续前 四、HPLC的特点和应用 快 高柱效—n=104片/米,柱效高(远高于一般LC 高灵敏度 高选择性 分析速度快 应用范围广泛(可分析80%有机化合物
续前 四、HPLC的特点和应用 “三高” “一快” “一广” 高柱效——n=104片/米,柱效高(远高于一般LC) 高灵敏度 高选择性 分析速度快 应用范围广泛(可分析80%有机化合物)
第二节基本理论和条件选择 热力学理论:塔板理论——平衡理论基础 动力学理论:速率理论— Vander方程 塔板理论 速率理论 HPLC法中分离条件的选择
第二节 基本理论和条件选择 热力学理论:塔板理论——平衡理论 基础 动力学理论:速率理论——Vander方程 一、塔板理论 二、速率理论 三、HPLC法中分离条件的选择
塔板理论 理=L/nn )2=5.54( =16 1/2 Hcc=lin =l6 k k 1+k
一、塔板理论 H理 = L / n 理 2 2 1 2 2 ( ) 5.54( ) 16( ) W t W t t n R R R = = = 理 eff eff H = L / n 2 1 2 ' 2 ' 16( ) 5.54( ) W t W t n R R eff = = 0 ' t t k R = 2 ) 1 ( k k n n eff + = 理
二、速率理论(与GC对比) 1.GC:H=A+B/+C.t(填充柱) 或H=B/u+C·u(毛细管柱) A=2.p A·cdp B=2y·D,=2y·D B B∝D T D 或D C +C T D
二、速率理论(与GC对比) GC:H = A+ B/ u +C u (填充柱) 或 H = B/u +Cu (毛细管柱) A = 2 dp A dp B Dm Dg = 2 = 2 R B Dg B t , M T D T Dg 或 g C = Cm +Cs = Cg +Cl = Cl l l D df C 2 T DL 1
续前 2. HPLC:H=A+cu B=2y Dm D T 柱温T↓低,流动相n个大→B相忽略 >讨论: 1)流动相流速对HPLC板高的影响(与GC对比)next >1cm/s时,H∞u y→H,n个→柱效个,但2个 →兼顾柱效和分析时间,选择u=1ml/min 2)涡流扩散项及其影响next A=2·dp A∞.d a,d→A→H,n个→柱效个
续前 2)涡流扩散项及其影响 next HPLC:H = A+C u B Dm = 2 T Dm 柱温T 低,流动相 大 B相忽略 R u H n t u c m s H u , 柱效 ,但 1 / 时, 兼顾柱效和分析时间,选择u =1ml / min 2. ➢ 讨论: 1)流动相流速对HPLC板高的影响(与GC对比)next A = 2 dp A dp ,dp A H ,n 柱效