甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第二章基因工程的酶学基础：第二节(2学时) 教学 通过教学使学生了解限制内切核酸酶活性的检测方法、影响限制性内切酶 目的 活性的因素、识别位点在DNA分子中的频率；掌握DNA甲基化作用对限制性内 与要 切酶的影响、限制性内切酶的应用；熟悉酶反应的终止方法。 求 DNA甲基化作用对限制性内切酶的影响、限制内切核酸酶活性的检测方法、 影响限制性内切酶活性的因素(DNA基质的纯度和物理特征的影响、缓冲液对 教学 酶切效率的影响、反应体积对酶活性的影响、反应温度与保温时间对酶活性的 内容 影响)、酶反应的终止方法、识别位点在DA分子中的频率、限制性内切酶的 应用。 重点、 重点是影响限制性内切酶活性的因素、酶反应的终止方法、限制性内切酶 难点 的应用；难点是DNA甲基化作用对限制性内切酶的影响。 分析 教学设计 调控对策 (1)抽查上 提问同尾酶和同裂酶、I型限制性核酸内切酶的识别序列特点、限 制性核酸内切酶的命名原则。重点讲解DNA甲基化作用对限制性内切酶 课人数；(2) 的影响、酶反应的终止方法、限制性内切酶的应用。采用多媒体手段介 采用讨论式 绍常用的分子生物学软件DNAMAN的使用和限制性核酸内切酶位点的分 教学。 析。 作业：复习讲授内容，练习分子生物学软件DNAMAN的使用。 课后补遗 6
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 6 章 节 第二章 基因工程的酶学基础：第二节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解限制内切核酸酶活性的检测方法、影响限制性内切酶 活性的因素、识别位点在 DNA 分子中的频率；掌握 DNA 甲基化作用对限制性内 切酶的影响、限制性内切酶的应用；熟悉酶反应的终止方法。 教学 内容 DNA 甲基化作用对限制性内切酶的影响、限制内切核酸酶活性的检测方法、 影响限制性内切酶活性的因素（DNA 基质的纯度和物理特征的影响、缓冲液对 酶切效率的影响、反应体积对酶活性的影响、反应温度与保温时间对酶活性的 影响）、酶反应的终止方法、识别位点在 DNA 分子中的频率、限制性内切酶的 应用。 重点、 难点 分析 重点是影响限制性内切酶活性的因素、酶反应的终止方法、限制性内切酶 的应用；难点是 DNA 甲基化作用对限制性内切酶的影响。 教学设计 调控对策 提问同尾酶和同裂酶、II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、限 制性核酸内切酶的命名原则。重点讲解 DNA 甲基化作用对限制性内切酶 的影响、酶反应的终止方法、限制性内切酶的应用。采用多媒体手段介 绍常用的分子生物学软件 DNAMAN 的使用和限制性核酸内切酶位点的分 析。 作业：复习讲授内容，练习分子生物学软件 DNAMAN 的使用。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用讨论式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第二章基因工程的酶学基础：第三节(2学时) 教学 通过教学使学生了解DA连接酶和重组率的概念、提高重组率的方法；掌 目的 握DNA连接酶的种类、影响连接反应的因素；熟悉DNA片段连接的各种方法； 与要 使学生具有将任意DNA分子连接的分析和应用能力。 求 DNA连接酶的概念、DNA连接酶的种类、DNA片段的连接（相同粘性末端的 连接、平末端的连接、不匹配的粘端连接、同聚物加尾连接、衔接物连接法、 教学 DNA接头连接、粘性末端的更换)，、影响连接反应的因素、重组率的概念及提高 内容 重组率的方法。 重点是DNA连接酶的种类及应用、DNA片段连接的各种方法；难点是不匹 重点、 配的粘端连接、衔接物连接法、DNA接头连接、粘性末端的更换等内容。 难点 分析 教学设计 调控对策 复习II型限制性核酸内切酶的识别序列特点、酶反应的终止方法、 (1)抽查上 限制性内切酶的应用。重点讲解DNA连接酶的种类、DNA片段连接的各 课人数；(2) 种方法；总结对任意DNA分子连接的分析方法。 采用讨论式 作业：复习讲授内容，练习DNA分子连接的分析方法。 教学。 课后补遗 7
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 7 章 节 第二章 基因工程的酶学基础：第三节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解 DNA 连接酶和重组率的概念、提高重组率的方法；掌 握 DNA 连接酶的种类、影响连接反应的因素；熟悉 DNA 片段连接的各种方法； 使学生具有将任意 DNA 分子连接的分析和应用能力。 教学 内容 DNA 连接酶的概念、DNA 连接酶的种类、DNA 片段的连接（相同粘性末端的 连接、平末端的连接、不匹配的粘端连接、同聚物加尾连接、衔接物连接法、 DNA 接头连接、粘性末端的更换）、影响连接反应的因素、重组率的概念及提高 重组率的方法。 