ELISAELISA的基本原理和方法ELISA的种类和变化ELISA的特点ELISA的应用实例
ELISA的基本原理和方法 ELISA的种类和变化 ELISA的特点 ELISA的应用实例 ELISA
4.2.1:基本原理电采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定测定的对象可以是抗体也可以是抗原在这种测定方法中有3种必要的试剂①固相的抗原或抗体（免疫吸附剂）②酶标记的抗原或抗体（标记物）刀（显色剂）③酶作用的底物
4.2.1 基本原理 它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接， 然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。 测定的对象可以是抗体也可以是抗原。 在这种测定方法中有3种必要的试剂： ①固相的抗原或抗体（免疫吸附剂） ②酶标记的抗原或抗体（标记物） ③酶作用的底物（显色剂）
测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上但仍保留其免疫活性然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上ELISAREAGENTSSubstrate酶的相应底物，A(colorreaction)即起催化水解或Enzyme-conjugatedanti-FeLVantibody2氧化还原反应而FeLVin serum呈颜色。Anti-FeLVantibody1(captureantibody)
• 测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上， 但仍保留其免疫活性， • 然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物 （标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与 酶活性， • 当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应 结合后，再加上 酶的相应底物， 即起催化水解或 氧化还原反应而 呈颜色
颜色反应的深浅与相应的抗体或抗原量成正比，因此可借助于颜色反应的深浅来定量抗体或抗原。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强
➢ 颜色反应的深浅与相应的抗体或抗原量成正 比，因此可借助于颜色反应的深浅来定量抗 体或抗原。 ➢ 这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子 显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪） 加以测定。 ➢ 其方法简单，方便迅速，特异性强
4.2.2酶及其底物酶结合物是酶与抗体或抗原，半抗原在交联剂作用下联结的产物。是ELISA成败的关键试剂，它不仅具有抗体抗原特异的免疫反应，还具有酶促反应，显示出生物放大作用，但不同的酶选用不同的底物，将得到不同的颜色反应
4.2.2 酶及其底物 酶结合物是酶与抗体或抗原, 半抗原在交联剂作 用下联结的产物。是ELISA成败的关键试剂，它 不仅具有抗体抗原特异的免疫反应，还具有酶促 反应，显示出生物放大作用，但不同的酶选用不 同的底物 ，将得到不同的颜色反应