肝糖原的提取及鉴定
肝糖原的提取及鉴定
实验目的了解肝糖原的性质并掌握其提取方法熟悉肝糖原的鉴定方法
实验目的 ⚫ 了解肝糖原的性质并掌握其提取方法。 ⚫ 熟悉肝糖原的鉴定方法
实验原理（一）肝糖原的提取糖原储存于细胞内，采用研磨匀浆等方法可使细胞破碎。加入三氯醋酸能使蛋白质变性，破坏肝组织中的酶且沉淀蛋白质，而糖原仍稳定地保存于上清液中。糖原不溶于乙醇，故用乙醇可将糖原沉淀
实验原理 （一）肝糖原的提取 糖原储存于细胞内，采用研磨匀浆等方法可使细 胞破碎。加入三氯醋酸能使蛋白质变性，破坏肝组织中 的酶且沉淀蛋白质，而糖原仍稳定地保存于上清液中。 糖原不溶于乙醇，故用乙醇可将糖原沉淀
（二）肝糖原的鉴定CHOHCH,OH-1.6-趣百放大CHOH糖原的基本结构糖原与碘作用呈红色。糖原水解产物与本尼迪克特试剂在沸水浴下生成砖红色沉淀
（二）肝糖原的鉴定 糖原的基本结构 糖原与碘作用呈红色。 糖原水解产物与本尼迪克特试剂在沸水浴下生成砖红色沉 淀
操作步骤（一）肝糖原的提取1.取新鲜动物肝脏（一只动物肝分为4份）至研钵中加入3mL10%的三氯醋酸溶液，充分研磨至糜状（戴手套操作），再加入3mL10%的三氯醋酸和3mL蒸馏水继续研磨片刻，使成均匀糜浆（均分为3组）。2.取3ml转入离心管中，2000r/min离心5min。3.取上清液于另一离心管中，加入等体积的95%乙醇混匀后静置片刻，使糖原呈絮状析出，再2500r/min离心10min。弃去上清液，将离心管倒置于滤纸上
（一）肝糖原的提取 1.取新鲜动物肝脏(一只动物肝分为4份）至研钵中 ，加入3mL10%的三氯醋酸溶液，充分研磨至糜状（戴 手套操作），再加入3mL10%的三氯醋酸和3mL蒸馏水 继续研磨片刻，使成均匀糜浆（均分为3组）。 2.取3ml转入离心管中，2000r/min 离心5min。 3.取上清液于另一离心管中，加入等体积的95%乙醇 ，混匀后静置片刻，使糖原呈絮状析出，再 2500r/min 离心10min。弃去上清液，将离心管倒置 于滤纸上。 操作步骤