重点、 难点 分析 重点是 DNA 连接酶的种类及应用、DNA 片段连接的各种方法；难点是不匹 配的粘端连接、衔接物连接法、DNA 接头连接、粘性末端的更换等内容。 教学设计 调控对策 复习 II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、酶反应的终止方法、 限制性内切酶的应用。重点讲解 DNA 连接酶的种类、DNA 片段连接的各 种方法；总结对任意 DNA 分子连接的分析方法。 作业：复习讲授内容，练习 DNA 分子连接的分析方法。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用讨论式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第二章基因工程的工具酶：第四、五、六、七节（2学时) 教学 通过教学使学生了解并掌握DNA聚合酶的概念、各种DNA聚合酶的特性及 目的 应用。使学生具有在分子克隆研究中，灵活应用各种DNA聚合酶的能力；了解 并掌握DNA甲基化酶的种类及用途、DNA及RNA的修饰酶的种类及用途、核酸 与要 酶的种类及用途，使学生具有应用DNA甲基化酶、DNA及RNA的修饰酶、核酸 求 酶的能力。 第四节DNA聚合酶概述、大肠杆菌DNA聚合酶I、大肠杆菌DNA聚合酶I 大片段(K1enow酶)、T4DNA聚合酶(T4 DNA polymerase、T7DNA聚合酶(T7 DNA polymerase)及测序酶、Taq DNA聚合酶(Taq DNA polymerase入、Amv反 转录酶(Amv reverse transcriptase), 第五节DNA甲基化酶：生物体内DNA的甲基化现象、DNA甲基化酶的种类、 教学 限制修饰系统I、II、III型中的甲基化酶、II型甲基化酶对限制酶活性的影 内容 响、甲基化酶的用途、DNA甲基化研究的实例。 第六节DNA及RNA的修饰酶：末端转移酶、T4多聚核苷酸激酶、碱性磷 酸酶、拓扑异构酶。 第七节核酸酶：核酸外切酶(Exonucleases)、S1核酸酶、Bal31核酸 酶、核糖核酸酶(RNase A or T)、脱氧核糖核酸酶(DNase I)。 重点是DNA聚合酶的概念，大肠杆菌DNA聚合酶I、Klenow酶、Taq DNA 重点、 聚合酶、Amv反转录酶的特点及其在分子克隆中的应用，DNA甲基化酶的种类 难点 及用途、碱性磷酸酶的种类及应用、核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶的种类及应 用； 分析 难点是T4DNA聚合酶、T7DNA聚合酶和测序酶的使用，DNA甲基化研究 的实例、T4多聚核苷酸激酶的应用。 教学设计 调控对策 提问DNA连接酶的概念、DNA连接酶的种类、DNA片段连接的方法、 (1)抽查上 DNA聚合酶的种类及用途；通过举例，重点讲解各种DNA聚合酶的特性 课人数；（2) 及应用、DNA甲基化酶、DNA及RNA的修饰酶、核酸酶的特性及应用。 采用提问式 作业：复习讲授内容，用列表形式总结各种DA聚合酶的特性及用 教学。 途，总结各种DNA甲基化酶、DNA及RNA的修饰酶、核酸酶的特性及用 途。 课后补遗 8
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 8 章 节 第二章 基因工程的工具酶：第四、五、六、七节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解并掌握 DNA 聚合酶的概念、各种 DNA 聚合酶的特性及 应用。使学生具有在分子克隆研究中，灵活应用各种 DNA 聚合酶的能力；了解 并掌握 DNA 甲基化酶的种类及用途、DNA 及 RNA 的修饰酶的种类及用途、核酸 酶的种类及用途，使学生具有应用 DNA 甲基化酶、DNA 及 RNA 的修饰酶、核酸 酶的能力。 教学 内容 第四节 DNA 聚合酶概述、大肠杆菌 DNA 聚合酶 I、大肠杆菌 DNA 聚合酶 I 大片段（Klenow 酶）、T4 DNA 聚合酶（T4 DNA polymerase）、T7 DNA 聚合酶（T7 DNA polymerase）及测序酶、Taq DNA 聚合酶（Taq DNA polymerase）、Amv 反 转录酶（Amv reverse transcriptase）。 第五节 DNA 甲基化酶：生物体内 DNA 的甲基化现象、DNA 甲基化酶的种类、 限制修饰系统 I、II、III 型中的甲基化酶、II 型甲基化酶对限制酶活性的影 响、甲基化酶的用途、DNA 甲基化研究的实例。 第六节 DNA 及 RNA 的修饰酶：末端转移酶、T4 多聚核苷酸激酶、碱性磷 酸酶、拓扑异构酶。 第七节 核酸酶：核酸外切酶（Exonucleases）、S1 核酸酶、Bal 31 核酸 酶、核糖核酸酶（RNase A or T）、脱氧核糖核酸酶（DNase I）。 