农业植物病理学实验指导 实验一、水稻病害的识别与诊断 、目的要求 通过本实验要求能对水稻上发生普通为害的稻瘟病、白叶枯病、纹枯病、胡麻叶斑病、稻曲病、恶苗病、水稻 绵腐病等能独立诊断、鉴定:识别稻瘟病的不同症状类型,正确区分稻瘟病和胡麻叶斑病,掌握白叶枯病的简易诊断方法:并能ˉ 害的主要症状。 实验内容和方法 (一)稻瘟病 病原:有性阶段为 Magnaporthe grisea无性阶段为 Pyricularia grisea 1.症状观察:取新鲜病株标本或盒装标本仔细观察叶部、穗颈、节部、谷粒上的症状。 叶瘟症状:主要识别慢性型病斑和急性型病斑。慢性型病斑是何形状?病斑中央、内圈和外圈各是什么颜色?病斑 褐色坏死线向病斑外延伸?病斑上有无霉层?急性型病斑呈何形状?如有,注意其大小、形状、颜色。 穗颈瘟症状:穗颈瘟发生在什么部位?呈何颜色?病变部分大约有多长?病健部交界清晰否?其上有无霉层? 饱满否? 节瘟症状:观察病节部呈何颜色?是否凹陷? 谷粒瘟症状:观察有病谷粒上的病斑大小、颜色。谷粒饱满 2.病原鉴定:当在适当温度高湿的条件下,叶部、节部、穗颈、谷粒等部位的病斑上都可产生青灰色的霉层,此为病原 子梗及分生孢子。先取长有青灰色的叶部病斑或穗颈病斑直接置于低倍显微镜下,观察其分生孢子梗及分生孢子的着生形状,注 梗是单生还是数根成丛?分生孢子着生在分生孢子梗的什么部位?然后用解剖刀轻轻挑取少量霉层在载玻片的水滴中制片镜检, 子梗及分生孢子形态。分生孢子呈何形状?有几个横隔?孢子基部有无短小的脚胞?孢子梗是何形状? ‖Q的诬 (二)胡麻叶斑病 病原:无性阶段为 Bipolaris oryzae(异名: HeLminthosporium oryzae) 有性阶段为 Cochliobolus migabeanus 1.症状观察:此病从苗期到成熟期的植株地上部位均可发生,但以叶片发生最普遍,其次是谷粒、穗颈、枝梗 实验中主要观察叶斑症状。注意病斑的达大小、形状、颜色与稻瘟病有何区别?病斑两端有无褐色坏死线向两端延伸? 2.病原鉴定:胡麻叶斑病的叶斑上一般很少产生孢子,病穗颈、特别是病谷粒上在潮湿的条件下较易长出黑褐色绒毛状 的黑褐色霉层(如果只有叶斑供实验镜检病原,则要多刮取几个病斑上的病原)制片镜检 观察分生孢子梗的形状、颜色、分隔,注意孢子梗顶端有无着生过孢子的痕迹?分生孢子呈何形状、颜色?有几个分隔?(注意 3.鉴别胡麻叶斑病与稻瘟病的方法:由于胡麻叶斑病的叶斑与稻瘟病的叶斑有时容易混淆,穗颈部和谷粒上的病斑二芢 (1)田间现场判断:稻瘟病多易发生在土壤肥沃、稻株生长嫩绿、茂密的田块和地段,它在田间的分布在开始时多有发 瘠、缺肥,植株生长不良的田块或地段,它在田间的分布比较均匀,没有明显的发病中心 (2)将待鉴别的病叶或病穗颈、谷粒等在28℃左右的湿度下保湿培养,1-2天后,稻瘟病不论是病叶、病穗颈和病谷 叶一般不易长出特征性的霉层。胡麻叶斑病的病穗颈和病谷粒上较易长出霉层,但霉层为黑褐色绒毛状,易与稻瘟病区分。再将
农业植物病理学实验指导 实验一、水稻病害的识别与诊断 一、 目的要求 通过本实验要求能对水稻上发生普通为害的稻瘟病、白叶枯病、纹枯病、胡麻叶斑病、稻曲病、恶苗病、水稻烂秧病中的 绵腐病等能独立诊断、鉴定；识别稻瘟病的不同症状类型，正确区分稻瘟病和胡麻叶斑病，掌握白叶枯病的简易诊断方法；并能识别其他病 害的主要症状。 二、 实验内容和方法 （一）稻瘟病 病原：有性阶段为 Maganaporthe grisea 无性阶段为 Pyricularia grisea 1.症状观察：取新鲜病株标本或盒装标本仔细观察叶部、穗颈、节部、谷粒上的症状。 叶瘟症状：主要识别慢性型病斑和急性型病斑。