数/细胞 400 100 10 5→3聚合,活性 37℃时的转化率 600 30 ~9000 (核苷酸数分子·分) 3'→5外切核酸麝活性 + + 5→3'外切核酸麝活性 + 内切核酸骥活性 + 切刻转移活性 + 对核苷三磷酸的亲和力 低 低 高 高盐浓度抑制 + SH封闭剂抑制
二、 三种DNA聚合酶的结构和功能(P112)
其中DNApolⅢ全酶有十种共22个亚基 表子2.DNA聚合确I全酶的亚基及亚聚集体 亚 基 基 因 质量(KD) 功能及组成的亚聚集体 dnae 132 豪合聘 aB 7 ③5外切腾 校对功能 PolI核心 Pol I 酶165KDa 8 和 拔心德相互连接(待正明) 410KDa dnaZX 71 将核心酶与模板结合,ATPase活性 dnaz(X) @2紫 组成Y复合体:: Pol里 35 粗成Y复合体,又称因子I;过去误认为dnax产物 800KDa 33 组成Y复合体 15 卡诚7复合体: 12 组成Y复合体 B dnaN 37 使全鼻具有进行性 B二聚体一一滑动钳
其中 DNApol Ⅲ 全酶有十种共22个亚基 β二聚体 --滑动钳
(88Xw)2 B2 B2
上节课内容回顾: 1、基本概念 DNA复制 复制子 复制体 复制时期 2、丰保留复制 3、复制起点 结构特征 复制方向:复制叉复制眼 单双向复制的决定条件 复制的多模式 复制方式:复制叉式(从头起始) D环复制(置换式) 口复制(滚环复制) 4、复制酶学 三种DNApol DNApol III
上节课内容回顾: 1、基本概念 DNA复制 复制子 复制体 复制时期 2、半保留复制 3、复制起点 结构特征 复制方向:复制叉 复制眼 单双向复制的决定条件 复制的多模式 复制方式:复制叉式(从头起始) D环复制(置换式) σ复制(滚环复制) 4、复制酶学 三种DNApol DNApol Ш