第六章细胞内膜系统与蛋白质分选第五节膜泡运输细胞内部内膜系统各个部分之间的物质传递常常通过膜泡运输方式进行。如从内质网到高尔基体：高尔基体到溶酶体；细胞分泌物的外排，都要通过过渡性小泡进行转运。膜泡运输是一种高度有组织的定向运输，各类运输泡之所能够被准确地运到靶细胞器，主要是因为细胞器的胞质面具有特殊的膜标志蛋白。许多膜标志蛋白存在于不止一种细胞器，可见不同的膜标志蛋白组合，决定膜的表面识别特征。大多数运输小泡是在膜的特定区域以出芽的方式产生的。其表面具有一个笼子状的由蛋白质构成的衣被（coat）。这种衣被在运输小泡与靶细胞器的膜融合之前解体。衣被具有两个主要作用：①选择性的将特定蛋白聚集在一起，形成运输小泡；②如同模具一样决定运输小泡的外部特征，相同性质的运输小泡之所以具有相同的形状和体积，与衣被蛋白的组成有关。胞内膜泡运输沿微管或微丝运行，动力来自马达蛋白（motorproteins）。与膜泡运输有关的马达蛋白有3类：一类是动力蛋白（dynein），可向微管负端移动；另一类为驱动蛋白（kinesin），可牵引物质向微管的正端移动：第三类是肌球蛋白（myosin），可向微丝的正极运动。在马达蛋白的作用下，可将膜泡转运到特定的区域一、衣被类型已知三类具有代表性的衣被蛋白，即：笼形蛋白（clathrin）、COPI和COPII，个介导不同的运输途径（表2）。表2衣被小泡的类型与功能衣被类型GTP酶组成与衔接蛋白运输方向clathrinArfClathrin重链与轻链，质膜一内体AP2Clathrin 重链与轻链，高尔基体→内体AP1Clathrin重链与轻链，高尔基体→溶酶体AP3高尔基体→植物液泡COPIArfCOPaβBoel高尔基体→内质网Sar 1COP IISec23/Sec24复合体，Sec内质网高尔基体13/31复合体，Sec16，Sec 12
第六章 细胞内膜系统与蛋白质分选 第五节 膜泡运输 细胞内部内膜系统各个部分之间的物质传递常常通过膜泡运输方式进行。如从内质网到高 尔基体；高尔基体到溶酶体；细胞分泌物的外排，都要通过过渡性小泡进行转运。膜泡运输是 一种高度有组织的定向运输，各类运输泡之所能够被准确地运到靶细胞器，主要是因为细胞器 的胞质面具有特殊的膜标志蛋白。许多膜标志蛋白存在于不止一种细胞器，可见不同的膜标志 蛋白组合，决定膜的表面识别特征。 大多数运输小泡是在膜的特定区域以出芽的方式产生的。其表面具有一个笼子状的由蛋白 质构成的衣被（coat）。这种衣被在运输小泡与靶细胞器的膜融合之前解体。衣被具有两个主 要作用：①选择性的将特定蛋白聚集在一起，形成运输小泡；②如同模具一样决定运输小泡的 外部特征，相同性质的运输小泡之所以具有相同的形状和体积，与衣被蛋白的组成有关。 胞内膜泡运输沿微管或微丝运行，动力来自马达蛋白（motor proteins）。与膜泡运输有关 的马达蛋白有 3 类：一类是动力蛋白（dynein），可向微管负端移动；另一类为驱动蛋白 （kinesin），可牵引物质向微管的正端移动；第三类是肌球蛋白（myosin）,可向微丝的正极运 动。在马达蛋白的作用下，可将膜泡转运到特定的区域， 一、衣被类型 已知三类具有代表性的衣被蛋白，即：笼形蛋白（clathrin）、COPI 和 COPII，个介导不 同的运输途径（表 2）。 表 2 衣被小泡的类型与功能 衣被类型 GTP 酶 组成与衔接蛋白 运输方向 clathrin Arf Clathrin 重链与轻链， AP2 质膜→内体 Clathrin 重链与轻链， AP1 高尔基体→内体 Clathrin 重链与轻链， AP3 高尔基体→溶酶体 高尔基体→植物液泡 COP I Arf COPαββ’γδεζ 高尔基体→内质网 COP II Sar 1 Sec23/Sec24复合体，Sec 13/31 复合体， Sec 16， Sec 12 内质网→高尔基体