慢性型病斑是何形状？病斑中央、内圈和外圈各是什么颜色？病斑的两端有无 褐色坏死线向病斑外延伸？病斑上有无霉层？急性型病斑呈何形状？如有，注意其大小、形状、颜色。 穗颈瘟症状：穗颈瘟发生在什么部位？呈何颜色？病变部分大约有多长？病健部交界清晰否？其上有无霉层？整穗的谷粒 饱满否？ 节瘟症状：观察病节部呈何颜色？是否凹陷？ 谷粒瘟症状：观察有病谷粒上的病斑大小、颜色。谷粒饱满否？ 2.病原鉴定：当在适当温度高湿的条件下，叶部、节部、穗颈、谷粒等部位的病斑上都可产生青灰色的霉层，此为病原菌的分生孢 子梗及分生孢子。先取长有青灰色的叶部病斑或穗颈病斑直接置于低倍显微镜下，观察其分生孢子梗及分生孢子的着生形状，注意分生孢子 梗是单生还是数根成丛？分生孢子着生在分生孢子梗的什么部位？然后用解剖刀轻轻挑取少量霉层在载玻片的水滴中制片镜检，观察分析孢 子梗及分生孢子形态。分生孢子呈何形状？有几个横隔？孢子基部有无短小的脚胞？孢子梗是何形状？ （二）胡麻叶斑病 病原：无性阶段为 Bipolaris oryzae （异名：Helminthosporium oryzae） 有性阶段为 Cochliobolus migabeanus 1.症状观察：此病从苗期到成熟期的植株地上部位均可发生，但以叶片发生最普遍，其次是谷粒、穗颈、枝梗。 实验中主要观察叶斑症状。注意病斑的达大小、形状、颜色与稻瘟病有何区别？病斑两端有无褐色坏死线向两端延伸？ 2.病原鉴定：胡麻叶斑病的叶斑上一般很少产生孢子，病穗颈、特别是病谷粒上在潮湿的条件下较易长出黑褐色绒毛状霉。用解剖刀刮取少量病穗颈或病谷粒上 的黑褐色霉层（如果只有叶斑供实验镜检病原，则要多刮取几个病斑上的病原）制片镜检。 观察分生孢子梗的形状、颜色、分隔，注意孢子梗顶端有无着生过孢子的痕迹？分生孢子呈何形状、颜色？有几个分隔？（注意与稻瘟病菌的孢子比较）。 3.鉴别胡麻叶斑病与稻瘟病的方法：由于胡麻叶斑病的叶斑与稻瘟病的叶斑有时容易混淆，穗颈部和谷粒上的病斑二者更难区分，简易的诊断方法是： （1）田间现场判断：稻瘟病多易发生在土壤肥沃、稻株生长嫩绿、茂密的田块和地段，它在田间的分布在开始时多有发病中心：而胡麻斑病多发生在土壤比较贫 瘠、缺肥，植株生长不良的田块或地段，它在田间的分布比较均匀，没有明显的发病中心。 （2）将待鉴别的病叶或病穗颈、谷粒等在 28℃左右的湿度下保湿培养，1-2 天后，稻瘟病不论是病叶、病穗颈和病谷粒都易生长出青灰色霉层：而胡麻斑病的病 叶一般不易长出特征性的霉层。胡麻叶斑病的病穗颈和病谷粒上较易长出霉层，但霉层为黑褐色绒毛状，易与稻瘟病区分。再将病部长出的病原菌制片镜检，二病的病原
菌则是显然不同,极易鉴别 (三)稻纹枯病 病原:无性阶段为: Rhizo tonia solani 有性阶段为: Pellicularia sasak 1.症状观察:取稻株观察稻株基部叶鞘上的病斑的形状、颜色(注意初期病斑的形状、颜色和中后期病斑的形状、颜色 菌丝团(将形成菌核)和暗褐色或土黄色的菌核?菌核呈何形状?仔细看,可否看到稻丛基部的株间有蛛丝状的菌丝体连接着? 的症状及何种颜色?稻穗有无发病?呈何状态?(请考虑:植株上部乃至穗部发病,意味着什么?) 2.病原鉴定:取人工培养的菌丝体制片镜检,观察菌丝有无颜色?菌丝分枝处是否缢缩?离分枝不远处有分隔否?再挑 的菌丝制片镜检,观察这种老熟菌丝性状如何分隔与前述菌丝有何不同?再取菌核在低倍镜下观察,表面呈何状态?剖视菌核 (四)水稻白叶枯 病原: xanthomonas oryzea p. oryzae(原名: xanthomonas oryzae) 1.症状观察 (1)普通症状:取新鲜病叶或蜡叶标本,观察病斑发生的部位,病斑的大小、性状和颜色。