应倒转微调螺旋重新自低倍镜开始。（4）调节光阑：高倍镜下视野一般较暗，应将光阑开得稍大。用高倍观察完毕，须先转回低倍镜，或将高倍镜头移开后，再取制片，切勿在高倍显微镜下取出或放入制片，以免损坏透镜。3.油镜的使用方法（1）用高倍镜找到所需观察的标本物像，并将需要进一步放大的部位移至视野中央。（2）将聚光器升至最高位置并将光圈开至最大（因油镜所需光线较强）。（3）转动物镜转换盘，移开高倍镜，往玻片标本上需观察的部位（载玻片的正面，相当于通光孔的位置)滴一滴香柏油(折光率1.51)或液状石蜡(折光率1.46)作为介质，然后在眼晴的注视下，使油镜转至工作状态。此时油镜的下端镜面一般应正好浸在油滴中。（4）注视目镜中，同时小心而缓慢地转动微调螺旋（注意：这时只能使用微调螺旋，于万不要使用粗调螺旋）使镜头微微上升（或使载物台下降），直至视野中出现清晰的物像。操作时不要反方向转动微调螺旋，以免镜头下降压碎标本或损坏镜头。（5）油镜使用完后，必须及时将镜头上的油擦拭干净。操作时先将油镜升高1cm，并将其转离通光孔，先用干擦镜纸指擦一次，把大部分的油去掉，再用蘸有少许清洁剂或二甲苯的擦镜纸擦一次，最后再用于擦镜纸措擦一次。至于玻片标本上的油，如果是有盖玻片的永久制片，可直接用上述方法擦干净：如果是无盖玻片的标本，则载玻片上的油可用拉纸法措擦，即先把小张擦镜纸盖在油滴上，再往次即可干净纸上滴几滴清洁剂或二甲苯，趁湿将纸往外拉，如此反复几次即可干净。六、使用显微镜的注意事项1.在使用镜筒直立式显微镜时，镜筒倾斜的角度不能超过45°，以免重心后移使显微镜倾倒。在观察带有液体的临时装片时，不要使用倾斜关节，以免由于载物台的倾斜而使液体流到显微镜上。2.不可随意拆卸显微镜上的零部件，以免丢失损坏或使灰尘落入镜内。3.显微镜的光学部件不可用纱布、手帕、普通纸张或手指措擦，以免磨损镜面，需要时只能用擦镜纸轻轻擦拭。机械部分可用纱布等擦拭。4.在任何时候，特别是使用高倍镜或油镜时，都不要一边在目镜中观察，一边下降镜筒或上升载物台），以避免镜头与玻片相撞，损坏镜头或玻片标本。5、显微镜使用完后应及时复原。先升高镜筒（或下降载物台），取下玻片标本，使物镜转离通光孔。例如，镜筒、载物台是倾斜的，应恢复直立或水平状态。然后下降镜筒（或上升载物台），使物镜与载物台相接近。垂直反光镜，下降聚光器，关小光圈，关闭电源，6.在利用显微镜观察标本时，要养成两眼同时静开，双手并用（左手操纵调焦螺旋，右手操纵标本移动器）的习惯，必要时应一边观察一边记录。七、光学显微镜的维护1、日常维护保养（1)防尘光学元件表面落入灰尘，不仅影响光线通过，而且经光学系统放大后，会生成13
13 应倒转微调螺旋重新自低倍镜开始。 （4）调节光阑：高倍镜下视野一般较暗，应将光阑开得稍大。用高倍观察完毕，须先转 回低倍镜，或将高倍镜头移开后，再取制片，切勿在高倍显微镜下取出或放入制片，以免损 坏透镜。 3. 油镜的使用方法 （1）用高倍镜找到所需观察的标本物像，并将需要进一步放大的部位移至视野中央。 （2）将聚光器升至最高位置并将光圈开至最大(因油镜所需光线较强)。 （3）转动物镜转换盘，移开高倍镜，往玻片标本上需观察的部位(载玻片的正面，相当 于通光孔的位置)滴一滴香柏油(折光率 1.51)或液状石蜡(折光率 1.46)作为介质，然后在眼睛 的注视下，使油镜转至工作状态。