3影响蛋白质m的综合因素 2)、盐 FZ RT lnm=HF(HFS+△EFS2)+-四△ RT +ZF △q:图为各种离子在 PEF/DX系统中的m logm+ log m 图示:HPO42和H2PO4(H1PO+15)离 BUN+ 子在 PEG/DX系统的m小,因此利用pH >7的磷酸盐 buffer很容易改变Δq使带 SCN 负电pro有较高的m 0.1 B △HFS:盐的种类和浓度影响pro的△HFS, t,n+ E Cl 从而影响pro的m。当盐的浓度很大时 如> 1 mol/dm3),由于强烈的盐析,蛋 N 白质的溶解度达到极限,表现分配系 Na K SO 数增大,此时m与pro浓度有关。利用 0.1 这一特点,通过调节ATPS盐浓度, HisPo 4 可选择性萃取不同的pro 0.2 不良影响:改变各相中成相物质的组成 和相体积比。如PEG/Kpi系统中 各种电解质的分配系数 下相(或称轻重组)的PG和磷钾浓度」sw%PEG3007909%D5ok 盐浓度0.020~0.025mol/dm3,25℃
3 影响蛋白质m的综合因素 2)、盐 :图为各种离子在PEF/DX系统中的m. 图示:HPO4 2-和H2PO4 - (H1.5PO4 -1.5 )离 子在PEG/DX系统的m小, 因此利用pH > 7的磷酸盐buffer很容易改变,使带 负电pro有较高的m. HFS:盐的种类和浓度影响pro的HFS, 从而影响pro的m。当盐的浓度很大时 (如>1mol/dm3 ), 由于强烈的盐析,蛋 白质的溶解度达到极限,表现分配系 数增大,此时m与pro浓度有关。利用 这一特点,通过调节ATPS盐浓度, 可选择性萃取不同的pro。 不良影响:改变各相中成相物质的组成 和相体积比。如PEG/Kpi系统中上、 下相(或称轻重组)的PEG和磷钾浓度
3影响蛋白质m的综合因素 3)、 pH value nm A (pH-pl) value 0. 1mol/ dm3 NaCl ○)o.05mol/dm3Na2SO4 10000000 0.2 0,5 核糖核酸酶的m与其电荷数的关系 DH 58%PEG60008.4%DxT500,20℃ BSA的交错分配曲线,箭头 (O)0.1mol/dm KSCN,(O)0.05 mol/dm 所指为交点处的pH和m值 K2S04(()0. 1 mol/dm KCl 4.4%PEG6000/7%DxT-500,20°
3 影响蛋白质m的综合因素 3)、pH value A (pH – pI) value pro(Z) lnm