100 00 a50 aE 5 2550100200400800 50100200400800 2550100200400800 浓度 浓度 浓度 Calibration curve
26 B% F% B/F Calibration Curve 60
在实际的操作中,一般要设立: 1.最大结合管(Bo):标准抗原的量为0,只有标记抗原和 特异性抗体时,标记抗原与抗体充分反应后分离B和F, 所测得的B的放射性为Bo。这是没有标准抗原与之竞争 时,标记抗原和抗体的结合达最大值 2.非特异结合管(NSB):标记抗原除了要和特异性抗体 结合以外,还要和一些杂质蛋白或容器的管壁等结合, 对我们的分析结果产生影响。NSB管是用蒸馏水代替特 异性抗体,在相同条件下反应后测得的放射性
27 ➢ 在实际的操作中,一般要设立: 1. 最大结合管(Bo):标准抗原的量为0,只有标记抗原和 特异性抗体时,标记抗原与抗体充分反应后分离B和F, 所测得的B的放射性为Bo。这是没有标准抗原与之竞争 时,标记抗原和抗体的结合达最大值。 2. 非特异结合管(NSB):标记抗原除了要和特异性抗体 结合以外,还要和一些杂质蛋白或容器的管壁等结合, 对我们的分析结果产生影响。NSB管是用蒸馏水代替特 异性抗体,在相同条件下反应后测得的放射性
3.总放射性管(T):反应后不分离就直接测得的放射性就是 总放射性。表示标记抗原抗体复合物和游离的标记抗原的总 放射性。 4.标准管(BBn):放有不同浓度的标准抗原,再加入相同 量的标记抗原和特异抗体。一般在反应后分离出沉淀,测定 沉淀的放射性作为B。 5.样品管(B3):用同剂量的样品代替标准管中的标准抗原 在相同条件下反应和分离,同样取沉淀测得其放射性,就可 以在绘制的标准曲线上找到样品的浓度
28 3. 总放射性管(T):反应后不分离就直接测得的放射性就是 总放射性。表示标记抗原抗体复合物和游离的标记抗原的总 放射性。 4. 标准管(B1 ~Bn):放有不同浓度的标准抗原,再加入相同 量的标记抗原和特异抗体。一般在反应后分离出沉淀,测定 沉淀的放射性作为B。 5. 样品管(Bx):用同剂量的样品代替标准管中的标准抗原, 在相同条件下反应和分离,同样取沉淀测得其放射性,就可 以在绘制的标准曲线上找到样品的浓度
选用不同的反应变量作纵坐标,标准曲线的形状也 不同。 常用的有B%,B/F,B/B0,F/B,Bo/B等。 B/F B/B+F 剂量 剂量
29 选用不同的反应变量作纵坐标,标准曲线的形状也 不同。 常用的有B%,B/F,B/Bo,F/B,Bo/B等
B%6 B%0 (B/b→F) (B/B+F) 抗原量 抗原量 标准曲线 左:横座标为等份刻度;右:横座标为对数刻度
30 标准曲线 左:横座标为等份刻度;右:横座标为对数刻度