实验步骤 1.RNA电泳 取10 ug RNA旋转真空干燥,溶于20ul新配的样品缓 冲液。置样品于65℃水浴中5分钟,迅速移入冰中冷却, 再加4u1上样缓冲液,混匀。移胶至电泳槽内,注入电泳 缓冲液1×MOPS,浸没凝胶,轻轻拔去疏子。接通电源,负 极靠近上样孔。吸取样品24u,注入上样孔内。开启电源, 电压调至100V。电泳约2小时,至溴酚蓝移至前缘时,关 闭电源。 轻轻取出凝胶,移至紫外透射反射分析仪上检查电泳 结果。在凝胶一侧放把尺,拍照
2.RNA转移至硝酸纤维素膜 取一洁净的容器,注入20×SSC,容器上缘架一水平玻 璃板。取2-4层滤纸,纸宽同凝胶长,纸长足以经玻璃板两 侧浸入20×S$C中。待滤纸全都湿透后,滚动移液管赶走滤 纸间及其与玻璃板间的气泡。切去凝胶上样孔及以上部分, 在凝胶第一上样孔处切去一小角,作为记号,把凝胶底朝上 放于滤纸上,用移液管赶走凝胶与滤纸间的气泡。把硝酸纤 维素膜裁成凝胶大小,对应凝胶剪去一小角,先浸湿于双蒸 水中,再浸于20×S$C中,取出平放于凝胶之上,缺角处与 凝胶缺角处对齐。用移液管赶走凝胶与硝酸纤维素膜间的气 泡。膜上置2-4层20×SSC浸湿的滤纸,用移液管赶走滤纸 与硝酸纤维素膜间的气泡