此时油镜的下端镜面一般应正好浸在油滴中。 （4）注视目镜中，同时小心而缓慢地转动微调螺旋(注意：这时只能使用微调螺旋，千 万不要使用粗调螺旋)使镜头微微上升(或使载物台下降)，直至视野中岀现凊晰的物像。操作 时不要反方向转动微调螺旋，以免镜头下降压碎标本或损坏镜头。 （5）油镜使用完后，必须及时将镜头上的油擦拭干净。操作时先将油镜升高 1cm，并将 其转离通光孔，先用干擦镜纸揩擦一次，把大部分的油去掉，再用蘸有少许清洁剂或二甲苯 的擦镜纸擦一次，最后再用干擦镜纸揩擦一次。至于玻片标本上的油，如果是有盖玻片的永 久制片，可直接用上述方法擦干净；如果是无盖玻片的标本，则载玻片上的油可用拉纸法揩 擦，即先把小张擦镜纸盖在油滴上，再往次即可干净纸上滴几滴清洁剂或二甲苯，趁湿将纸 往外拉，如此反复几次即可干净。 六、使用显微镜的注意事项 1. 在使用镜筒直立式显微镜时，镜筒倾斜的角度不能超过 45°，以免重心后移使显微镜 倾倒。在观察带有液体的临时装片时，不要使用倾斜关节，以免由于载物台的倾斜而使液体 流到显微镜上。 2. 不可随意拆卸显微镜上的零部件，以免丢失损坏或使灰尘落入镜内。 3. 显微镜的光学部件不可用纱布、手帕、普通纸张或手指揩擦，以免磨损镜面，需要 时只 能用擦镜纸轻轻擦拭。机械部分可用纱布等擦拭。 4. 在任何时候，特别是使用高倍镜或油镜时，都不要一边在目镜中观察，一边下降镜 筒或上升载物台)，以避免镜头与玻片相撞，损坏镜头或玻片标本。 5. 显微镜使用完后应及时复原。先升高镜筒(或下降载物台)，取下玻片标本，使物镜转 离通光孔。例如，镜筒、载物台是倾斜的，应恢复直立或水平状态。然后下降镜筒(或上升 载物台)，使物镜与载物台相接近。垂直反光镜，下降聚光器，关小光圈，关闭电源。 6. 在利用显微镜观察标本时，要养成两眼同时睁开，双手并用(左手操纵调焦螺旋，右 手操纵标本移动器)的习惯，必要时应一边观察一边记录。 七、光学显微镜的维护 1、日常维护保养 (1)防尘光学元件表面落入灰尘，不仅影响光线通过，而且经光学系统放大后，会生成
很大的污斑，影响观察.灰尘、砂粒落入机械部分，还会增加磨损，引起运动受阻，危害同样很大.注意保持显微镜的清洁。(2)防潮光学镜片就容易生霉、生雾。机械零件受潮后，容易生锈。显微镜箱内应放置1~2袋硅胶作干燥剂。(3)防热避免热胀冷缩引起镜片的开胶与脱落。因此，生物显微镜要放置在干燥阴凉、无尘、无腐蚀的地方。使用后，要立即擦拭干净，用防尘透气罩罩好或放在箱子内。当显微镜闲置时，用塑料罩盖好，并储放在干燥的地方防尘防霉。将物镜和目镜保存在干燥器之类的容器中，并防些干燥剂。(4)防腐蚀显微镜不能和具有腐蚀性的化学试剂放在一起。如硫酸、盐酸、强碱等。2.光学系统的维护保养透镜的清洁使用后用干净柔软的绸布轻轻擦拭目镜和物镜镜片。聚光镜和反光镜只要擦干净就可以了。有较顽固的污迹，可用长纤维脱脂棉或干净的细棉布蘸少些二甲笨或镜头清洗液(3份酒精：1份乙醚)擦拭，然后用干净细软的绸布擦干或用吹风球吹干。3.机械系统的维护保养滑动部位：定期涂些中性润滑脂油漆和塑料表面的清洁：顽固的污迹可以使用软性的清洁剂来清洗，建议使用硅布。