（一）笼形蛋白衣被小泡笼形蛋白衣被小泡是最早发现的衣被小泡，介导高尔基体到内体、溶酶体、植物液泡的运输，以及质膜到内膜区隔的膜泡运输。笼形蛋白分子由3个重链和3个轻链组成（图6-2），形成一个具有3个曲臂的形状（triskelion）。许多笼形蛋白的曲臂部分交织在一起，形成一个具有5边形网孔的笼子（图6-3）heavychaintonm图6-2笼形蛋白的结构，A电镜照片，B分子模型，C衣被模型引自MolecularBiologyoftheCell.4thed.2002
（一）笼形蛋白衣被小泡 笼形蛋白衣被小泡是最早发现的衣被小泡，介导高尔基体到内体、溶酶体、植物液泡的运 输，以及质膜到内膜区隔的膜泡运输。 笼形蛋白分子由 3 个重链和 3 个轻链组成（图 6-2），形成一个具有 3 个曲臂的形状 （triskelion）。许多笼形蛋白的曲臂部分交织在一起，形成一个具有 5 边形网孔的笼子（图 6- 3）。 图 6-2 笼形蛋白的结构，A 电镜照片，B 分子模型，C 衣被模型 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002
0.2um图6-3笼形蛋白衣被小泡的形态笼形蛋白形成的衣被中还有衔接蛋白（adaptin）。它介于笼形蛋白与配体受体复合物之间，起连接作用（图6-4）。目前至少发现4种不同类型的衔接蛋白，可分别结合不同类型的受体，形成不同性质的转运小泡，如AP1参与高尔基体→内体的运输、AP2参与质膜→内体的运输、AP3参与高尔基体→溶酶体的运输。VESICLEFORMATION图6-4笼形衣被小泡的组成
图 6-3 笼形蛋白衣被小泡的形态 笼形蛋白形成的衣被中还有衔接蛋白（adaptin）。它介于笼形蛋白与配体受体复合物之 间，起连接作用（图 6-4）。目前至少发现 4 种不同类型的衔接蛋白，可分别结合不同类型的 受体，形成不同性质的转运小泡，如 AP1 参与高尔基体→内体的运输、AP2 参与质膜→内体的 运输、AP3 参与高尔基体→溶酶体的运输。 图 6-4 笼形衣被小泡的组成
当笼形蛋白衣被小泡形成时，可溶性蛋白动力素（dynamin）聚集成一圈围绕在芽的颈部（图6-5），将小泡柄部的膜尽可能地拉近（小于1.5nm），从而导致膜融合，掐断（pinchoff）衣被小泡。动力素是一种GTP酶，调节小泡以出芽形式脱离膜的速率。动力素可以召集其它可溶性蛋白在小泡的颈部聚集，通过改变膜的形状和膜脂的组成，促使小跑颈部的膜融合形成衣被小泡。blocked bydyominnutations(A)dynaminandassociatedproteins图6-5Clathrin衣被小泡的掐断过程引自MolecularBiologyoftheCell.4thed.2002当衣被小泡从膜上释放后，衣被很快就解体，属于hsp70家族的一种分子伴侣（moleculalchaperone）充当衣被解体的ATP酶，一种辅蛋白（auxillin）可以激活这种ATP酶。(二）COPI衣被小泡负责回收、转运内质网逃逸蛋白（escapedproteins）返回内质网（图6-6、7）。起初发现于高尔基体碎片，在含有ATP的溶液中温育时，能形成非笼形蛋白包被的小泡。进一步的研究发现这种衣被蛋白复合体包含多达7种肽链。内质网向高尔基体输送运输小泡时，一部分自身的蛋白质也不可避免的被运送到了高尔基体，如不进行回收则内质网因为磷脂和某些蛋白质的乏而停止工作。内质网通过两种机制维持蛋白质的平衡：一是转运泡将应被保留的驻留蛋白排斥在外，例如有些驻留蛋白参与形成大的复合物，因而不能被包装在出芽形成的转运泡中，结果被保留下来；二是通过对逃逸蛋白的回收机制，使之返回它们正常驻留的部位。内质网的正常驻留蛋白，不管在腔中还是在膜上，它们在C端含有一段回收信号序列（retrievalsignals），如果它们被意外地逃逸进入转运泡从内质网运至高尔基体cis面，则cis面的膜结合受体蛋白将识别井结合逃逸蛋的回收信号，形成COPI衣被小泡将它们返回内质网。内质网腔中的蛋白，如蛋白二硫键异构酶和协助折叠的分子伴侣，均具有典型的回收信号
