标准曲线的绘制方法 用一系列已知浓度的标准抗原和一定量的标记抗原在 定条件下同限量的特异性抗体进行反应; >在反应达到平衡后,利用适当的分离方法分离B和F; 分别测量B和F的放射性; >用反应变量(如B/F)作为纵坐标,反应剂量作为横坐 标(即一系列标准抗原)作一条曲线,就得到不同浓 度的标准抗原对反应变量的竞争抑制曲线,这就是剂 量反应曲线
21 标准曲线的绘制方法 ➢用一系列已知浓度的标准抗原和一定量的标记抗原在 一定条件下同限量的特异性抗体进行反应; ➢在反应达到平衡后,利用适当的分离方法分离B和F; ➢分别测量B和F的放射性; ➢用反应变量(如B/F)作为纵坐标,反应剂量作为横坐 标(即一系列标准抗原)作一条曲线,就得到不同浓 度的标准抗原对反应变量的竞争抑制曲线,这就是剂 量反应曲线
B1%B2%B3%B4%B3%B6% Ab →分离B、F ↓↓↓↓↓↓ Ag B%=B/(B+F) ↓↓F%=F(B+F) R=B/F As g 23456 浓度2550100200400800
22 Ag 25 50 100 200 400 800 *Ag Ab 分离B、F B%=B/(B+F) F%=F/(B+F) R=B/F B1% B2% B3% B4% B5% B6% 1 2 3 4 5 6 浓度
100 50 0 25 50100200400800 Ag浓度 标准曲线
23 B% 标 准 曲 线
未知样品的测量 >在同等条件下,用待测抗原与一定量的标记抗原与 限量特异性抗体发生反应,并用同样的方法分离待 测抗原的B和F,测量其放射性,计算出B/F,在剂 量反应曲线上就可以查出对应的抗原浓度
24 未知样品的测量 ➢ 在同等条件下,用待测抗原与一定量的标记抗原与 限量特异性抗体发生反应,并用同样的方法分离待 测抗原的B和F,测量其放射性,计算出B/F,在剂 量反应曲线上就可以查出对应的抗原浓度
B1%B2%B3%B4%B5%B%B% " Ab 分离B、F Ag ↓↓ Ag 23456 2550100200400800
25 Ag 25 50 100 200 400 800 *Ag Ab 分离B、F B1% B2% B3% B4% B5% B6% 1 2 3 4 5 6 B% ?