ITRNA AAAAA 3 Tuner. alroy ddNs SS-CDNA ov RNA DNA poll-+4dNTPs 文库构建 -HoK cG后 二d-cDNA lenn transferase cec T4 ligase 電 ransoorneario amplification ynthesis and Cloning of CDNA
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3 PCR *PCR,即聚合酶链式反应或多聚酶链反应 Polymerase Chain Reaction) 种对特定的 DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。 *由1985年穆里斯( K. Mullis)发明,他也因此获 得了1993年的诺贝尔化学奖
3 PCR * PCR,即聚合酶链式反应或多聚酶链反应 (Polymerase Chain Reaction), 是一种对特定的 DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。 * 由1985年穆里斯(K. Mullis)发明,他也因此获 得了1993年的诺贝尔化学奖
PCR的原理 体外DNA复制 Cele 1 m370 m0個較長的 Tm←引子→ 于NA分子 Cvcle 1 包括高温变性、低 温退火和中温延伸 过程。 Cvcle 1
PCR的原理: 体外DNA复制。 包括高温变性、低 温退火和中温延伸 过程
PCR凤应五要亲 引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ Taq DNA聚合酶 1)来自水生栖热菌 Thermusaquaticus;2)良好的耐 热性;3)Mg2+依赖性;4)无校正功能 PCR反应条件优化: 引物设计
PCR反应五要素 引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ Taq DNA聚合酶 1)来自水生栖热菌 Thermusaquaticus;2)良好的耐 热性;3)Mg2+依赖性;4)无校正功能 PCR反应条件优化: 引物设计:
PCR的类剽 (-)巢式PCR 七原位PCR 白多重PCR 八定量PCR 不对称PCR (九)差异显示PCR 四共享引物PCR(重组PCR 五锚定PR (+一)RT-PR (彩色PCR (十二)RAPD
PCR的类型 ㈠巢式PCR ㈦原位PCR ㈡多重PCR ㈧定量PCR ㈢不对称PCR ㈨差异显示PCR ㈣共享引物PCR ㈩重组PCR ㈤锚定PCR (十一)RT-PCR ㈥彩色PCR (十二)RAPD - - - - - - - - - -