塑料部分：用软布蘸水就可以清洗了。注意：不要使用有机溶剂（如酒精，乙醚，稀释剂等）。因为会腐蚀机械和油漆，造成损坏。注意：清洗液干方不能渗入到物镜镜片内部，否则会损坏物镜镜片。纯酒精和二甲苯容易燃烧，在将电源开关打开或关闭时要特别当心不要引燃这些液体。物镜和目镜的生霉生雾的处理办法准备30%无水乙醇+70%乙醚，将不同镜头单独分开放置干燥剂器皿中，最好用棉花棒，纱布，柔软的刷子等比较柔软的东西来擦拭油镜当时就要清洗。特别是100X的油镜，处理不当的话，前片容易浸油或开胶。目镜可以自己拆下来清洗，16X目镜注意别装反了，前片凹面在上。物镜不要随便拆下。注意：擦洗镜头时，不能过用力，以防止损伤镀膜层。一般股2个月最好能集中保养一次。显微镜多时，各个镜头要标号以免弄错了搭配。4.定期检查为了保持性能的稳定，建议做定期的检查，保养。综上所述，对于生物显微镜的维护保养，主要做到防尘、防潮、防热、防腐蚀。用后及时清洗擦拭于净，并定期在有关部位加注中性润滑油脂。对于一些结构复杂，装配精密的零部件，如果没有一定的专业知识，一定的技能和专用工具，就不能擅自拆装，以免损坏零部件。八、思考题1.使用油镜时，为什么必须用香柏油？2.镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？3.影响显微镜分辨率的因素有哪些？实验五木材显微切片技术一、实验目的学习木材永久切片和临时切片的制作方法，为今后木材解剖研究与木材鉴定工作打好基础，练好技能。14
14 很大的污斑，影响观察.灰尘、砂粒落入机械部分，还会增加磨损，引起运动受阻，危害同 样很大.注意保持显微镜的清洁。 (2)防潮光学镜片就容易生霉、生雾。机械零件受潮后，容易生锈。显微镜箱内应放置 1～ 2 袋硅胶作干燥剂。 (3)防热避免热胀冷缩引起镜片的开胶与脱落。因此，生物显微镜要放置在干燥阴凉、 无尘、无腐蚀的地方。使用后，要立即擦拭干净，用防尘透气罩罩好或放在箱子内。当显微 镜闲置时，用塑料罩盖好，并储放在干燥的地方防尘防霉。将物镜和目镜保存在干燥器之类 的容器中，并防些干燥剂。 (4)防腐蚀显微镜不能和具有腐蚀性的化学试剂放在一起。如硫酸、盐酸、强碱等。 2. 光学系统的维护保养透镜的清洁使用后用干净柔软的绸布轻轻擦拭目镜和物镜镜片。 聚光镜和反光镜只要擦干净就可以了。有较顽固的污迹，可用长纤维脱脂棉或干净的细棉布 蘸少些二甲笨或镜头清洗液(3 份酒精∶1 份乙醚)擦拭，然后用干净细软的绸布擦干或用吹 风球吹干。 3. 机械系统的维护保养滑动部位:定期涂些中性润滑脂油漆和塑料表面的清洁:顽固的 污迹可以使用软性的清洁剂来清洗，建议使用硅布。塑料部分:用软布蘸水就可以清洗了。 注意:不要使用有机溶剂(如酒精，乙醚，稀释剂等)。因为会腐蚀机械和油漆，造成损坏。 注意:清洗液千万不能渗入到物镜镜片内部，否则会损坏物镜镜片。纯酒精和二甲苯容 易燃烧，在将电源开关打开或关闭时要特别当心不要引燃这些液体。物镜和目镜的生霉生雾 的处理办法准备 30%无水乙醇+70%乙醚，将不同镜头单独分开放置干燥剂器皿中，最好用 棉花棒，纱布，柔软的刷子等比较柔软的东西来擦拭油镜当时就要清洗。特别是 100X 的油 镜，处理不当的话，前片容易浸油或开胶。