5.2.2核酸的分子杂交 将带有互补的特定核苷酸序列的单链 DNA或RNA混合在一起,其相应的同 源区段就会退火形成双链结构。如果 退火的核酸来自不同的生物有机体, 所形成的双链分子就被称为杂种核酸 分子。 nlpe& Pge
5. 2. 2 核酸的分子杂交 将带有互补的特定核苷酸序列的单链 DNA或RNA混合在一起，其相应的同 源区段就会退火形成双链结构。如果 退火的核酸来自不同的生物有机体， 所形成的双链分子就被称为杂种核酸 分子
经过凝胶电泳分离的DNA或RNA 分子,都必须通过毛细管或电导作用 按其在凝胶中的位置原封不动地“吸 印”转移到滤膜上,因此,核酸杂交 也被称为“DNA印迹杂交”。由于该方 法是E.M. Southern首先设计出来 的,所以又叫做 Southern blotting nlpe& Pge
经过凝胶电泳分离的DNA 或RNA 分子，都必须通过毛细管或电导作用 按其在凝胶中的位置原封不动地 “ 吸 印 ”转移到滤膜上，因此，核酸杂交 也被称为“DNA印迹杂交 ”。由于该方 法是E. M. Southern首先设计出来 的，所以又叫做Southern blotting
在理想的条件下,应用放射性 同位素标记的特异性探针和放射自 显影技术,即便每带电泳条带仅含 有2ng的DNA也能被清晰地检测出 来。 nlpe& Pge
在理想的条件下，应用放射性 同位素标记的特异性探针和放射自 显影技术，即便每带电泳条带仅含 有2ng 的DNA也能被清晰地检测出 来
图5-6 Southern DNA限制片段 凝胶转移杂交 含有E1B染 技术 的琼脂糖凝胶 标准分子量D 玻璃板 吸引滤纸 高盐缓冲液 纤维素滤膜 基因DNA片段 nlPe& Pge
图5-6 Southern 凝胶转移杂交 技术
呈色或发出荧光 生色或荧光诱发物质 5 3222 碱性磷酸酯酶 链球菌抗生物素蛋白 生物素 生物素标记的探针 靶标DNA 硝设影
图5-7 用荧光法检测核酸杂交信号