重点、 难点 分析 重点是 DNA 聚合酶的概念，大肠杆菌 DNA 聚合酶 I、Klenow 酶、Taq DNA 聚合酶、Amv 反转录酶的特点及其在分子克隆中的应用，DNA 甲基化酶的种类 及用途、碱性磷酸酶的种类及应用、核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶的种类及应 用； 难点是 T4 DNA 聚合酶、T7 DNA 聚合酶和测序酶的使用，DNA 甲基化研究 的实例、T4 多聚核苷酸激酶的应用。 教学设计 调控对策 提问 DNA 连接酶的概念、DNA 连接酶的种类、DNA 片段连接的方法、 DNA 聚合酶的种类及用途；通过举例，重点讲解各种 DNA 聚合酶的特性 及应用、DNA 甲基化酶、DNA 及 RNA 的修饰酶、核酸酶的特性及应用。 作业：复习讲授内容，用列表形式总结各种 DNA 聚合酶的特性及用 途，总结各种 DNA 甲基化酶、DNA 及 RNA 的修饰酶、核酸酶的特性及用 途。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用提问式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第三章基因工程载体：第一节(2学时) 教学 目的 通过教学使学生了解质粒的基本特性；掌握质粒的概念、常用的选择标记 与要 基因、质粒DNA的电泳特征。 求 1、质粒的概念 教学 2、质粒的基本特性：质粒的复制、拷贝数、不相溶性、转移性、选择标 内容 记、质粒DNA的电泳特征。 重点、 重点是质粒的概念、常用的选择标记基因、质粒DA的电泳特征；难点是 难点 质粒的复制、不相溶性。 分析 教学设计 调控对策 (1)抽查上 复习原核生物大肠杆菌的细胞结构，引入质粒的概念；重点讲解常 课人数；(2) 用的选择标记基因及应用、质粒DNA的电泳特征。 采用提问式 作业：复习讲授内容，熟记常用的选择标记基因及应用，画图表示 教学。 质粒DNA的电泳特征。 课后补遗 9
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 9 章 节 第三章 基因工程载体：第一节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解质粒的基本特性；掌握质粒的概念、常用的选择标记 基因、质粒 DNA 的电泳特征。 教学 内容 1、质粒的概念 2、质粒的基本特性：质粒的复制、拷贝数、不相溶性、转移性、选择标 记、质粒 DNA 的电泳特征。 重点、 难点 分析 重点是质粒的概念、常用的选择标记基因、质粒 DNA 的电泳特征；难点是 质粒的复制、不相溶性。 教学设计 调控对策 复习原核生物大肠杆菌的细胞结构，引入质粒的概念；重点讲解常 用的选择标记基因及应用、质粒 DNA 的电泳特征。 作业：复习讲授内容，熟记常用的选择标记基因及应用，画图表示 质粒 DNA 的电泳特征。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用提问式 教学。 课后补遗
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 章节 第三章基因工程载体：第一节(2学时) 教学 目的 通过教学使学生了解并掌握常用质粒载体的大小、图谱、抗性标记及用途。 与要 使学生在分子克隆研究中具有灵活选择应用各种质粒载体的能力。 求 常用的质粒载体：(1)pSC101和Co1E1;(2)pBR322;(3)pUC18和pUC19; 教学 (4)pUC118 pUC119;(5)pBluescript M13+pBluescript M13-;(6)pSP64 内容 和pSP65;（7)pGEM-3Z;(8)pUCm-T。 重点、 重点是常用质粒载体的大小、抗性标记及用途；难点是质粒载体的图谱及 难点 多克隆位点(MCS)的应用。 分析 教学设计 调控对策 (1)抽查上 提问质粒的概念、质粒的基本特性、常用的选择标记基因；引入常 课人数；(2) 用的质粒载体，采用列举法讲解每种载体的大小、图谱、抗性标记及用 采用讨论式 途。 教学。 作业：复习讲授内容，熟记常用的质粒载体的抗性标记及用途。 课后补遗 10
甘肃农业大学《基因工程》课程教案 10 章 节 第三章 基因工程载体：第一节（2 学时） 教学 目的 与要 求 通过教学使学生了解并掌握常用质粒载体的大小、图谱、抗性标记及用途。 使学生在分子克隆研究中具有灵活选择应用各种质粒载体的能力。 教学 内容 常用的质粒载体：（1）pSC101 和 ColE1；（2）pBR322；（3）pUC18 和 pUC19； （4）pUC118 和 pUC119；（5）pBluescript M13+和 pBluescript M13-；（6）pSP64 和 pSP65；（7）pGEM-3Z；（8）pUCm-T。 重点、 难点 分析 重点是常用质粒载体的大小、抗性标记及用途；难点是质粒载体的图谱及 多克隆位点（MCS）的应用。 教学设计 调控对策 提问质粒的概念、质粒的基本特性、常用的选择标记基因；引入常 用的质粒载体，采用列举法讲解每种载体的大小、图谱、抗性标记及用 途。 作业：复习讲授内容，熟记常用的质粒载体的抗性标记及用途。 （1）抽查上 课人数；（2） 采用讨论式 教学。 课后补遗