仔细观察病健交界处是否 如何?呈何颜色? (2)急性型症状:病叶上的病斑呈何形状?何种颜色?(与典型症状差别甚大,是何原因?) 2.病原鉴定:白叶枯病菌是一种细菌。鉴别所分离的细菌是否为白叶枯,要从培养性状、形态特征、染色反应、生 试验。这不是一两次实验所能完成的。较快速准确的鉴别手段是血清学反应和噬菌体测定。但血清学反应试验得预先准备白叶枯 白叶枯病菌的噬菌体。本实验只作以下白叶枯病菌的简易诊断 3.白叶枯病的简易诊断方法 首先进行症状的仔细观察,对有些症状不够经典,不易确诊的病叶可作如下简易诊断: (1)观察细菌喷菌现象:剪取可疑待检的病健交界处一小块。约2ⅷ*3π,放在载玻片的蒸馏水滴中,加盖玻片,静置 察,看小块的两端切口处有无细菌溢从维管束中溢出。如果有大量烟雾状的细菌从维管束中溢出,则证明是白叶枯病。(但请注」 用此法观察,也有细菌从维管束中溢出,因此,必须结合症状加以区分,水稻的自然枯黄叶用此法观察,没有细菌溢溢出,容易」 (2)保湿法:剪取供检验的可疑病叶的病健交界部一小段,长约1-2寸,分别插在培养皿中的洗净的湿沙中,然后加盖 小时以后,如果叶片上端的切口处有黄色混浊的露珠状菌脓,则证明是白叶枯病(注意点同上)。 (五)稻曲病 病原: Ustilaginoidea virens 分类地位 有性时期:子囊菌亚门核菌纲球壳菌目、麦角菌科、绿核菌属(又名“拟黑粉菌属” 无性时期:半知菌亚门、丝孢纲、从梗孢目、瘤座孢科、绿核菌属 1.症状观察:取病穗观察病粒形状、大小、颜色,一个穗中有多少个病粒?包在谷粒外的块状物为何物?其上的墨绿色 色相同否?可分为几层?各为什么颜色?
菌则是显然不同，极易鉴别。 （三）稻纹枯病 病原：无性阶段为：Rhizoctonia solani 有性阶段为：Pellicularia sasakii 1.症状观察：取稻株观察稻株基部叶鞘上的病斑的形状、颜色（注意初期病斑的形状、颜色和中后期病斑的形状、颜色有何区别？）；病部是否附有白色戎状的 菌丝团（将形成菌核）和暗褐色或土黄色的菌核？菌核呈何形状？仔细看，可否看到稻丛基部的株间有蛛丝状的菌丝体连接着？最后，再看看稻株中、上部茎杆及叶片上 的症状及何种颜色？稻穗有无发病？呈何状态？（请考虑：植株上部乃至穗部发病，意味着什么？） 2.病原鉴定：取人工培养的菌丝体制片镜检，观察菌丝有无颜色？菌丝分枝处是否缢缩？离分枝不远处有分隔否？再挑取集结在一起即将形成菌核的菌丝体团上 的菌丝制片镜检，观察这种老熟菌丝性状如何分隔与前述菌丝有何不同？再取菌核在低倍镜下观察，表面呈何状态？剖视菌核，内外层颜色是否一致？呈何颜色？ （四）水稻白叶枯 病原：Xanthomonas oryzea pv.oryzae （原名：Xanthomonas oryzae） 1.症状观察： （1）普通症状：取新鲜病叶或蜡叶标本，观察病斑发生的部位，病斑的大小、性状和颜色。仔细观察病健交界处是否清晰？呈何形状？病部有无菌胶？菌胶大小 如何？呈何颜色？ （2）急性型症状：病叶上的病斑呈何形状？何种颜色？（与典型症状差别甚大，是何原因？） 2.病原鉴定：白叶枯病菌是一种细菌。鉴别所分离的细菌是否为白叶枯，要从培养性状、形态特征、染色反应、生理生化反应、接种试验等方面进行观察和 试验。这不是一两次实验所能完成的。较快速准确的鉴别手段是血清学反应和噬菌体测定。但血清学反应试验得预先准备白叶枯病菌的抗血清；噬菌体测定则需预先准备 白叶枯病菌的噬菌体。本实验只作以下白叶枯病菌的简易诊断。 3.白叶枯病的简易诊断方法 首先进行症状的仔细观察，对有些症状不够经典，不易确诊的病叶可作如下简易诊断： （1）观察细菌喷菌现象：剪取可疑待检的病健交界处一小块。