当笼形蛋白衣被小泡形成时，可溶性蛋白动力素（dynamin）聚集成一圈围绕在芽的颈部 （图 6-5），将小泡柄部的膜尽可能地拉近（小于 1.5nm），从而导致膜融合，掐断（pinch off）衣被小泡。动力素是一种 GTP 酶，调节小泡以出芽形式脱离膜的速率。动力素可以召集其 它可溶性蛋白在小泡的颈部聚集，通过改变膜的形状和膜脂的组成，促使小跑颈部的膜融合， 形成衣被小泡。 图 6-5 Clathrin 衣被小泡的掐断过程 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002 当衣被小泡从膜上释放后，衣被很快就解体，属于 hsp70 家族的一种分子伴侣（molecular chaperone）充当衣被解体的 ATP 酶，一种辅蛋白（auxillin）可以激活这种 ATP 酶。 （二）COP I 衣被小泡 负责回收、转运内质网逃逸蛋白（escaped proteins）返回内质网（图 6-6、7）。起初发现 于高尔基体碎片，在含有 ATP 的溶液中温育时，能形成非笼形蛋白包被的小泡。进一步的研究 发现这种衣被蛋白复合体包含多达 7 种肽链。 内质网向高尔基体输送运输小泡时，一部分自身的蛋白质也不可避免的被运送到了高尔基 体，如不进行回收则内质网因为磷脂和某些蛋白质的匮乏而停止工作。内质网通过两种机制维 持蛋白质的平衡 ：一是转运泡将应被保留的驻留蛋白排斥在外，例如有些驻留蛋白参与形成大 的复合物，因而不能被包装在出芽形成的转运泡中，结果被保留下来；二是通过对逃逸蛋白的 回收机制，使之返回它们正常驻留的部位。 内质网的正常驻留蛋白，不管在腔中还是在膜上，它们在 C 端含有一段回收信号序列 （retrieval signals），如果它们被意外地逃逸进入转运泡从内质网运至高尔基体 cis 面，则 cis 面的膜结合受体蛋白将识别并结合逃逸蛋白的回收信号，形成 COPI 衣被小泡将它们返回内质 网。内质网腔中的蛋白，如蛋白二硫键异构酶和协助折叠的分子伴侣，均具有典型的回收信号
Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL，图6-8）。内质网的膜蛋白（如SRP受体）在C端有一个不同的回收信号，通常是Lys-Lys-X-X（KKXX，X：任意氨基酸），同样可保证它们的回收。COP衣被小泡还可以介导高尔基体不同区域间的蛋白质运输。图6-6COPI衣被小泡的形态microtubuleomotorCOPll coatprotein0+0cis GolgiERnetworkvesiculartubularCOPIclustercoatretrievaltransport(B)图6-7COPI和COPII衣被小泡引自MolecularBiologyoftheCell:4thed.2002
Lys-Asp-Glu-Leu（KDEL，图 6-8）。内质网的膜蛋白（如 SRP 受体）在 C 端有一个不同的回 收信号，通常是 Lys-Lys-X-X（KKXX，X：任意氨基酸），同样可保证它们的回收。 COP I 衣被小泡还可以介导高尔基体不同区域间的蛋白质运输。 图 6-6 COP I 衣被小泡的形态 图 6-7 COPI 和 COPII 衣被小泡 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002