10× Buffer s ul 25 mmol/ Mg23μul Taq酶 0.5μl(25u) 上游引物 ddo 20.5p /50u 按PCR循环参数进行 第十一章RT-PCR 16
第十一章 16 10× Buffer 5 l 25mmol/L Mg2+ 3l Taq酶 0.5 l（2.5u） 上游引物 1l ddH2O 20.5l /50 l 按PCR循环参数进行 RT--PCR
(三)PCR产物的积累规律 DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。 反应初期,目的DNA片段呈指数形式 (2n),随着目的DNA的积累,在引 物模板与DNA聚合酶达到一定比例 时,酶的催化反应趋于饱和平台期。 (30个循环)“平台效应”出现的迟 早主要取决于起始模板的拷贝数、所 用的DNA聚合酶的性能及底物dNTP 第十一章的浓度等多种因素
第十一章 17 （三）PCR产物的积累规律 – DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。 – 反应初期，目的DNA片段呈指数形式 （2 n），随着目的DNA的积累，在引 物—模板与DNA聚合酶达到一定比例 时，酶的催化反应趋于饱和—平台期 。 （30个循环）“平台效应”出现的迟 早主要取决于起始模板的拷贝数、所 用的DNA聚合酶的性能及底物dNTP 的浓度等多种因素