soluble ERresident proteinCLKDELCemptyKDELreceptorCOPIcoat图6-8KDEL序列引自MolecularBiologyoftheCell4thed.2002（三）COPⅡ衣被小泡介导从内质网到高尔基体的物质运输。最早发现于酵母ER在ATP存在的细胞质液中温育时，ER膜上能形成类似于COPI的衣被小泡，某些温度敏感型的酵母，由于COPII衣被蛋白发生变异，在特定温度下会在内质网中积累蛋白质。COPII衣被由多种蛋白质构成（参见表2），其中Sar1GTP酶与Sec23/Sec24复合体结合在一起，形成紧紧包围着膜的一层衣被，Sec13/Sec31复合体形成覆盖在外围的一层衣被Sec16推测可能是一种骨架蛋白，Sec12是Sar1的鸟苷酸交换因子。真核生物的COPII衣被蛋白亚单位具有一些横向同源物（Paralog）[1]，这些同源物可能介导不同的蛋白质转运，具有不同的调节机制。在实验条件下，纯化的Sarl、Sec23/Sec24、Sec13/Sec31等5种成分足以在人工脂质体上形成小泡，说明这些成分具有改变膜的形状和掐断运输小泡的功能。COPⅡI衣被小泡形成与内质网的特殊部位，称为内质网出口（exitsites），这些部位没有核糖体，由交织在一起的管道和囊泡组成网络结构。由内质网到高尔基体的蛋白转运中，大多数跨膜蛋白是直接结合在COPII衣被上，但是少数跨膜蛋白和多数可溶性蛋白通过受体与COPII衣被结合，这些受体在完成转运后，通过COPI衣被小泡返回内质网。COPII衣被所识别的分选信号位于跨膜蛋白胞质面的结构域，形式多样，有些包含双酸性基序[DE]X[DE]（D为Asp，E为Glu，X为任何一种氨基酸），如Asp-X-Glu序列，其他一些具有短的疏水基序，如FF，YYM，FY，LL，IL等等（其中F为Phe，Y为Tyr，M为Met，L为Leu，1为Ile）。二、衣被的形成
图 6-8 KDEL 序列 引自 Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002 （三）COPⅡ衣被小泡 介导从内质网到高尔基体的物质运输。最早发现于酵母 ER 在 ATP 存在的细胞质液中温育 时，ER 膜上能形成类似于 COP I 的衣被小泡，某些温度敏感型的酵母，由于 COP II 衣被蛋白 发生变异，在特定温度下会在内质网中积累蛋白质。 COP II 衣被由多种蛋白质构成（参见表 2），其中 Sar1GTP 酶与 Sec23/Sec24 复合体结合 在一起，形成紧紧包围着膜的一层衣被，Sec13/Sec31 复合体形成覆盖在外围的一层衣被， Sec16 推测可能是一种骨架蛋白，Sec12 是 Sar1 的鸟苷酸交换因子。真核生物的 COP II 衣被蛋 白亚单位具有一些横向同源物（Paralog）[1]，这些同源物可能介导不同的蛋白质转运，具有不 同的调节机制。在实验条件下，纯化的 Sar1、Sec23/Sec24、Sec13/Sec31 等 5 种成分足以在人 工脂质体上形成小泡，说明这些成分具有改变膜的形状和掐断运输小泡的功能。 COP II 衣被小泡形成与内质网的特殊部位，称为内质网出口（exit sites），这些部位没有 核糖体，由交织在一起的管道和囊泡组成网络结构。 由内质网到高尔基体的蛋白转运中，大多数跨膜蛋白是直接结合在 COP II 衣被上，但是 少数跨膜蛋白和多数可溶性蛋白通过受体与 COP II 衣被结合，这些受体在完成转运后，通过 COP I 衣被小泡返回内质网。 COP II 衣被所识别的分选信号位于跨膜蛋白胞质面的结构域，形式多样，有些包含双酸性 基序[DE]X[DE]（D 为 Asp，E 为 Glu，X 为任何一种氨基酸），如 Asp-X-Glu 序列，其他一些 具有短的疏水基序，如 FF，YYM，FY，LL，IL 等等（其中 F 为 Phe，Y 为 Tyr，M 为 Met，L 为 Leu，I 为 Ile）。 二、衣被的形成