目镜可以自己拆下来清洗，16X 目镜注意别装反 了，前片凹面在上。物镜不要随便拆下。注意:擦洗镜头时，不能过用力，以防止损伤镀膜 层。一般 2 个月最好能集中保养一次。显微镜多时，各个镜头要标号以免弄错了搭配。 4.定期检查为了保持性能的稳定，建议做定期的检查，保养。 综上所述，对于生物显微镜的维护保养，主要做到防尘、防潮、防热、防腐蚀。用后及 时清洗擦拭干净，并定期在有关部位加注中性润滑油脂。对于一些结构复杂，装配精密的零 部件，如果没有一定的专业知识，一定的技能和专用工具，就不能擅自拆装，以免损坏零部 件。 八、思考题 1. 使用油镜时，为什么必须用香柏油？ 2. 镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？ 3. 影响显微镜分辨率的因素有哪些？ 实验五 木材显微切片技术 一、实验目的 学习木材永久切片和临时切片的制作方法，为今后木材解剖研究与木材鉴定工作打好基 础，练好技能
二、实验原理采用光学显微镜研究一般生物体的内部结构，在自然状态下是无法观察清楚的，木材必须经过某种处理，将组织分离成单个细胞或薄片，光线才能通过细胞。为了适应这个需要，就产生了光学显微镜制片技术。切片法，是利用锐利的刀具将组织切成极薄的片层，材料须经过一系列特殊的处理，如固定、脱水、包埋、切片、染色等，过程十分繁复。在制作过程中，还要经过一系列的物理和化学的处理，这些处理方法可根据各种不同材料的性质要求进行合理选择。切片法虽然工序繁，技术复杂，但是，它最能保持细胞间的正常的相互关系，能较好和较长时间地保留细胞的原貌，所以仍然是光学显微镜的主要制片方法。三、实验材料木材样品(标本)、乙醇、冰醋酸、双氧水、甘油、番红、铁钒、二甲苯、中性树胶。四、实验仪器设备光学显微镜、木材切片机、切片刀、单面刀片、水浴锅、培养皿、解部针、镊子、毛笔、载玻片和盖玻片。五、实验步骤1.试样制备通常取材于胸高(1.3米)处或者以上正常部位。试材尺寸（弦向×径向x纵向）为15mmx15mm×3mm，必须具备标准的三切面，便于观察各切面上细胞排列的情况。2.排除空气切片前木块内部的空气要进行排除，通常置木块于水中煮沸，再浸于冷水中使其冷却，反复数次，使细胞腔内空气排出，充分吸水；或者用水煮至沉底。水煮兼有使木材软化的效果，部分针叶树材或软阔叶树材，经水反复煮沸，即可供切片用。3.软化木材因木材坚硬，切片时不但不易切削，且易损坏刀口。所以排除空气之后，需用药剂处理木材，使之软化后才能进行切片。软化方法有以下几种：甘油、酒精软化法一试材先经排除空气处理，再以浓甘油与90%酒精各的混合液浸渍，软化时间视树种而异，由两个星期至数月不等，这种混合液，使木材组织经久不破坏，但若贮存过久，会造成木材染色困难。冰醋酸、双氧水混合剂软化法一一冰醋酸1份，30%双氧水2份的混合剂，试材置于其中并在水浴锅中加热，软化时间视树种而异，一般针叶树材约45分钟，阔叶树材约为2-3小时，有时也可用此混合液浸泡木材，使其软化。经此法软化后的木材，须置于流水中冲洗数小时除去木材中的酸液，避免腐蚀刀口。经冲洗去酸后，可贮存于甘油、酒精混合剂中以备切片。氟氢酸软化法一木材排除空气后，浸入氟氢酸水溶液中，氟氢酸的浓度有10%、20%、40%，根据木材不同的硬度来选定，50%以上的浓度很少用。浸泡时间常在1-2个星期，极硬的木材，须1-2个月开始软化。自氟氢酸中取出材料，须用流水冲洗，再用水煮沸，反复数次待酸液去净，用剃刀试切片，如易切片才可用，否则仍放回氟氢酸溶液中。此法适用于15
