基本概念 多重PR:是指在一个单一反应中同时扩增多个序 列的反应过程,能够节省时间和精力。 定量PcR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR 终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板 量的定量。用于扩增已知一端序列的目的DNA 锚定PCR:使用一条锚定引物就一条特异性引物扩 增已知一端序列的目的DNA
多重PCR:是指在一个单一反应中同时扩增多个序 列的反应过程，能够节省时间和精力。 定量PCR技术是指以外参或内参为标准,通过对PCR 终产物的分析或PCR过程的监测,进行PCR起始模板 量的定量。用于扩增已知一端序列的目的DNA 锚定PCR：使用一条锚定引物就一条特异性引物扩 增已知一端序列的目的DNA。 基本概念
基本概念 巢式PCR:利用两套PCR引物对进行两轮PCR扩增反 应组成,在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产 物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。 差别显示PCR:是根据绝大多数真核细胞 mRNA3端具有的多聚腺苷酸尾( polyA)结构,因此 可用含o1igo(dT)的寡聚核苷酸为引物将不同的 mRNA反转录成cDNA
巢式PCR：利用两套PCR引物对进行两轮PCR扩增反 应组成，在第一轮扩增中，外引物用以产生扩增产 物，此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。 差别显示ＰＣＲ：是根据绝大多数真核细胞 mRNA3’端具有的多聚腺苷酸尾（polyA）结构，因此 可用含oligo（dT）的寡聚核苷酸为引物将不同的 mRNA反转录成cDNA。 基本概念
4基因克隆 甚因克隆( gene cloring):或分子克隆,又称为重 组DNA技术,是应用酶学方法,在体外将不同来源的DNA分 子通过酶切、连接等操作重新组装成杂合分子,并使之在适当 的宿主细胞中进行扩增,形成大量的子代DNA分子的过程。 克隆( clone)指含有单一的DMA重组体的无性繁殖系, 或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程 cloning)。 基因克隆步骤:1)获得待克隆的DNA片段(基因);2)目 的基因与载体在体外连接;3)重组DNA分子导入宿主细胞;4) 筛选、鉴定阳性重组子;5)重组子的扩增与/或表达
4 基因克隆 基因克隆（gene cloning）：或分子克隆,又称为重 组ＤＮＡ技术，是应用酶学方法，在体外将不同来源的DNA分 子通过酶切、连接等操作重新组装成杂合分子，并使之在适当 的宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代DNA分子的过程。 克隆（clone）：指含有单一的DNA重组体的无性繁殖系， 或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性繁殖系的过程 (cloning)。 基因克隆步骤：1)获得待克隆的DNA片段（基因）；2)目 的基因与载体在体外连接；３)重组DNA分子导入宿主细胞；４) 筛选、鉴定阳性重组子；５)重组子的扩增与／或表达
5酸分子鉴定 1、PCR结合测序: Southern杂交 2、核酸杂交技术{ Northern杂交 (基于碱基互补配对) 原位杂交
5 核酸分子鉴定 1、PCR结合测序： 2、核酸杂交技术 （基于碱基互补配对） Southern杂交 Northern杂交 原位杂交