衣被是在一类叫作衣被召集GTP酶（coat-recruitmentGTPase）作用下形成的。衣被召集GTP酶通常为单体GTP酶（monomericGTPase），也叫G蛋白，起分子开关的作用，结合GDP的形式没有活性，位于细胞质中，结合GTP而活化，转位至膜上，能与衣被蛋白结合，促进核化和组装。G蛋白具有两类重要的调节蛋白，即：鸟苷酸交换因子（guanine-nucleotideexchangefactor,GEF）和GTP酶激活蛋白（GTPaseactivatingprotein,GAP）。GEF的作用是使G蛋白释放GDP，结合GTP而激活。GAP的作用是激活G蛋白的酶活性，使GTP水解，G蛋白失活，G蛋白本身的GTP酶活性不高。除单体G蛋白以外，三聚体G蛋白也起分子开关的作用，控制衣被小泡的形成。衣被召集GTP酶包括Arf蛋白和Sar1蛋白（图6-9），Arf参与高尔基体上笼形蛋白衣被与COPI衣被的形成，Sar1参与内质网上COPIⅡI衣被的形成，两者的作用方式大体相似。质膜上笼形蛋白衣被的形成也与GTP酶有关，但其成分尚不明确。衣被召集GTP酶大量存在于细胞质中，但处于结合GDP的失活状态。当内质网上要形成COPI衣被小泡时，Sar1释放GDP结合GTP而激活，激活的Sar1暴露出一条脂肪酸的尾巴，插入内质网膜，然后开始召集衣被蛋白，以衣被蛋白为模型形成运输小泡。活化的衣被召集GTP酶还可以激活磷脂酶D（phospholipaseD），将一些磷脂水解，使形成衣被的蛋白质牢固地结合在膜上。衣被召集GTP酶对衣被的形成其动态调节作用，当多数衣被召集GTP酶处于结合GTP的状态时，它催化衣被的形成；反之当多数衣被召集GTP酶处于结合GDP的状态时，它催化衣被的解体。因此衣被的形成过程是边形成便解体的动态过程，只有在组装速率大于解体速率时，才能形成衣被小泡。Sec13p-Sec31pCytosolSartp-GDPSec24pSec23p福Sec12pp-GTPCargoProteinsLumen
衣被是在一类叫作衣被召集 GTP 酶（coat-recruitment GTPase）作用下形成的。衣被召集 GTP 酶通常为单体 GTP 酶（monomeric GTPase），也叫 G 蛋白，起分子开关的作用，结合 GDP 的形式没有活性，位于细胞质中，结合 GTP 而活化，转位至膜上，能与衣被蛋白结合， 促进核化和组装。 G 蛋白具有两类重要的调节蛋白，即：鸟苷酸交换因子（guanine-nucleotide exchange factor, GEF）和 GTP 酶激活蛋白（GTPase activating protein, GAP）。GEF 的作用是使 G 蛋白释 放 GDP，结合 GTP 而激活。GAP 的作用是激活 G 蛋白的酶活性，使 GTP 水解，G 蛋白失活， G 蛋白本身的 GTP 酶活性不高。除单体 G 蛋白以外，三聚体 G 蛋白也起分子开关的作用，控 制衣被小泡的形成。 衣被召集 GTP 酶包括 Arf 蛋白和 Sar 1 蛋白（图 6-9），Arf 参与高尔基体上笼形蛋白衣被 与 COP I 衣被的形成，Sar 1 参与内质网上 COP II 衣被的形成，两者的作用方式大体相似。质 膜上笼形蛋白衣被的形成也与 GTP 酶有关，但其成分尚不明确。 衣被召集 GTP 酶大量存在于细胞质中，但处于结合 GDP 的失活状态。当内质网上要形成 COPII 衣被小泡时，Sar 1 释放 GDP 结合 GTP 而激活，激活的 Sar 1 暴露出一条脂肪酸的尾 巴，插入内质网膜，然后开始召集衣被蛋白，以衣被蛋白为模型形成运输小泡。活化的衣被召 集 GTP 酶还可以激活磷脂酶 D（phospholipase D），将一些磷脂水解，使形成衣被的蛋白质牢 固地结合在膜上。 衣被召集 GTP 酶对衣被的形成其动态调节作用，当多数衣被召集 GTP 酶处于结合 GTP 的 状态时，它催化衣被的形成；反之当多数衣被召集 GTP 酶处于结合 GDP 的状态时，它催化衣 被的解体。因此衣被的形成过程是边形成便解体的动态过程，只有在组装速率大于解体速率 时，才能形成衣被小泡