15 二、实验原理 采用光学显微镜研究一般生物体的内部结构，在自然状态下是无法观察清楚的，木材必 须经过某种处理，将组织分离成单个细胞或薄片，光线才能通过细胞。为了适应这个需要， 就产生了光学显微镜制片技术。 切片法，是利用锐利的刀具将组织切成极薄的片层，材料须经过一系列特殊的处理，如 固定、脱水、包埋、切片、染色等，过程十分繁复。在制作过程中，还要经过一系列的物理 和化学的处理，这些处理方法可根据各种不同材料的性质要求进行合理选择。切片法虽然工 序繁琐，技术复杂，但是，它最能保持细胞间的正常的相互关系，能较好和较长时间地保留 细胞的原貌，所以仍然是光学显微镜的主要制片方法。 三、实验材料 木材样品(标本)、乙醇、冰醋酸、双氧水、甘油、番红、铁钒、二甲苯、中性树胶。 四、实验仪器设备 光学显微镜、木材切片机、切片刀、单面刀片、水浴锅、培养皿、解剖针、镊子、毛笔、 载玻片和盖玻片。 五、实验步骤 1. 试样制备 通常取材于胸高(1.3 米)处或者以上正常部位。试材尺寸（弦向×径向×纵向）为 15mm× 15mm×3mm，必须具备标准的三切面，便于观察各切面上细胞排列的情况。 2. 排除空气 切片前木块内部的空气要进行排除，通常置木块于水中煮沸，再浸于冷水中使其冷却， 反复数次，使细胞腔内空气排出，充分吸水；或者用水煮至沉底。水煮兼有使木材软化的效 果，部分针叶树材或软阔叶树材，经水反复煮沸，即可供切片用。 3. 软化木材 因木材坚硬，切片时不但不易切削，且易损坏刀口。所以排除空气之后，需用药剂处理 木材，使之软化后才能进行切片。软化方法有以下几种： 甘油、酒精软化法——试材先经排除空气处理，再以浓甘油与 90%酒精各的混合液浸 渍，软化时间视树种而异，由两个星期至数月不等，这种混合液，使木材组织经久不破坏， 但若贮存过久，会造成木材染色困难。 冰醋酸、双氧水混合剂软化法——冰醋酸 1 份，30%双氧水 2 份的混合剂，试材置于其 中并在水浴锅中加热，软化时间视树种而异，一般针叶树材约 45 分钟，阔叶树材约为 2-3 小时，有时也可用此混合液浸泡木材，使其软化。经此法软化后的木材，须置于流水中冲洗 数小时除去木材中的酸液，避免腐蚀刀口。经冲洗去酸后，可贮存于甘油、酒精混合剂中以 备切片。 氟氢酸软化法——木材排除空气后，浸入氟氢酸水溶液中，氟氢酸的浓度有 10%、20%、 40%，根据木材不同的硬度来选定，50%以上的浓度很少用。浸泡时间常在 1-2 个星期，极 硬的木材，须 1-2 个月开始软化。自氟氢酸中取出材料，须用流水冲洗，再用水煮沸，反复 数次待酸液去净，用剃刀试切片，如易切片才可用，否则仍放回氟氢酸溶液中。此法适用于
