2.激发光谱是指固定检测3503703904104504905305701.032000(a)发射波长,用不同波长0.824000吸收发射0.6的激发光激发样品,记160000.4录的相应的荧光发射强80000.200.028800 26800 24800 228002080018800度,可找出荧光效率最高的波长
2.激发光谱是指固定检测 发射波长,用不同波长 的激发光激发样品,记 录的相应的荧光发射强 度,可找出荧光效率最 高的波长
3.荧光效率:荧光物质分子味2803203604004404805206001.0将吸收的光能转变成荧10000台吸收发射0.8(b)80000.6光的百分率。60000.4400020000.2355003150027500235001950015500波数(cm-1)计算公式:荧光效率=发射荧光的光量子数(荧光强度)吸收光的光量子数(激发光强度)以最大吸收峰波长为激发光,检测最大发射峰波长荧光强度,可以得到最大荧光效率
3.荧光效率:荧光物质分子 将吸收的光能转变成荧 光的百分率。 计算公式: 荧光效率= 以最大吸收峰波长为激发光,检测最大发射峰 波长荧光强度,可以得到最大荧光效率。 吸收光的光量子数(激发光强度) 发射荧光的光量子数(荧光强度)
4.荧光寿命:荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间。各种荧光物质的荧光寿命不同。延时测定是时间分辨免疫荧光的基础
4.荧光寿命:荧光物质被激发后所产生的荧 光衰减到一定程度时所用的时间。 各种荧光物质的荧光寿命不同。 延时测定是时间分辨免疫荧光的基础
5.荧光猝灭:荧光物质在某些理化因素作用下,发射荧光减弱甚至消退称为荧光萍灭。如紫外线照射、高温(≥20℃)、苯胺、酚、硝基苯、I一等。保存荧光物质时尽量避免沾染此类物质:利用荧光猝灭剂消除非特异荧光
5.荧光猝灭:荧光物质在某些理化因素作用下,发 射荧光减弱甚至消退称为荧光淬灭。 如紫外线照射、高温(≥20℃)、苯胺、酚、硝 基苯、Iˉ等 。 保存荧光物质时尽量避免沾染此类物质; 利用荧光猝灭剂消除非特异荧光
6.荧光偏振检编器荧光物质经单一线偏摄光(光摄动方向号线偏振光检偏器适透摄方应一效)然光平面的蓝偏振光丰照射后,吸收光进摄方能跃迁入激发态检偏摄器(Ⅱ)后,随后回复至起偏指器()偏编摄化方向偏振化方向基态,并发出单偏振光。-0自然光N一平面的偏振光,最亮屏偏振荧光的强弱(a)程度与荧光分子偏摄化方向偏振化方向偏振光的大小呈正相关,自然光N最暗与其受激发时转2屏动的速度呈反相(6)关
6.荧光偏振 荧光物质经单一 平面的蓝偏振光 照射后,吸收光 能跃迁入激发态 后,随后回复至 基态,并发出单 一平面的偏振光, 偏振荧光的强弱 程度与荧光分子 的大小呈正相关, 与其受激发时转 动的速度呈反相 关