约 2mm*3mm，放在载玻片的蒸馏水滴中，加盖玻片，静置 1-2 分钟，用手持扩大镜或低倍显微镜观 察，看小块的两端切口处有无细菌溢从维管束中溢出。如果有大量烟雾状的细菌从维管束中溢出，则证明是白叶枯病。（但请注意，水稻细菌性条斑病、细菌性褐条病， 用此法观察，也有细菌从维管束中溢出，因此，必须结合症状加以区分，水稻的自然枯黄叶用此法观察，没有细菌溢溢出，容易鉴别。） （2）保湿法：剪取供检验的可疑病叶的病健交界部一小段，长约 1-2 寸，分别插在培养皿中的洗净的湿沙中，然后加盖一个大约适宜的烧杯，让其保湿，经 5-6 小时以后，如果叶片上端的切口处有黄色混浊的露珠状菌脓，则证明是白叶枯病（注意点同上）。 （五） 稻曲病 病原：Ustilaginodea virens 分类地位： 有性时期：子囊菌亚门核菌纲球壳菌目、麦角菌科、绿核菌属（又名“拟黑粉菌属”）； 无性时期：半知菌亚门、丝孢纲、从梗孢目、瘤座孢科、绿核菌属（拟黑粉菌属）。 1.症状观察：取病穗观察病粒形状、大小、颜色，一个穗中有多少个病粒？包在谷粒外的块状物为何物？其上的墨绿色粉末为何物？再观察病粒的剖面，内外颜 色相同否？可分为几层？各为什么颜色？
2.病原鉴定:取病粒表面墨绿色的粉状物(病菌的厚垣孢子)制片镜检,观察厚垣孢子的颜色、形状、表面有无疣状突 大小,最后镜检永久玻片。观察子囊壳和子囊孢子的形状。子囊壳和子囊孢子各呈什么形状? (六)水稻恶苗病 病原 有性时期: Gibberella fujikuroi(分类地位:子囊菌亚门、核菌纲、肉座菌目、肉座菌科、赤霉属。) 无性时期: Fusarium moniliforme(分类地位:半知菌亚门、丝孢纲、从梗孢目、疣座孢科、镰刀菌属, 1.症状观察:取病株观察,并与健株比较,病株是否比健株髙得多?节间是否显著伸长?病株颜色比健株淡还是深?再- 叶鞘外?节上有无倒生的不定根?剥开病株叶鞘,节的上下呈何色?茎上有无暗褐色条斑?在垂死株或病死株的叶鞘和茎杆上有 什么时期? 2.病原鉴定:在垂死或已病死的病株上,或经过保湿培养的茎杆上,刮取少量淡红色粉状物,制片镜检,观察病菌无性I 有几个分隔?基部有无足胞?小孢子呈何形状?有无分隔?见到成链状着生的现象否? 七)水稻绵腐病 病原:主要是 Achlya spp.的真菌(包括层出绵霉A. Prolifera和稻绵霉 A oryzae等) 分类地位:鞭毛菌亚门、卵菌纲、水霉目、水霉科、绵霉属 1.症状观察:取感病谷粒观察,可见病谷粒四周呈放射状地长出白色绵毛状物(此为病菌菌丝体和孢子囊等),这是此 发芽也常因基部腐烂而枯死。 2.病原鉴定:取病谷粒周围的绵毛状物少许,制片镜检。观察病原菌的孢子囊、藏卵器、雄器卵孢子形态。它们各呈何 动孢子从孢子囊溢出后聚集在孢子囊开口处的状态? (八)稻黄矮病 病原:水稻黄矮病毒( Rice yelow stunt virus,缩写为RYSV) 症状观察:先取病株观察整株症状,植株比健株是否变矮?节间短否?株形是否松散?再观察叶片,叶色是否发黄?有 仍保持绿色的症状?叶片有无错位现象? (九)稻普通矮缩病(简称“稻普矮病”) 病原:水稻普通矮缩病毒( Rice dwarfⅵins-缩写为RDV) 症状观察:先取病株观察整株症状。病株是否比健株明昰变矮?也比黄矮病株眀显矮吗?全株颜色比健株深还是浅?分 片是否比健株短小僵直?叶色浓绿否?叶片上能否看到虚线状断续的白色点条? (十)稻粒黑粉病 病原 分类地位:担子菌亚门、冬孢菌纲、黑粉菌目、黑粉菌科、刺黑粉菌属 1.症状观察:取病穗盒装标本观察,看病粒与健粒有何区别?病粒变色否?谷壳内外颖壳间有无开裂露出黑色角状物?