比较硬的木材，准备试材时木块宜大些，避免木材组织完全破坏。酸醋酸纤维素软化法一一适用于极硬的木材。将小块试材先浸于酒精中1-2天，移入纯酮中约2小时，再浸于酒精；然后移入12%醋酸纤维素丙酮液中，（配方为：醋酸纤维素12克溶于100毫升的丙酮中，待完全溶解后即成），浸泡时间，视树种硬度而异材质较软的木材，约两天，坚硬木材约一星期左右，极硬的木材，约2-3星期，如将此溶液加热至40℃，可缩短软化时间。软化后的木材，可移入丙酮中溶去醋酸纤维素，然后，置于酒精中，即可进行切片。甘油煮沸软化法一一木材经排除空气，置于甘油（用水稀释），放置水浴锅中反复煮沸，木材即可软化。4.切片(1)切片到安装：将切片刀紧旋在切片机上，并调整切片刀的刀刃与试样切面的角度。(2)试样安装：先将试样紧旋在切片机的试件夹中然后转动试件夹的螺旋，使被切的试样切面成水平面，并将螺旋拧紧。(3)切片操作：先调整试件夹螺旋，使试样切面接近刀刃，并将螺旋紧。然后调整切片厚度上升刻度，右手推动推杆，左手用毛笔接片并置于盛有蒸馏水的培养皿中。5.染色由于各类细胞的细胞壁厚薄不同，细胞腔内含物有无与内含物种类不同，对不同的染色剂会发生不同的物理、化学反应，各类细胞的细胞壁或细胞腔内含物会呈现不同的颜色。根据这一原理，可对切片进行多重染色。木材切片通常用番红染成红色。碱性配方为番红1.0克，蒸馏水100毫升，或者番红1.0克，乙醇50%或70%100毫升。染色前，先将切片用蒸馏水洗干净，后将切片置于盛有番红染液的培养皿中，染色时间随切片的厚度及树种而定。染色流程为蒸馏水漂洗(3-5次)→铁矾液(10min)→蒸馏水漂洗(3-5次）→番红染液(0.5-2d)。6.脱水用不同浓度的酒精由低浓度到最后纯酒精来除净木材中的水分。木材切片用番红水溶液染色，经过50%、70%、85%、95%、100%酒精脱水，再经100%酒精与二甲苯各半混合液中，最后至二甲苯中透明。7.透明采用二甲苯透明，一般处理5-10分钟即可。若不透明，需再用100%酒精处理，直至置切于二甲苯中呈透明为止。8.封固经过透明的切片，取出放在载玻片上，三个切面上滴少许加拿大树脂胶，加盖盖玻片，使其边与载玻片相接触，轻轻放下，盖玻片自然落下，再在盖玻片上用镊子末端轻微施力，驱除气泡，挤出多余树胶。如遇到切片内有气泡或混浊不清的湿气，将切片再置纯酒精中脱水，历时不宜久，即入二甲苯中透明，取出装片。然后，将制片放于无灰尘处任其树脂自然于燥，或放入低温烘箱（30C）中加速于燥，树脂于燥后，用小刀刮去多余树脂，再用二甲苯措净制片，在载玻片左面贴上标签，标明学名、中文名、产地制片日期等，即为永久制片。9.临时切片的制作方法试样制备与试样软化与永久玻片制作方法相同，甚至试样可以不经软化处理。临时玻片16
16 比较硬的木材，准备试材时木块宜大些，避免木材组织完全破坏。 酸醋酸纤维素软化法——适用于极硬的木材。将小块试材先浸于酒精中 1-2 天，移入纯 酮中约 2 小时，再浸于酒精；然后移入 12%醋酸纤维素丙酮液中，(配方为：醋酸纤维素 12 克溶于 100 毫升的丙酮中，待完全溶解后即成)，浸泡时间，视树种硬度而异材质较软的木 材，约两天，坚硬木材约一星期左右，极硬的木材，约 2-3 星期，如将此溶液加热至 40℃， 可缩短软化时间。软化后的木材，可移入丙酮中溶去醋酸纤维素，然后，置于酒精中，即可 进行切片。 甘油煮沸软化法——木材经排除空气，置于甘油(用水稀释)，放置水浴锅中反复煮沸， 木材即可软化。 4. 