用刀片切去根冠及伸长区部分,只留下分生区置于载玻片上,先用镊子将分生组织碾碎,尽量铺开。再滴上卡宝品红染液,染色5min左右。压片时盖上盖玻片,用手固定住盖玻片,手指用力按压盖玻片,再用铅笔的橡皮头轻轻敲打有材料的部位,使细胞铺展成薄薄的一层。8.镜检压好的片子要先放在10×物镜下观察,找到不同分裂时期的典型细胞分裂相,然后转到40×高倍镜观察,判断细胞的分裂时期。五、作业参照显微镜的观察结果,绘制植物根尖细胞有丝分裂过程不同分裂时期典型的细胞及染色体的生物图
用刀片切去根冠及伸长区部分,只留下分生区置于载玻片上,先 用镊子将分生组织碾碎,尽量铺开。再滴上卡宝品红染液,染色 5 min 左右。压片时盖上盖玻片,用手固定住盖玻片,手指用力按压盖玻片, 再用铅笔的橡皮头轻轻敲打有材料的部位,使细胞铺展成薄薄的一层。 8.镜检 压好的片子要先放在 10×物镜下观察,找到不同分裂时期的典型 细胞分裂相,然后转到 40×高倍镜观察,判断细胞的分裂时期。 五、作业 参照显微镜的观察结果,绘制植物根尖细胞有丝分裂过程不同分 裂时期典型的细胞及染色体的生物图
实验二染色体核型分析一、实验目的掌握染色体核型分析方法,为细胞遗传学和作物育种学研究奠定基础。二、实验原理各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。我们可以通过显微镜观察到物种染色体的基本特征,而在光学显微镜下可测定的染色体的表型特征的总称称之为染色体核(组)型,一般包括染色体数目、大小、形态及结构。染色体核(组)型是物种特有的染色体信息之一,各种动植物的体细胞都有其特定的染色体组型,具有很高的稳定性和再现性。染色体核(组)型分析就是对染色体组中的染色体作上述各种形态特征的描述,选用分裂旺盛细胞的有丝分裂中期的染色体制成染色体组型图,测定各染色体的长度(微米)或相对长度(%),着丝粒位置及染色体两臂长的比例(臂比),观察随体及副继痕的有无。染色体核(组)型分析可以鉴别出染色体结构和数自变异,是细胞遗传学研究中的基本方法,也是研究物种的起源、生物的遗传与进化、细胞遗传学和现代分类学的重要手段之一。本实验是在获得清晰染色体显微照片的基础上,对染色体进行测量、配对、排列并最终得出核型公式,得到较为完整的染色体核型信息。三、实验材料洋葱(Alliuncepa,2n=16)细胞有丝分裂中期染色体玻片标本
实验二 染色体核型分析 一、 实验目的 掌握染色体核型分析方法,为细胞遗传学和作物育种学研究奠定 基础。 二、 实验原理 各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。我们可以 通过显微镜观察到物种染色体的基本特征,而在光学显微镜下可测定 的染色体的表型特征的总称称之为染色体核(组)型,一般包括染色 体数目、大小、形态及结构。染色体核(组)型是物种特有的染色体 信息之一,各种动植物的体细胞都有其特定的染色体组型,具有很高 的稳定性和再现性。 染色体核(组)型分析就是对染色体组中的染色体作上述各种形 态特征的描述,选用分裂旺盛细胞的有丝分裂中期的染色体制成染色 体组型图,测定各染色体的长度(微米)或相对长度(%),着丝粒位 置及染色体两臂长的比例(臂比),观察随体及副缢痕的有无。 染色体核(组)型分析可以鉴别出染色体结构和数目变异,是细 胞遗传学研究中的基本方法,也是研究物种的起源、生物的遗传与进 化、细胞遗传学和现代分类学的重要手段之一。 本实验是在获得清晰染色体显微照片的基础上,对染色体进行测 量、配对、排列并最终得出核型公式,得到较为完整的染色体核型信 息。 三、 实验材料 洋葱(Alliun cepa,2n=16) 细胞有丝分裂中期染色体玻片标本
要求:染色体分散良好,无重叠或重叠很少,着丝粒、随体等形态清晰可辨。四、实验用品剪刀、胶水、镊子、白纸、圆规、坐标纸、毫米尺、计算器、铅笔。五、实验步骤与方法1.测量利用放大的显微照片进行染色体测量和描述,记录染色体测量数据。有随体的染色体,随体长度可不计入总长度之内,但应该备注说明。弯曲的染色体可用细线辅助测量。2. 配对根据测量数据,比较染色体的形态和大小、次痕的有无和位置、随体的形态和大小等,进行同源染色体配对。3.染色体排列将配对的染色体按由大到小的顺序进行排列并编号。对于等长的染色体,以短臂长的在前,有特殊标记的染色体(如含有随体的)及性染色体排在最后。4.染色体核型参数表染色体经配对并编号排列后即可根据所测量数据换算核型参数并完成核型参数表。根据染色体长度测量结果,计算出染色体的相对长度、臂比和着丝粒。臂比=长臂/短臂染色体组总长度=该细胞单倍体全部染色体长度之和相对长度=每一个染色体的长度/染色体组总长度