2.病原鉴定：取病粒表面墨绿色的粉状物（病菌的厚垣孢子）制片镜检，观察厚垣孢子的颜色、形状、表面有无疣状突起？再取病菌的菌核观察其形状、颜色、 大小，最后镜检永久玻片。观察子囊壳和子囊孢子的形状。子囊壳和子囊孢子各呈什么形状？ （六） 水稻恶苗病 病原： 有性时期：Gibberella fujikuroi（分类地位：子囊菌亚门、核菌纲、肉座菌目、肉座菌科、赤霉属。） 无性时期：Fusarium moniliforme（分类地位：半知菌亚门、丝孢纲、从梗孢目、疣座孢科、镰刀菌属。） 1.症状观察：取病株观察，并与健株比较，病株是否比健株高得多？节间是否显著伸长？病株颜色比健株淡还是深？再看病株的中下部的节部弯曲否？是否露出 叶鞘外？节上有无倒生的不定根？剥开病株叶鞘，节的上下呈何色？茎上有无暗褐色条斑？在垂死株或病死株的叶鞘和茎杆上有无淡红色或白色的粉状物？这是病原菌的 什么时期？ 2.病原鉴定：在垂死或已病死的病株上，或经过保湿培养的茎杆上，刮取少量淡红色粉状物，制片镜检，观察病菌无性时期大、小孢子的形态，大孢子呈何形状？ 有几个分隔？基部有无足胞？小孢子呈何形状？有无分隔？见到成链状着生的现象否？ （七） 水稻绵腐病 病原：主要是 Achlya spp.的真菌（包括层出绵霉 A.Prolifera 和稻绵霉 A.oryzae 等） 分类地位：鞭毛菌亚门、卵菌纲、水霉目、水霉科、绵霉属。 1.症状观察：取感病谷粒观察，可见病谷粒四周呈放射状地长出白色绵毛状物（此为病菌菌丝体和孢子囊等），这是此病的显著特征。病谷粒不能发芽，即使已 发芽也常因基部腐烂而枯死。 2.病原鉴定：取病谷粒周围的绵毛状物少许，制片镜检。观察病原菌的孢子囊、藏卵器、雄器卵孢子形态。它们各呈何形状？藏卵器内有几个卵球？能否看到游 动孢子从孢子囊溢出后聚集在孢子囊开口处的状态？ （八） 稻黄矮病 病原：水稻黄矮病毒（Rice Yelow Stunt Virus，缩写为 RYSV） 症状观察：先取病株观察整株症状，植株比健株是否变矮？节间短否？株形是否松散？再观察叶片，叶色是否发黄？有没有见到叶肉黄色而杂有碎绿斑块、叶脉 仍保持绿色的症状？叶片有无错位现象？ （九） 稻普通矮缩病（简称“稻普矮病”） 病原：水稻普通矮缩病毒（Rice Dwarf Virus-缩写为 RDV） 症状观察：先取病株观察整株症状。病株是否比健株明显变矮？也比黄矮病株明显矮吗？全株颜色比健株深还是浅？分蘖是否比健株增多？再观察病株叶片。叶 片是否比健株短小僵直？叶色浓绿否？叶片上能否看到虚线状断续的白色点条？ （十） 稻粒黑粉病 病原：Neovossia horrida 分类地位：担子菌亚门、冬孢菌纲、黑粉菌目、黑粉菌科、刺黑粉菌属 1.症状观察：取病穗盒装标本观察，看病粒与健粒有何区别？病粒变色否？谷壳内外颖壳间有无开裂露出黑色角状物？谷粒外有没有散落黑粉状物？此黑粉状物 为何物？
2.病原鉴定:取病谷粒内的黑粉制片镜检,观察冬孢子的形态。冬孢子呈何状?什么颜色?冬孢子表面有何特征? (十一)稻云形病 病原 有性时期为 Me tasphaeria albescens(分类地位:子囊菌亚门、腔囊菌纲、隔孢菌目、隔孢菌科、亚球腔菌属。 无性时期为:尚未定论。有人认为是 Rhynchosprium oryzae;有人认为是 Fusoma triseptaum或 Fusoma biseptatum;也 症状观察:取病叶观察,病斑主要发生在叶片的什么部位?