切片 (1)切片到安装：将切片刀紧旋在切片机上，并调整切片刀的刀刃与试样切面的角度。 (2)试样安装：先将试样紧旋在切片机的试件夹中然后转动试件夹的螺旋，使被切的试 样切面成水平面，并将螺旋拧紧。 (3)切片操作：先调整试件夹螺旋，使试样切面接近刀刃，并将螺旋拧紧。然后调整切 片厚度上升刻度，右手推动推杆，左手用毛笔接片并置于盛有蒸馏水的培养皿中。 5. 染色 由于各类细胞的细胞壁厚薄不同，细胞腔内含物有无与内含物种类不同，对不同的染色 剂会发生不同的物理、化学反应，各类细胞的细胞壁或细胞腔内含物会呈现不同的颜色。根 据这一原理，可对切片进行多重染色。木材切片通常用番红染成红色。碱性配方为番红 1.0 克，蒸馏水 100 毫升，或者番红 1.0 克，乙醇 50%或 70%100 毫升。染色前，先将切片用蒸 馏水洗干净，后将切片置于盛有番红染液的培养皿中，染色时间随切片的厚度及树种而定。 染色流程为蒸馏水漂洗(3-5 次)→铁矾液(10min)→蒸馏水漂洗(3-5 次)→番红染液(0.5-2d)。 6. 脱水 用不同浓度的酒精由低浓度到最后纯酒精来除净木材中的水分。木材切片用番红水溶液 染色，经过 50%、70%、85%、95%、100%酒精脱水，再经 100%酒精与二甲苯各半混合液 中，最后至二甲苯中透明。 7. 透明 采用二甲苯透明，一般处理 5-10 分钟即可。若不透明，需再用 100%酒精处理，直至置 切于二甲苯中呈透明为止。 8. 封固 经过透明的切片，取出放在载玻片上，三个切面上滴少许加拿大树脂胶，加盖盖玻片， 使其边与载玻片相接触，轻轻放下，盖玻片自然落下，再在盖玻片上用镊子末端轻微施力， 驱除气泡，挤出多余树胶。如遇到切片内有气泡或混浊不清的湿气，将切片再置纯酒精中脱 水，历时不宜久，即入二甲苯中透明，取出装片。然后，将制片放于无灰尘处任其树脂自然 干燥，或放入低温烘箱(30℃)中加速干燥，树脂干燥后，用小刀刮去多余树脂，再用二甲苯 揩净制片，在载玻片左面贴上标签，标明学名、中文名、产地制片日期等，即为永久制片。 9. 临时切片的制作方法 试样制备与试样软化与永久玻片制作方法相同，甚至试样可以不经软化处理。临时玻片
要求的切片大小、厚薄都不是很严格，因此可用单面刀片代替切片刀。徒手切片时，右手握刀片，刀口向内，左手握标本，刀片在拟切部位自左上向右下拖动，一气呵成，并将切片置于盛有蒸馏水的培养皿中。将切片漂洗2或3次后置于盛有番红染液的培养皿中，染色10min。将经染色的切片用蒸馏水漂洗于净，后将切片置于培养血中。然后用不同浓度的乙醇，除净切片材料中的水分，程序与永久片的脱水相同为了增强切片的透光性，也可对切片进行透明处理，但只需经1或2次二甲苯处理即可。取干净的载玻片，并在载玻片中央滴上一小滴甘油，用镊子将切片放置到载玻片中央有甘油的位置上。用镊子将盖玻片把切片盖上即可观察，注意不要让甘油弄脏载玻片及盖玻片。六、实验要求1.每位学生制作永久切片或临时切片的数量不少于1个树种。2.实验结束后填写实验报告。七、思考题1.冰醋酸、双氧水混合剂软化法木材显微切片的具体流程？2.试比较各种软化法的优缺点。实验六针叶树材显微构造一、目的与要求木材显微构造主要观察木材细胞形态及木材细胞壁特征，是木材微观识别的基础。