XINJIANG UNIVERSITY 实验七 DNA的细胞化学 Feulgen,反应 College of Life Science and Technology,XINJIANG University
College of Life Science and Technology, XINJIANG University 实 验 七 DNA的细胞化学 —Feulgen反应
一、实验目的 了解Feul gen反应的原理，掌握有关的操作方法。 College of Life Science and Technology,XINJIANG University
College of Life Science and Technology, XINJIANG University 了解Feulgen反应的原理，掌握有关的操作方法。 一、实验目的
二、实验原理 DNA是由许多单核苷酸聚合而成的多核苷酸，每个 单核苷酸又由磷酸、脱氧核糖和碱基构成.。DNA经 1mo/L盐酸水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键 打开，使脱氧核糖的第一碳原子上形成游离的醛基， 这些醛基与Schiff试剂反应。 HCI CH,OH CHO F(SO2H)2 H,OH 0=P一0H 0=P一0H 0 0 DNA片段 产生醛基 红紫色化合物 College of Life Science and Technology,XINJIANG University
College of Life Science and Technology, XINJIANG University DNA是由许多单核苷酸聚合而成的多核苷酸，每个 单核苷酸又由磷酸、脱氧核糖和碱基构成.。DNA经 1mol/L盐酸水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键 打开，使脱氧核糖的第一碳原子上形成游离的醛基， 这些醛基与Schiff试剂反应。 二、实验原理
二、实验原理 Schiff试剂是由碱性品红和偏重亚硫酸 钠作用，形成无色的品红液，当无色品红 与醛基结合则形成紫红色的化合物。因此 凡有DA的地方，都能显示紫红色。紫红 色的产生，是由于反应产物的分子内含有 醌基，醌基是一个发色基团，所以具有颜 色。材料不经过水解或预先用热的三氯醋 酸或DNA酶处理，得到的反应是阴性的， 从而证明了Feul gen反应的专一性。 College of Life Science and Technology,XINJIANG University
College of Life Science and Technology, XINJIANG University Schiff试剂是由碱性品红和偏重亚硫酸 钠作用，形成无色的品红液，当无色品红 与醛基结合则形成紫红色的化合物。因此 凡有DNA的地方，都能显示紫红色。紫红 色的产生，是由于反应产物的分子内含有 醌基，醌基是一个发色基团，所以具有颜 色。材料不经过水解或预先用热的三氯醋 酸或DNA酶处理，得到的反应是阴性的， 从而证明了Feulgen反应的专一性。 二、实验原理
三、实验仪器、材料和试剂 (1)仪器、用具：显微镜、恒温水浴箱、温度计、解 剖针、酒精灯、试管、烧杯、载玻片、盖玻片、吸 水纸。 (2)材料：洋葱鳞茎或根尖。 (3)试剂 1)1mol/儿盐酸的配制：取82.5ml密度1.19g/ml 的浓盐酸加蒸馏水至1000ml。 2)亚硫酸水：取200m1自来水，加10ml10%偏重 亚硫酸钠（或偏重亚硫酸钾)水溶液和10ml1mo1/儿 HC1,三者于使用前混匀。 College of Life Science and Technology,XINJIANG University
College of Life Science and Technology, XINJIANG University ⑴仪器、用具：显微镜、恒温水浴箱、温度计、解 剖针、酒精灯、试管、烧杯、载玻片、盖玻片、吸 水纸。 ⑵材料：洋葱鳞茎或根尖。 ⑶试剂 1）1mol/L盐酸的配制：取82.5ml密度1.19 g/ml 的浓盐酸加蒸馏水至1000ml。 2）亚硫酸水：取200ml自来水，加10ml10%偏重 亚硫酸钠（或偏重亚硫酸钾）水溶液和10ml 1mol/L HCl，三者于使用前混匀。 三、 实验仪器、材料和试剂