flash 第十一章
第十一章 6 flash
()DNA模板变性 双链DNA是通过95℃左右的高温使其发生变性, 形成单链DNA。 模板与引物退火 45~55℃,两个寡核苷酸引物分别与待扩增DNA两 端的序列互补 引物延伸72℃左右 在4种dNTP底物及Mg2+存在条件下,DNA聚合酶 将单核苷酸从引物3′端掺入,沿模板延伸合成新股 DNA,每一循环的产物可作为下一循环的模板。 第十一章
第十一章 7 ㈠ DNA模板变性 双链DNA是通过95℃左右的高温使其发生变性， 形成单链DNA。 ㈡ 模板与引物退火 45～55℃，两个寡核苷酸引物分别与待扩增DNA两 端的序列互补。 ㈢ 引物延伸72℃左右 在4种dNTP底物及Mg2+存在条件下，DNA聚合酶 将单核苷酸从引物3′端掺入，沿模板延伸合成新股 DNA，每一循环的产物可作为下一循环的模板
以上所述的变性、退火、延伸 “三步曲”被确定为PCR的一轮循 环,整个PCR过程一般需进行2530 轮的循环。 第十一章
第十一章 8 以上所述的变性、退火、延伸 “三步曲”被确定为PCR的一轮循 环，整个PCR过程一般需进行25-30 轮的循环
PCR flash 第十一章
第十一章 9 PCR flash
三、PCR引物的设计 引物 引物是指与待扩增靶DNA两端序列 互补的寡核苷酸,两段引物分别与 相应的一条DNA链3端及5端互补 第十一章
第十一章 10 二、PCR引物的设计 引物 引物是指与待扩增靶DNA两端序列 互补的寡核苷酸，两段引物分别与 相应的一条DNA链3’端及5’端互补