琼脂糖凝胶分辨DNA片段的范围为 02~50kb之间。 聚丙烯酰胺凝胶的分辨范围为1到 1000个碱基对之间。 凝胶浓度的高低影响凝胶介质孔隙的 大小,浓度越高,孔隙越小,其分辨 能力就越强 nlpe& Pge
琼脂糖凝胶分辨DNA片段的范围为 0.2~50kb之间。 聚丙烯酰胺凝胶的分辨范围为 1 到 1000个碱基对之间。 凝胶浓度的高低影响凝胶介质孔隙的 大小,浓度越高,孔隙越小,其分辨 能力就越强
表5-3琼脂糖及聚丙烯酰胺凝胶分 辨DNA片段的能力 凝胶类型及浓度分离DNA的大小范围(bp) 0.3%琼脂糖 50000~1000 0.7%琼脂糖 20000~1000 1.4%琼脂糖 6000~300 40%聚丙烯酰胺 1000~100 10.0%聚丙烯酰胺 500~25 20.0%聚丙烯酰胺 50~1 nlpe& Pge
表5-3 琼脂糖及聚丙烯酰胺凝胶分 辨DNA片段的能力 凝胶类型及浓度 分离DNA的大小范围(bp) 0.3%琼脂糖 50 000~1 000 0.7%琼脂糖 20 000~1 000 1.4%琼脂糖 6 000~300 4.0%聚丙烯酰胺 1 000~100 10.0%聚丙烯酰胺 500~25 20.0%聚丙烯酰胺 50~1
在凝胶电泳中,加入溴化乙锭 ( ethidium bromide,EtBr)染料对 核酸分子进行染色,然后放置在紫外 光下观察,可灵敏而快捷地检测出凝 胶介质中DNA的谱带部位,即使每 条DNA带中仅含有0.054g的微量 DNA,也可以被清晰地检测出来。 nlpe& Pge
在凝胶电泳中,加入溴化乙锭 (ethidium bromide ,EtBr)染料对 核酸分子进行染色,然后放置在紫外 光下观察,可灵敏而快捷地检测出凝 胶介质中DNA的谱带部位,即使每 条 DNA 带中仅含有 0.05 μ g的微量 DNA,也可以被清晰地检测出来
NH 图5-4溴化乙锭 染料的化学结构 HN CHs 及其对DNA分子 的插入作用。由 嵌入的EtBr分子 于插入了溴化乙 锭分子,在紫外 EtBr 光照射下,琼脂 糖凝胶电泳中 碱基对 DNA的条带便呈 现出橘黄色荧 正常双螺旋 嵌人了EB 的DNA分子 的DNA分子 光,易于鉴定。 nlpe& Pge
图5-4 溴化乙锭 染料的化学结构 及其对 DNA分子 的插入作用。由 于插入了溴化乙 锭分子,在紫外 光照射下,琼脂 糖凝胶电泳中 DNA的条带便呈 现出橘黄色荧 光,易于鉴定
DNA的脉冲电泳技术(PFGE pulse-field gel electrophoresis) a 无规则 超大分子,不a、b表示每次应用脉冲电场 能有效地被 电泳的不同方技术,可分离 般电泳所分离。向,c为DNA高达107bp的 分子的最终移DNA分子。 动方向