实验二、几种特殊光学显微镜的工作原理及其使用 目的要求」 了解暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显徼镜和倒 置显微镜的工作原理、构造和使用方法。 实验用品 暗视野显微镜、倒置显微镜、相差显微镜、荧光显 微镜(透射式和落射式)、黑纸片、剪刀、圆规、 无荧光镜油、培养的活细胞、丫啶橙染色玻片标本、 活细胞临时装片(盐藻)
实验二、几种特殊光学显微镜的工作原理及其使用 『目的要求』 了解暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和倒 置显微镜的工作原理、构造和使用方法。 『实验用品』 暗视野显微镜、倒置显微镜、相差显微镜、荧光显 微镜(透射式和落射式)、黑纸片、剪刀、圆规、 无荧光镜油、培养的活细胞、丫啶橙染色玻片标本、 活细胞临时装片(盐藻)
实验内容和方法 暗视野显微镜 ()·原理和结构特点 原理利用光学上的丁达尔现象设计的。 结构特点:中央遮光板或暗视野聚光器,从而使光线改 戏途径,倾斜地照射在观察的标本上,照明光线在聚光 器顶透镜(或盖片)的上表面发生全反射,因而背景是 暗的。标本被斜射光照射发生反射或散射,在黑暗的背 景下呈现明亮的像。只能看到物体的存在和运动,不能 辨清物体的细微结构。可分辨0.004um以上的微粒的存 在和运动,可用以观察活细胞的结构和细胞内微粒的运 动等
『实验内容和方法』 一、暗视野显微镜 (一) 原理和结构特点 原理:利用光学上的丁达尔现象设计的。 结构特点:中央遮光板或暗视野聚光器,从而使光线改 变途径,倾斜地照射在观察的标本上,照明光线在聚光 器顶透镜(或盖片)的上表面发生全反射,因而背景是 暗的。标本被斜射光照射发生反射或散射,在黑暗的背 景下呈现明亮的像。只能看到物体的存在和运动,不能 辨清物体的细微结构。可分辨0.004um以上的微粒的存 在和运动,可用以观察活细胞的结构和细胞内微粒的运 动等
(=)使用方法 1.装暗视野聚光器。 2,选用强的光源,一般用显微镜灯照明。 3.在聚光器和标本片之间要加一滴香柏油 4,升降集光器,将集光镜的焦点对准被检物体, 应首先进行中心调节,使聚光器的光轴与显微 镜的光轴严格位于一直线上。 5.以下操作方法同普通显微镜。 (四)观察
(三)使用方法 1.装暗视野聚光器。 2.选用强的光源,一般用显微镜灯照明。 3.在聚光器和标本片之间要加一滴香柏油。 4.升降集光器,将集光镜的焦点对准被检物体, 应首先进行中心调节,使聚光器的光轴与显微 镜的光轴严格位于一直线上。 5.以下操作方法同普通显微镜。 (四)观察
相差显微镜 (一)原理和结构特点 原理:相差显微镜能够改变直 射光或射光的相位,并且利用 光的射和干涉现象,把相差变 成振幅差(明暗差),可用以观察 细胞或未染色标本。 M 结构特点:用环状光阑代替可变 光阑,用带相板的物镜(通常标E的x雾求k 有Ph的标记)代替普通物镜,并 P.相板;D.环状光栏 1金属层(吸光区)涂有一层吸光物质;2电解 质层为半透明的圆环;8派明的环状部分;4. 带有一个合轴用的望远镜。 不透明的涂漆部分
二、相差显微镜 (一) 原理和结构特点 原理:相差显微镜能够改变直 射光或衍射光的相位,并且利用 光的衍射和干涉现象,把相差变 成振幅差(明暗差),可用以观察 活细胞或未染色标本。 结构特点:用环状光阑代替可变 光阑,用带相板的物镜(通常标 有Ph的标记)代替普通物镜,并 带有一个合轴用的望远镜
(二)使用方法 L.相差装置的调换安装将环状光阑装在聚光器支 槊上,把绿色滤光片放在上面,换上相差物镜。 2.调焦 3.合铀调整 (三)观察 观察活细胞,可清楚地分辨细胞的形态,细胞核、 核仁以及胞质中存在的颗粒状结构
(二)使用方法 1.相差装置的调换安装 将环状光阑装在聚光器支 架上,把绿色滤光片放在上面,换上相差物镜。 2.调焦 3.合铀调整 (三)观察 观察活细胞,可清楚地分辨细胞的形态,细胞核、 核仁以及胞质中存在的颗粒状结构