本实验认识针叶树材的管胞，轴向薄壁组织，木射线，树脂道等在三个切面上的形态，以及管胞的细胞壁上的特征，初步了解构成针叶树材的解部分子及其相互结合的关系。二、实验用木材切片马尾松PinusmassonianaLamb华山松PinusarmandiFranch福建柏Fokieniahodginsii（Dunn）HenryetThomas柏木CupressusfunebrisEndl铁杉Tsugachinensispritz银杉 Cathaya argyrophylla Chun et Kuang红松Pinuskoraiensis Sieb.etZucc三、实验仪器设备普通光学显微镜。四、实验方法1.打开显微镜和电脑。2.将木材切片置于显微镜载物台上，按照显微镜的使用方法操作。3.将电脑中的学生程序打开，并进行相应操作。4.在显微镜下观察木材切片的三个切面（横切面、径切面、弦切面）。观察时首先是横切面。例如观察红松木材切片要点如下：17
17 要求的切片大小、厚薄都不是很严格，因此可用单面刀片代替切片刀。徒手切片时，右手握 刀片，刀口向内，左手握标本，刀片在拟切部位自左上向右下拖动，一气呵成，并将切片置 于盛有蒸馏水的培养皿中。将切片漂洗 2 或 3 次后置于盛有番红染液的培养皿中，染色 10min。 将经染色的切片用蒸馏水漂洗干净，后将切片置于培养皿中。然后用不同浓度的乙醇，除净 切片材料中的水分，程序与永久片的脱水相同为了增强切片的透光性，也可对切片进行透明 处理，但只需经 1 或 2 次二甲苯处理即可。取干净的载玻片，并在载玻片中央滴上一小滴甘 油，用镊子将切片放置到载玻片中央有甘油的位置上。用镊子将盖玻片把切片盖上即可观察， 注意不要让甘油弄脏载玻片及盖玻片。 六、实验要求 1. 每位学生制作永久切片或临时切片的数量不少于 1 个树种。 2. 实验结束后填写实验报告。 七、思考题 1. 冰醋酸、双氧水混合剂软化法木材显微切片的具体流程？ 2. 试比较各种软化法的优缺点。 实验六 针叶树材显微构造 一、目的与要求 木材显微构造主要观察木材细胞形态及木材细胞壁特征，是木材微观识别的基础。本 实验认识针叶树材的管胞，轴向薄壁组织，木射线，树脂道等在三个切面上的形态，以及管 胞的细胞壁上的特征，初步了解构成针叶树材的解剖分子及其相互结合的关系。 二、实验用木材切片 马尾松 Pinus massonianaLamb. 华山松 Pinus armandii Franch. 福建柏 Fokienia hodginsii （Dunn）Henry et Thomas 柏木 Cupressus funebris Endl. 铁杉 Tsuga chinensis pritz 银杉 Cathaya argyrophylla Chun et Kuang 红松 Pinus koraiensis Sieb.et Zucc. 三、实验仪器设备 普通光学显微镜。 四、实验方法 1. 打开显微镜和电脑。 2. 将木材切片置于显微镜载物台上，按照显微镜的使用方法操作。 3. 将电脑中的学生程序打开，并进行相应操作。 4. 在显微镜下观察木材切片的三个切面(横切面、径切面、弦切面)。观察时首先是横切 面。例如观察红松木材切片要点如下：