体积排阻色谱法 体积排阻色谱 ●体积排阻色谱法又称凝胶色谱法,主要用于较大 分子的分离。作用机理是基于试样分子的尺寸和形 状不同来实现分离的。 ●体积排阻色谱被广泛应用于大分子的分离 ●体积排阻色谱是按分子大小顺序进行分离的一种色 谱方法。其固定相为化学惰性多孔物质一凝胶
体积排阻色谱法 ⚫体积排阻色谱法又称凝胶色谱法,主要用于较大 分子的分离。作用机理是基于试样分子的尺寸和形 状不同来实现分离的。 ⚫体积排阻色谱被广泛应用于大分子的分离 ⚫体积排阻色谱是按分子大小顺序进行分离的一种色 谱方法。其固定相为化学惰性多孔物质——凝胶
亲和色谱法 间隔基手臂 亲和物其他组分 当样品通过柱子时候 载 只有能够选择性结合到 亲和配体上的分子能被 保留。不能够结合的分 子随着流动相柱子流出 图20-8 亲和色谱法示意图 ]亲和色谱是利用生物大分子和固定相表面存在某种特异性亲和 力,进行选择性分离的一种方法。它通常是在载体(无机或有机 填料)表面先键合一种具有一般反应性能的所谓间隔臂(如环氧、 联氨等);随后,再连接上配基(酶、抗原或激素等)。这种固 载化的配基将只能和具有亲和力特性吸附的生物大分子相互作用 而被保留,没有这种作用的分子不被保留
亲和色谱法 l亲和色谱是利用生物大分子和固定相表面存在某种特异性亲和 力,进行选择性分离的一种方法。它通常是在载体(无机或有机 填料)表面先键合一种具有一般反应性能的所谓间隔臂(如环氧、 联氨等);随后,再连接上配基(酶、抗原或激素等)。这种固 载化的配基将只能和具有亲和力特性吸附的生物大分子相互作用 而被保留,没有这种作用的分子不被保留。 当样品通过柱子时候, 只有能够选择性结合到 亲和配体上的分子能被 保留。不能够结合的分 子随着流动相柱子流出
手性色谱 不可重叠的镜像化合物(又称为对映体)称为手性化合物,目前在拆分手性化合物方面 取得了巨大进步。这些拆分要么需要手性流动相添加剂,要么需要手性固定相。手性拆分剂 (添加剂或固定相)会和其中一个异构体优先结合,使得一种对映体得到分离。为了识别溶 质的手性特征,手性拆分剂本身必须具有手性特征。对手性固定相的关注最多。手性剂被固 定在固体支撑物的表面上。手性拆分剂和溶质产生几种不同模式的相互作用。有一种类型是 由于吸引力产生相互作用,这种吸引力如x键、氢键、偶极作用。另一种类型是溶质可以进 入周定相的手性空腔以形成包合物。不管是什么模式,在许多领域中,分离这些密切相关化 合物的能力是极其重要的。图4.23为酯的外消旋混合物在手性固定相上的分离。注意R和 S对映体优异的分离度。手性拆分剂是一种手性流动相添加剂或手性固定相,能够优先络合 其中之一的对映体 手性化合物是指分子量、分子结构相同, 但左右排列相反,如实物与其镜中的映体
手性色谱 手性化合物是指分子量、分子结构相同, 但左右排列相反,如实物与其镜中的映体
。气相色谱 气一固分离,流动相为载气 沸点低、易汽化、分子量相对小、极性小的有机物以及气体 ◇ ● 液相色谱 液一固分离,流动相为液体 高沸点、不易气化的、易分解的具有生物活性物质的分 析 ◇
4/27 1 沸点低、易汽化、分子量相对小、极性小的有机物以及气体 ⚫ 气相色谱 气-固分离,流动相为载气 液-固分离,流动相为液体 高沸点、不易气化的、易分解的具有生物活性物质的分 析 ⚫ 液相色谱
多价态氧化元素(NO2、NH4、SO32-、SO42-等) 不同价态离子(Fe3+、Cu2+、C、Cr+等) Solution 含有离子和极性化合 物的分离 寻找新的色谱技术 Problem
多价态氧化元素(NO2 -、 NH4 + 、SO3 2-、SO4 2- 等) 不同价态离子(Fe3+ 、 Cu2+ 、Cl- 、 Cr6+ 等) 含有离子和极性化合 物的分离 寻找新的色谱技术