四、微生物的选择培养和计数 1.筛选目的菌株的思路 类型 自然界中目的菌株的筛选 实验室中目的菌株的筛选 人为提供有利于目的菌株生长的 根据目的菌株对生存环境的 原理 条件(包括营养、温度、pH等),同 要求到相应的环境中去寻找 时抑制或阻止其他微生物生长 从热泉中筛选水生栖热菌提 实例 从土壤中筛选出能分解尿素的细菌 取出耐高温的DNA聚合酶
四、微生物的选择培养和计数 1.筛选目的菌株的思路 类型 自然界中目的菌株的筛选 实验室中目的菌株的筛选 原理 根据目的菌株对 的 要求,到相应的环境中去寻找 人为提供有利于目的菌株 的 条件(包括营养、温度、pH等),同 时 其他微生物生长 实例 从热泉中筛选水生栖热菌提 取出耐高温的DNA聚合酶 从土壤中筛选出能分解尿素的细菌 生存环境 生长 抑制或阻止
2.稀释涂布平板法 土壤取样 铲取土样,将样品装入纸袋中 将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶 样品稀释 中,充分摇匀。取1mL上清液加入盛有9mL 无菌水的试管中,依次等比 稀释 ①取0.LmL菌液,滴加到培养基表面 ②将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中 取样涂布 ③将涂布器放在火焰上灼烧,待酒精燃尽、 涂布器冷却后,再进行涂布 ④用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面 培养观察
2.稀释涂布平板法 9 等比 0.1 冷却
3.统计菌落数目 (1)方法:统计样品中微生物数量的方法有稀释涂布平板法和 显微镜直接计数法。常用来统计活菌数日的方法是稀释涂布平板法。 (2)统计依据:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个单菌落, 来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推 测出样品中大约含有多少活菌
3.统计菌落数目 (1)方法:统计样品中微生物数量的方法有 和 。常用来统计活菌数目的方法是 。 (2)统计依据:当样品的 足够高时,培养基表面生长的一个单菌落, 来源于样品稀释液中的一个 。通过统计平板上的菌落数,就能推 测出样品中大约含有多少活菌。 稀释涂布平板法 显微镜直接计数法 稀释涂布平板法 稀释度 活菌
(3)操作 ①设置重复组,增强实验的说服力与准确性。为保证结果准确,一般选择菌 落数在30300的平板进行计数。 ②统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。因此,统计结果一般用 菌落数表示
(3)操作 ①设置重复组,增强实验的说服力与准确性。为保证结果准确,一般选择菌 落数在 的平板进行计数。 ②统计的菌落数往往比活菌的实际数目 。因此,统计结果一般用 数表示。 30~300 少 菌落
概念检测 1.实验室培养微生物,一方面要制备合适的培养基,另一方面要确保无杂菌 感染。基于培养基的制备和无菌技术的认识,判断下列表述是否正确。 ()培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊 的物质。() (2)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。 () (3)培养基中的营养物质浓度越高,对微生物的生长越有利。() 答案(1)W(2)W(3)×
概念检测 1.实验室培养微生物,一方面要制备合适的培养基,另一方面要确保无杂菌 感染。基于培养基的制备和无菌技术的认识,判断下列表述是否正确。 (1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊 的物质。( ) (2)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。 ( ) (3) 培养基中的营养物质浓度越高,对微生物的生长越有利。( ) 答案 (1)√ (2)√ (3)×