月 步骤 1.制备菌悬液 2.融化培养基和标记培养皿:牛肉膏蛋白胨固体培养基在105%C融化10min,50℃保温 备用。取7块无菌培养皿,用记号笔在皿盖上标记,102、10-3、104各2块,空白1块。 3.水样稀释:取3支无菌试管,依次编号为10-2、103、10-4,并在每支试管中加入4.5 mL无菌生理盐水。用1支1mL无菌移液管取0.5m原液,加入到10-试管中,摇匀。注 意,加样时移液管尖端不能接触试管中液体。另取1支1mL无菌移液管从1σ-试管中吸0.5 m水样至102试管中,混匀,继续稀释至104
1．制备菌悬液 2．融化培养基和标记培养皿：牛肉膏蛋白胨固体培养基在105 ℃融化10 min，50 ℃保温 备用。取7块无菌培养皿，用记号笔在皿盖上标记，10-2、10-3、10-4各2块，空白1块。 3．水样稀释：取3支无菌试管，依次编号为10-2、10-3、10-4， 并在每支试管中加入4.5 mL无菌生理盐水。 用1支1 mL无菌移液管取0.5 mL原液，加入到10-1试管中，摇匀。注 意，加样时移液管尖端不能接触试管中液体。另取1支1 mL无菌移液管从10-1试管中吸0.5 mL水样至10-2试管中，混匀，继续稀释至10-4。 步骤
月 步骤 4.加样和混合平板:取104试管中稀释样品1mL,加入相应标记的无菌培养皿中,马上 加入约15mL50℃保温的牛肉膏蛋白胨固体培养基,快速摇匀,注意动作要轻柔,以免 培养基从培养皿中摇岀。平板混好后,马上平放台面至彻底凝固。 继续加其他平板和空白对照平板,混合平板。 5.培养:凝固彻底的测定平板倒置于37℃C培养24h。 6.计菌落数:将平板取出,观察并计各个平板的菌落数。注意不同位置菌落形态的差异。 7.后处理:样品和培养物用沸水煮沸消毒,清洗
4．加样和混合平板：取10-4试管中稀释样品1 mL，加入相应标记的无菌培养皿中，马上 加入约15 mL 50 ℃保温的牛肉膏蛋白胨固体培养基，快速摇匀，注意动作要轻柔，以免 培养基从培养皿中摇出。平板混好后，马上平放台面至彻底凝固。 继续加其他平板和空白对照平板，混合平板。 5．培养：凝固彻底的测定平板倒置于37 ℃培养24 h。 6．计菌落数：将平板取出，观察并计各个平板的菌落数。注意不同位置菌落形态的差异。 7．后处理：样品和培养物用沸水煮沸消毒，清洗。 步骤
月 结果 1.计各个平板菌落数 103 10 空白 平均值 *表面的菌落同划线菌落,内部菌落针尖状,培养基和玻璃间菌落薄雾状。 *大于500,记作“多不可计” *平板菌落连成片状或链状少于面积一半,按另外一半平板计菌落数
结果 *表面的菌落同划线菌落，内部菌落针尖状，培养基和玻璃间菌落薄雾状。 *大于500，记作“多不可计”。 *平板菌落连成片状或链状少于面积一半，按另外一半平板计菌落数。 10-2 10-3 10-4 空白 1 2 平均值 1．计各个平板菌落数
月 结果 2.水样的细菌总数为 CFU/mL。 例不同稀释度的平均菌落数 稀释度 结果(菌落总「备注 101 102103菌落数之比数,CFU/mL) 1365 164 16X104(或16400) 1234 2760 4616(460/295)<238X104(或37750)两位以 后的数 2890 271 2.2 274104(或27100)字采取 150 15×103(或1500)四舍五 5多不可计1650513 51x105(或51300)入法取 27X102(或270) 7多不可计305 31x104(或30500)
例 不同稀释度的平均菌落数 稀释度 菌落数之比 结果（菌落总 数，CFU/mL） 备注 10-1 10-2 10-3 两位以 后的数 字采取 四舍五 入法取 舍 1 1 365 164 20 — 1.6 ˣ 104 （或16 400） 2 2 760 295 46 1.6(460/295)＜2 3.8 ˣ 104 （或37 750） 3 2 890 271 60 2.2 2.7 ˣ 104 （或27 100） 4 150 30 8 2 1.5 ˣ 103 （或1 500） 5 多不可计 1 650 513 — 5.1 ˣ 105 （或51 300） 6 27 11 5 — 2.7 ˣ 102 （或270） 7 多不可计 305 12 — 3.1 ˣ 104 （或30 500） 结果 2．水样的细菌总数为 CFU/mL