INJIANG UNIVERSITY 实验六 细胞凝集反应 College of Life Science and Technology,XINJIANG Univercity
实 验 六 细 胞 凝 集 反 应 College of Life Science and Technology, XINJIANG Univercity
一 实验目的 1.了解凝集素的意义及作用方法。 2.掌握血细胞凝集的原理及过程
1.了解凝集素的意义及作用方法。 2.掌握血细胞凝集的原理及过程。 一.实验目的
二.实验原理 细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分 子结合为细胞表面的分支状糖外被。目前认为：细胞间的联 系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面 的分支状糖分子有关。 凝集素(lectin)是一类含糖的（少数例外）并能与糖专 一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。 凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细 胞问形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细 胞的凝集。 大多数凝集素存在于储藏器官中，作为一种氮源；对某 些植物而言，受到危害时凝集素作为一种防御蛋白发挥作用， 凝集素与糖的结合活性以及专一性决定其功能
细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分 子结合为细胞表面的分支状糖外被。目前认为：细胞间的联 系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面 的分支状糖分子有关。 凝集素(lectin)是一类含糖的（少数例外）并能与糖专 一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。 凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细 胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细 胞的凝集。 大多数凝集素存在于储藏器官中，作为一种氮源；对某 些植物而言，受到危害时凝集素作为一种防御蛋白发挥作用。 凝集素与糖的结合活性以及专一性决定其功能。 二.实验原理
三.实验用品 1.土豆块茎。 2.显微镜、粗天平、载玻片、滴管2支、离心管2支。 3.磷酸缓冲液(PBS缓冲液) 称取NaCl7.2g、Na2HP041.48g、KH2P040.43g、加 蒸馏水，定容至1000ml,调pH值到7.2。 4.2%的红细胞液 取1.0ml血液，用生理盐水洗5次，每次2000r/min, 离心5min,最后按沉淀压积的红细胞体积用生理盐 水配成2%红细胞悬液
1.土豆块茎。 2.显微镜、粗天平、载玻片、滴管2支、离心管2支。 3.磷酸缓冲液（PBS缓冲液） 称取NaCl 7.2g、Na2HPO4 1.48g、KH2PO4 0.43g、加 蒸馏水，定容至1000ml，调pH值到7.2。 4.2%的红细胞液 取1.0ml血液， 用生理盐水洗5次，每次2000 r/min， 离心5 min，最后按沉淀压积的红细胞体积用生理盐 水配成2％红细胞悬液 三.实验用品
四.实验步骤 称取土豆去皮块茎2g ↓ 加10 ml PBS缓冲液，浸泡2h（浸出的粗提液中含有可溶 性土豆凝集素) ↓ 载玻片上滴一滴土豆凝集素 ↓ 再滴一滴2%红细胞液 ↓充分混匀 静置20min ↓ 低倍显微镜下观察血球凝集现象 ↓ 以PB$液加2%血细胞悬液作为对照实验
称取土豆去皮块茎2g ↓ 加10 ml PBS缓冲液，浸泡2h（浸出的粗提液中含有可溶 性土豆凝集素） ↓ 载玻片上滴一滴土豆凝集素 ↓ 再滴一滴2％红细胞液 ↓充分混匀 静置20 min ↓ 低倍显微镜下观察血球凝集现象 ↓ 以PBS液加2％血细胞悬液作为对照实验 四.实验步骤