要求:染色体分散良好,无重叠或重叠很少,着丝粒、随体等形 态清晰可辨。 四、实验用品 剪刀、胶水、镊子、白纸、圆规、坐标纸、毫米尺、计算器、铅 笔。 五、实验步骤与方法 1. 测量 利用放大的显微照片进行染色体测量和描述,记录染色体测量数 据。有随体的染色体,随体长度可不计入总长度之内,但应该备注说 明。弯曲的染色体可用细线辅助测量。 2. 配对 根据测量数据,比较染色体的形态和大小、次缢痕的有无和位置、 随体的形态和大小等,进行同源染色体配对。 3. 染色体排列 将配对的染色体按由大到小的顺序进行排列并编号。对于等长的 染色体,以短臂长的在前,有特殊标记的染色体(如含有随体的)及 性染色体排在最后。 4. 染色体核型参数表 染色体经配对并编号排列后即可根据所测量数据换算核型参数并 完成核型参数表。根据染色体长度测量结果,计算出染色体的相对长 度、臂比和着丝粒。 臂比=长臂/短臂 染色体组总长度=该细胞单倍体全部染色体长度之和 相对长度=每一个染色体的长度/染色体组总长度
表2-1染色体臂比与着丝粒位置和染色体类型的关系臂比(长臂/短臂)着丝粒的位置染色体类型1M正中部着丝粒1.01-1.70中部着丝粒m近中部着丝粒1.71-3.00smst3.01-7.00近端部着丝粒t>7.01端部着丝粒计算以上各参数则可填写染色体核型分析参数表(表2-2):表2-2染色体核型分析参数表染色体染色体照相长度(mm)臂比备注相对长度编号长臂短臂全长类型123456785.制作核型图剪下显微照片上的每一条染色体,按照已确定的同源关系和序号,粘贴在坐标纸上,粘贴时应使着丝粒处于同一水平线上。短臂向上,长臂向下。此即为该细胞的核型图(Karyogram)。有条件的也可进行翻拍
表 2-1 染色体臂比与着丝粒位置和染色体类型的关系 臂比(长臂/短臂) 着丝粒的位置 染色体类型 1 正中部着丝粒 M 1.01-1.70 中部着丝粒 m 1.71-3.00 近中部着丝粒 sm 3.01-7.00 近端部着丝粒 st >7.01 端部着丝粒 t 计算以上各参数则可填写染色体核型分析参数表(表 2-2): 表 2-2 染色体核型分析参数表 染色体 编号 照相长度(mm) 相对长度 臂比 染色体 类型 备注 长臂 短臂 全长 1 2 3 4 5 6 7 8 . . 5. 制作核型图 剪下显微照片上的每一条染色体,按照已确定的同源关系和序号, 粘贴在坐标纸上,粘贴时应使着丝粒处于同一水平线上。短臂向上, 长臂向下。此即为该细胞的核型图(Karyogram)。有条件的也可进行 翻拍
6.制作核型模式图根据核型参数表中染色体相对长度的数值,可利用坐标纸或者利用excel软件绘制核型模式图。核型模式图要求各个染色体依横坐标方向按序号排列,纵坐标零点与着丝粒对应,横坐标与纵坐标交叉于纵坐标最小值(图2-1)。%0910111235图2-1核型模式图7.核型公式综合核型分析的结果,将物种核型的主要特征以公式表示。例如玉米(zeaMays)2n=2x=20=10m+10sm(2SAT)8.核型分类Stebbins(1971)参照生物界现有的核型资料,根据核型中染色体长度比和臂比两项主要特征,用以区分核型的对称和不对称程度,并将其分为12种类型(表3)。表2-3染色体核型对称性分类臂比大于2:1的染色体的百分比最长/最短00.010.50.51—0.9911A4A小于2:12A3A1B2 B3 B4B(2-4):1大于4:11C2C3C4C在表2-3中,1A为最对称核型,4C为最不对称核型。该分类法在分析和讨论核型进化方面是有参考价值的
6. 制作核型模式图 根据核型参数表中染色体相对长度的数值,可利用坐标纸或者利 用 excel 软件绘制核型模式图。核型模式图要求各个染色体依横坐标方 向按序号排列,纵坐标零点与着丝粒对应,横坐标与纵坐标交叉于纵 坐标最小值(图 2-1)。 7. 核型公式 综合核型分析的结果,将物种核型的主要特征以公式表示。例如 玉米(zeaMays)2n=2x=20=10m+10sm(2SAT) 8. 核型分类 Stebbins(1971)参照生物界现有的核型资料,根据核型中染色体长 度比和臂比两项主要特征,用以区分核型的对称和不对称程度,并将 其分为 12 种类型(表 3)。 表 2-3 染色体核型对称性分类 最长/最短 臂比大于 2: 1 的染色体的百分比 0 0.01—0.5 0.51 —0.99 1 小 于 2 : 1 1A 2A 3A 4A ( 2 - 4 ) : 1 1 B 2 B 3 B 4 B 大 于 4 : 1 1 C 2 C 3 C 4 C 在表 2-3 中,1A 为最对称核型,4C 为最不对称核型。该分 类法在分析和讨论核型进化方面是有参考价值的。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 图 2-1 核型模式图