病斑上有无暗褐色波浪形云纹?病健交界部清晰否?附近有 (十二)稻褐色叶枯病 病原:尚未定论。有的认为是 Fusarium sp.,有的认为是 Fusarium nivale,也有的认为是与云形病的病原物可能相同 症状观察:取病叶观察病斑的形状、颜色、大小,注意病斑周围黄色晕圈宽否?病健交界清楚否?叶鞘上病斑呈何状态ˉ (十三)稻干尖线虫病 病原: Aphelenchoides besseyi 分类地位:线虫纲、侧尾线口亚纲、垫刃目、滑刀总科、滑刃线虫属。 症状观察: 叶部症状:主要观察叶片上病部表现在什么部位?呈何颜色?何状态?病健交界明显否? 穗部症状:注意全穗表现的症状是什么?部分小穗和部分谷粒表现的症状有什么特征 (十四)稻赤枯病 病原:生理性病害。土壤环境不良、缺钾是主要原因 症状观察:先观察病株的全株症状,病株是否比健株矮小?分蘖和植株颜色是否正常?叶片是否僵直不披?再看叶片上ˉ 似的褐色病斑?基部叶片有无从叶尖向下逐渐变黄褐色枯死的现象?病株根部呈何颜色? 作业 1.绘下列病原菌形态 (1)稻瘟病菌和胡麻叶斑病菌的分生孢子梗、分生孢子。 (2)稻恶苗病菌的分生孢子。 (3)稻绵腐菌的游动孢子囊和藏卵器。 2.如何准确鉴别稻瘟病和胡麻叶斑病? 实验二、麦类病害的识别与诊断 目的要求 通过本次实验,要求对麦类作物重要病害能独立诊断鉴定,掌握麦类三种锈病病菌夏孢子的简易快速识别方法 二、实验内容和方法 (一)小麦赤霉病 病原 有性时期: Gibberella zeae(分类地位:子囊菌亚门、核菌纲、肉座菌目、肉座菌科,赤霉属)。 无性时期: Fusarium gramineaⅧ等(分类地位:半知菌亚门、丝孢纲、丛梗孢目、瘤座孢科、镰刀菌属) 1.症状观察:取小麦病穗及有越冬病原的稻蔸观察,麦穗的颖片边缘与小穗基部能否见到红色粉状物和黑色小点,它们」 意水稻稻蔸上是否也有与麦穗上相同的黑色小粒点,如果有,请解释原因
2.病原鉴定：取病谷粒内的黑粉制片镜检，观察冬孢子的形态。冬孢子呈何状？什么颜色？冬孢子表面有何特征？ （十一）稻云形病 病原： 有性时期为 Metasphaeria albescens（分类地位：子囊菌亚门、腔囊菌纲、隔孢菌目、隔孢菌科、亚球腔菌属。） 无性时期为：尚未定论。有人认为是 Rhynchosprium oryzae;有人认为是 Fusoma triseptaum 或 Fusoma biseptatum;也有人认为是 Fusarium sp. 症状观察：取病叶观察，病斑主要发生在叶片的什么部位？病斑上有无暗褐色波浪形云纹？病健交界部清晰否？附近有无白色粉末状物（病菌的分生孢子）？ （十二）稻褐色叶枯病 病原：尚未定论。有的认为是 Fusarium sp.，有的认为是 Fusarium nivale，也有的认为是与云形病的病原物可能相同。 症状观察：取病叶观察病斑的形状、颜色、大小，注意病斑周围黄色晕圈宽否？病健交界清楚否？叶鞘上病斑呈何状态？ （十三）稻干尖线虫病 病原：Aphelenchoides besseyi 分类地位：线虫纲、侧尾线口亚纲、垫刃目、滑刀总科、滑刃线虫属。 症状观察： 叶部症状：主要观察叶片上病部表现在什么部位？呈何颜色？何状态？病健交界明显否？ 穗部症状：注意全穗表现的症状是什么？部分小穗和部分谷粒表现的症状有什么特征？ （十四）稻赤枯病 病原：生理性病害。土壤环境不良、缺钾是主要原因。 症状观察：先观察病株的全株症状，病株是否比健株矮小？