吸光度与光程的关系A=Ebc 吸光度 光源 0.00 检测器 吸光度 光源 0.22 b 检测器 吸光度 样品 光源 0.44 检测器 样品样品
吸光度与光程的关系 A = bc 检测器 b 样品 光源 0.22 吸光度 光源 检测器 0.00 吸光度 光源 检测器 0.44 吸光度 b 样品 b 样品
吸光度与浓度的关系A=Ebc 吸光度 光源 0.00 检测器 吸光度 光源 0.22 检测器 吸光度 光源 0.44 检测器
吸光度与浓度的关系 A = bc 吸光度 0.00 光源 检测器 吸光度 0.22 光源 检测器 b 吸光度 0.44 光源 检测器 b
摩尔吸光系数(8)的讨论 4v1)吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征 常数,可作为定性鉴定的参数; v2)不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在 温度和波长等条件一定时,仅与吸收物质本身 的性质有关,与待测物浓度无关; v3)同一吸收物质在不同波长下的值是不同 的。在最大吸收波长λm处的摩尔吸光系数, 常以Em表示。Em、表明了该吸收物质最大限度 的吸光能力,也反映了光度法测定该物质可能 达到的最大灵敏度
摩尔吸光系数()的讨论 ©1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征 常数，可作为定性鉴定的参数； ©2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在 温度和波长等条件一定时，ε仅与吸收物质本身 的性质有关，与待测物浓度无关； ©3）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同 的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数， 常以εmax表示。εmax表明了该吸收物质最大限度 的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能 达到的最大灵敏度
摩尔吸光系数(E)的讨论 4)En越大表明该物质的吸光能力越强,用光 4度法测定该物质的灵敏度越高。 8>105:超高灵敏; E=(610)×104:高灵敏; 8<2×104:不灵敏。 5)在数值上等于浓度为1moL、液层厚度为1cm时该 溶液在某一波长下的吸光度。 朗伯-比尔定律的适用条件 1)单色光:应选用m3处或肩峰处测定 2 2)吸光质点形式不变:离解、络合、缔合会破 坏线性关系,应控制条件(酸度、浓度、介 质等) 3)稀溶液:浓度增大,分子之间作用增强
摩尔吸光系数(ε)的讨论 4）εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光 度法测定该物质的灵敏度越高。 ε>10 5：超高灵敏； ε=(6～10）×10 4 ：高灵敏； ε<2×10 4：不灵敏。 5）ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该 溶液在某一波长下的吸光度。 朗伯-比尔定律的适用条件 1) 单色光: 应选用max处或肩峰处测定 2) 吸光质点形式不变：离解、络合、缔合会破 坏线性关系， 应控制条件(酸度、浓度、介 质等) 3) 稀溶液： 浓度增大，分子之间作用增强
亚甲蓝阳离子水溶液的吸收光谱 Absorption spectra of Methylene blue 8 亚甲蓝阳离子 6 单体( monomer) Amax= 660 nm 二聚体( dimer) max 610nm 0 505806010m二聚体的生成 a.6.36×10-6molL b.1.27×10-4moL 破坏了A与c的 c.5.97×10-4mo/L 线性关系
亚甲蓝阳离子水溶液的吸收光谱 Absorption spectra of Methylene blue x 1 0 4 (nm) a. 6.36×10 -6 mol/L b. 1.27×10 -4 mol/L c. 5.97×10 -4 mol/L 亚甲蓝阳离子 单体(monomer) max= 660 nm 二聚体 (dimer) max= 610 nm 二聚体的生成 破坏了A与c的 线性关系