三、实验用品和试剂 1. 器材:光学显微镜、载玻片、盖玻片、刀片、无菌注 射针头、消毒棉球。 2. 试剂: ①Ringeri溶液 氯化钠 0.85g(变温动物用0.65g) 氯化钾 0.25g 氯化钙 0.03g 蒸馏水 100ml 注:Ringer液是最简单的平衡盐溶液 (balanced salt solution,BSS),它的作用是维持细胞渗透压平衡, 保持H稳定及提供简单的营养
三、实验用品和试剂 1.器材:光学显微镜、载玻片、盖玻片、刀片、无菌注 射针头、消毒棉球。 2.试剂: ①Ringer溶液 氯化钠 0.85g(变温动物用0.65g) 氯化钾 0.25g 氯化钙 0.03g 蒸馏水 100ml 注:Ringer液是最简单的平衡盐溶液(balanced salt solution,BSS),它的作用是维持细胞渗透压平衡, 保持pH稳定及提供简单的营养
三、实验用品和试剂 ②1%、1/5000詹姆斯绿B(Janus green B)溶液 称取50mg詹姆斯绿B溶于5 ml Ringer溶液中, 稍加微热(30~400C)使之溶解,用滤纸过 滤后,即为1%原液。取1%原液1ml加入49ml Ringer溶液,即成1/5000工作液,装入瓶中备 用。最好现用现配,以保持它的充分氧化能力。 ③Wright染液 ④70%酒精 ⑤香柏油 3.材料:洋葱、石蜡切片、涂片
②1%、1/5000詹姆斯绿B (Janus green B)溶液 称取50mg詹姆斯绿B溶于5ml Ringer溶液中, 稍加微热(30~400C)使之溶解,用滤纸过 滤后,即为1%原液。取1%原液1ml加入49ml Ringer溶液,即成1/5000工作液,装入瓶中备 用。最好现用现配,以保持它的充分氧化能力。 ③Wright 染液 ④70%酒精 ⑤香柏油 3.材料:洋葱、石蜡切片、涂片 三、实验用品和试剂
瑞氏(Wr ight)染色法是目前应用最为广泛的染色法之一。 染色原理 瑞氏染料中含有伊红及亚甲蓝。伊红呈酸性,亚甲蓝呈 碱性,细胞核中核酸和蛋白质以及原始细胞的胞质均为酸 性物质,可与亚甲蓝起作用而被染成蓝色;同时,胞质中 的血红蛋白可与伊红起作用而被染成淡红色。又因为酸碱 度的变化可影响蛋白质与染料结合,瑞氏染色法的H为 6.4~6.8。加上缓冲液的目的是:偏碱性的染料可与缓冲 液中的酸基起作用,偏酸性的染料可与缓冲液中的碱基起 作用,因此能维持染色的一定酸碱度,使细胞的结构更清 晰可辨
• 瑞氏(Wright)染色法是目前应用最为广泛的染色法之一。 • 染色原理 瑞氏染料中含有伊红及亚甲蓝。伊红呈酸性,亚甲蓝呈 碱性,细胞核中核酸和蛋白质以及原始细胞的胞质均为酸 性物质,可与亚甲蓝起作用而被染成蓝色;同时,胞质中 的血红蛋白可与伊红起作用而被染成淡红色。又因为酸碱 度的变化可影响蛋白质与染料结合,瑞氏染色法的pH为 6.4~6.8。加上缓冲液的目的是:偏碱性的染料可与缓冲 液中的酸基起作用,偏酸性的染料可与缓冲液中的碱基起 作用,因此能维持染色的一定酸碱度,使细胞的结构更清 晰可辨
四、实验内容 1. 观察细胞核及核仁在不同细胞中的分布情况: ①细胞核及核仁(肝切片,蛙卵巢切片)(伊红-苏木 精染色) ②多核及多核仁现象(横纹肌切片,蛙卵巢切片) (伊红-苏木精染色) ③核形态差异(血细胞涂片) )(Wr ight染色) 2.中心体(马蛔虫受精卵切片)(巴西木素染色) 3.线粒体(兔肝切片,肾切片,植物细胞线粒体撕片) (Janus green B染色)
四、实验内容 1.观察细胞核及核仁在不同细胞中的分布情况: ①细胞核及核仁(肝切片,蛙卵巢切片)(伊红-苏木 精染色) ②多核及多核仁现象(横纹肌切片,蛙卵巢切片) (伊红-苏木精染色) ③核形态差异 (血细胞涂片)(Wright染色) 2.中心体(马蛔虫受精卵切片)(巴西木素染色) 3.线粒体(兔肝切片,肾切片,植物细胞线粒体撕片) (Janus green B 染色)
五、实验相关技术 1.石蜡切片制作基本技术 石蜡切片(paraffin section)组织学常规制片技术中 最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞 组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、 观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已 相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。光镜下观 察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织 多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺 乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;
五、实验相关技术 1.石蜡切片制作基本技术 石蜡切片(paraffin section) 组织学常规制片技术中 最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞 组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、 观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已 相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。光镜下观 察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织 多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺 乏反差,在一般光镜下不易清楚区别出;