分蘖和植株颜色是否正常？叶片是否僵直不披？再看叶片上有无碎屑状的赤褐色小点和与胡麻斑病类 似的褐色病斑？基部叶片有无从叶尖向下逐渐变黄褐色枯死的现象？病株根部呈何颜色？ 三、作业 1.绘下列病原菌形态图 （1）稻瘟病菌和胡麻叶斑病菌的分生孢子梗、分生孢子。 （2）稻恶苗病菌的分生孢子。 （3）稻绵腐菌的游动孢子囊和藏卵器。 2.如何准确鉴别稻瘟病和胡麻叶斑病？ 实验二、 麦类病害的识别与诊断 一、目的要求 通过本次实验，要求对麦类作物重要病害能独立诊断鉴定，掌握麦类三种锈病病菌夏孢子的简易快速识别方法，对其它病害的典型症状能认别。 二、实验内容和方法 （一）小麦赤霉病 病原： 有性时期：Gibberella zeae （分类地位：子囊菌亚门、核菌纲、肉座菌目、肉座菌科，赤霉属）。 无性时期：Fusarium graminearum 等（分类地位：半知菌亚门、丝孢纲、丛梗孢目、瘤座孢科、镰刀菌属）。 1.症状观察：取小麦病穗及有越冬病原的稻蔸观察，麦穗的颖片边缘与小穗基部能否见到红色粉状物和黑色小点，它们分布着生情况如何？各代表什么？然后注 意水稻稻蔸上是否也有与麦穗上相同的黑色小粒点，如果有，请解释原因
2.病原鉴定:挑取病穗上少量黑色颗粒于在玻片上制片,在低倍镜下观察子囊壳的形状、颜色,注意子囊表面是否光滑 囊壳压破,在高倍镜下观察,能否看到子囊和子囊孢子?分别呈何形状?有无颜色?子囊孢子是否分隔?怎样排列?观察完毕后 质霉层制片,镜检分生孢子形状、颜色,注意有无小型分生孢子及厚垣孢子。 (二)小麦锈病 小麦条锈病:病原( Puccinia striiformis f.sp) 小麦叶锈病:病原( Puccinia recondi ta f.sp. critic) 小麦秆锈病:病原( Puccinia graminis f.sp. tritici) 1.症状观察:观察小麦三种锈病的标本,从病株上夏孢子堆和冬孢子堆的形态、大小、色泽、排列情况,为害部位等方 2.病原鉴定:用解剖刀刮取三种锈病的夏孢子堆和冬孢子堆少许,分别制片镜检,观察三种锈病病菌的夏孢子之间以及 病菌的冬孢子具长柄,顶端胞壁较厚?哪种病菌的冬孢子顶端细胞常平截或倾斜?哪种病菌的夏孢子为长圆形或卵圆形,红褐色ˉ 若观察夏孢子的发芽孔则需用苯胺兰-乳酚油染色,其配方如下:苯酚20m1,苯胺兰(0.5%水溶液)20m,乳酸20ml 少许夏孢子,将玻片在酒精灯上微热,冷却后用油镜观察夏孢子的发芽孔。 三种锈菌夏孢子的简易快速识别:在空中捕捉夏孢子时,杆锈病菌的夏孢子的形态特殊,易于鉴定,但条锈菌与叶锈菌 法鉴定 (1)正磷酸盐鉴别法 在载玻片中部,涂上一层凡士林,撒上稀疏的夏孢子,然后取10%的正磷酸滴于有夏孢子的部位,静置1-2分钟,傾去多余的酸液 心缩成一个圆球,条锈菌夏孢子原生质凝聚成很多块。 (2)结晶紫染色鉴定方法 用1%草酸铵溶液8om1,加入结晶紫饱和酒精溶液20ml(2克结晶紫溶于20m95%酒精内),混合配成染色液。染色时将τ0%盐 盐酸后,加染色液,染色2分钟。再用水洗去染色液后镜检。条锈菌夏孢子呈蓝紫色至深兰色,不透光,近圆形,边缘刺明显。 至不规则形其表面刺不明显。 三)小麦白粉病 病原: Blumeria graminis f. sp tritici(原名 Erysiphe graminis) 分类地位:子囊菌亚门,核菌纲、白粉菌目、白粉菌科、布氏白粉菌属 1.症状观察:观察病部表面是否可见白粉状霉斑?霉斑的颜色是否一致?霉斑中是否散生有黑色小粒点?霉斑和黑色小 2.病原鉴定:先用镊子撕下刚发病具少量菌丝体的病叶表皮(撕得愈薄愈好),放在低倍镜下镜检,观察分生孢子着生 霉层上的黑色小粒,先在低倍镜下观察闭囊壳及附着丝形态,后轻压盖玻片,将闭囊壳压破,在高倍镜下观察子囊及子囊孢子的
2.病原鉴定：挑取病穗上少量黑色颗粒于在玻片上制片，在低倍镜下观察子囊壳的形状、颜色，注意子囊表面是否光滑，顶部有无孔口？然后轻压盖玻片，将子 囊壳压破，在高倍镜下观察，能否看到子囊和子囊孢子？分别呈何形状？有无颜色？子囊孢子是否分隔？怎样排列？观察完毕后，再用解剖刀刮取病穗上少量的粉红色胶 质霉层制片，镜检分生孢子形状、颜色，注意有无小型分生孢子及厚垣孢子。 （二）小麦锈病 小麦条锈病：病原（Puccinia striiformis f.sp） 小麦叶锈病：病原（Puccinia recondita f.sp.tritici） 小麦秆锈病：病原（Puccinia graminis f.sp.tritici） 1.症状观察：观察小麦三种锈病的标本，从病株上夏孢子堆和冬孢子堆的形态、大小、色泽、排列情况，为害部位等方面的区别它们之间的异同。 2.病原鉴定：用解剖刀刮取三种锈病的夏孢子堆和冬孢子堆少许，分别制片镜检，观察三种锈病病菌的夏孢子之间以及冬孢子之间，形状、颜色有何异同？哪种 病菌的冬孢子具长柄，顶端胞壁较厚？哪种病菌的冬孢子顶端细胞常平截或倾斜？哪种病菌的夏孢子为长圆形或卵圆形，红褐色？ 若观察夏孢子的发芽孔则需用苯胺兰-乳酚油染色，其配方如下：苯酚 20ml，苯胺兰（0.5%水溶液）20ml，乳酸 20ml，甘油 10ml。在玻片上滴上染色液，并挑取 少许夏孢子，将玻片在酒精灯上微热，冷却后用油镜观察夏孢子的发芽孔。 三种锈菌夏孢子的简易快速识别：在空中捕捉夏孢子时，杆锈病菌的夏孢子的形态特殊，易于鉴定，但条锈菌与叶锈菌的夏孢子镜检时，很难区分，可用以下方 法鉴定： （1）正磷酸盐鉴别法 在载玻片中部，涂上一层凡士林，撒上稀疏的夏孢子，然后取 10%的正磷酸滴于有夏孢子的部位，静置 1-2 分钟，倾去多余的酸液后镜检，结果是叶锈菌夏孢子原生质向中 心缩成一个圆球，条锈菌夏孢子原生质凝聚成很多块。 （2）结晶紫染色鉴定方法 用 1%草酸铵溶液 80ml，加入结晶紫饱和酒精溶液 20ml（2 克结晶紫溶于 20ml 95%酒精内），混合配成染色液。染色时将 70%盐酸溶液滴在玻片上处理 30 秒种。用水洗去 盐酸后，加染色液，染色 2 分钟。再用水洗去染色液后镜检。条锈菌夏孢子呈蓝紫色至深兰色，不透光，近圆形，边缘刺明显。叶锈病夏孢子呈黄褐色，可透光，近圆形 至不规则形其表面刺不明显。 （三）小麦白粉病 病原：Blumeria graminis f.sp tritici（原名 Erysiphe graminis） 分类地位：子囊菌亚门，核菌纲、白粉菌目、白粉菌科、布氏白粉菌属。 1.症状观察：观察病部表面是否可见白粉状霉斑？霉斑的颜色是否一致？霉斑中是否散生有黑色小粒点？霉斑和黑色小粒点分别是什么？病斑在病叶上的分布如 何？ 2.病原鉴定：先用镊子撕下刚发病具少量菌丝体的病叶表皮（撕得愈薄愈好），放在低倍镜下镜检，观察分生孢子着生状况，能否看到吸器？然后用解剖针挑取 霉层上的黑色小粒，先在低倍镜下观察闭囊壳及附着丝形态，后轻压盖玻片，将闭囊壳压破，在高倍镜下观察子囊及子囊孢子的形态、颜色和数量