DNA的半保留复制的 .T 亲代DNA分子 概念 T.-A A-T DNA在复制时,两条 链解开分别作为模板,在 DNA聚合酶的催化下按碱 基互补的原则合成两条与 模板链互补的新链,以组 成新的DNA分子。这样新 C-G 形成的两个DNA分子与亲 代DNA分子的碱基顺序完 全一样。由于子代DNA分 子中一条链来自亲代,另 一条链是新合成的,这种 复制链 复 复制方式称为半保留复制。 亲本随 Watson和Criok提出的DNA 双螺旋笼制模型
DNA的半保留复制的 概念 DNA在复制时,两条 链解开分别作为模板,在 DNA聚合酶的催化下按碱 基互补的原则合成两条与 模板链互补的新链,以组 成新的DNA分子。这样新 形成的两个DNA分子与亲 代DNA分子的碱基顺序完 全一样。由于子代DNA分 子中一条链来自亲代,另 一条链是新合成的,这种 复制方式称为半保留复制
DNA [I5NI DNA 的半 保留 复制 Orig nal porent molecule 实验 [I4N-15N]DNA 依据 1958年Mese1son &stahl,用同位素 示踪标记加密度 [4N-I5N]DNA 梯度离心技术实 验,证明了DNA是 采取半保留的方 式进行复制. [NIDNA
DNA 的半 保留 复制 实验 依据 1958年Meselson & stahl用同位素 示踪标记加密度 梯度离心技术实 验,证明了DNA是 采取半保留的方 式进行复制. [ 15N] DNA [ 14N- 15N] DNA [ 14N] DNA [ 14N- 15N] DNA
复制中的大肠杆菌染色体放射自显影图 (Caims实验) B ◆ 环状DNA的复制 将H-胸苷标记大肠杆菌DNA,经过近两代的时间,H-胸苷掺入大肠杆 菌DNA。用溶菌酶把细胞壁消化掉,使完整的大肠杆菌染色体DNA释放出 来,放射自显影,得到上图。非复制部分(C)银粒子密度较低,由一股放 射性链和一股非放射性链构成。已复制部分站整个染色体的三分之二,其中 一条双链(B)仅有一股链是标记的,另外一股双链(A)的两股链都是 标记的,银粒子密度为前二者的两倍。染色体全长约为1100微米
复制中的大肠杆菌染色体放射自显影图 (Caims实验) 将3H-胸苷标记大肠杆菌DNA,经过近两代的时间,3H-胸苷掺入大肠杆 菌DNA 。用溶菌酶把细胞壁消化掉,使完整的大肠杆菌染色体DNA释放出 来,放射自显影,得到上图。非复制部分(C)银粒子密度较低,由一股放 射性链和一股非放射性链构成。已复制部分站整个染色体的三分之二,其中 一条双链( B )仅有一股链是标记的,另外一股双链(A)的两股链都是 标记的,银粒子密度为前二者的两倍。染色体全长约为1100微米。 A B C 环状DNA的复制 A B C
原核生物DNA聚合反应有关的酶类 (1)DNA聚合酶DNA 5 polymetases) (2)拓扑异构酶 。 解旋酶 (topoisomerase):兼具内切酶和 一一 解链酶 连接酶活力,能迅速将DNA超螺 外·一 引物酶和 旋或双螺旋紧张状态变成松驰状 SSB 引发体 态,便于解链。 (3)DNA解链酶(DNA helicase) RNA引物 (4)单链结合蛋白(single DNA聚 strand binding protein,SSB): 合酶 结合在解开的DNA单链上,防止 DNA聚 重新形成双螺旋。 合酶I (5)引物酶(peimase)和引发体 (primosome):启动RNA引物链 的合成。 RNA (6)DNA连接酶(DNA1 igase) 引物
原核生物DNA聚合反应有关的酶类 (1)DNA聚合酶(DNA polymetases) (2)拓扑异构酶 (topoisomerase):兼具内切酶和 连接酶活力,能迅速将DNA超螺 旋或双螺旋紧张状态变成松驰状 态,便于解链。 (3) DNA解链酶(DNA helicase) (4)单链结合蛋白(singlestrand binding protein,SSB): 结合在解开的DNA单链上,防止 重新形成双螺旋。 (5)引物酶(peimase)和引发体 (primosome) :启动RNA引物链 的合成。 (6)DNA连接酶(DNA ligase) 解旋酶 DNA聚 合酶III 解链酶 RNA引物 引物酶和 引发体 DNA聚 合酶I SSB 3´ 3´ 5´ 5´ 3´ 5´ RNA 引物
拓扑异构酶 (topoisomerase) 拓扑异构酶I可使 DNA双链中的一 条链切断,松开双 螺旋后再将DNA 链连接起来,从而 避免出现链的缠绕。 拓扑异构酶Ⅱ可切 断DNA双链,使 DNA的超螺旋松 解后,再将其连接 起来。 大肠杆菌拓朴异构酶I的结构
拓扑异构酶 (topoisomerase) • 拓扑异构酶Ⅰ可使 DNA双链中的一 条链切断,松开双 螺旋后再将DNA 链连接起来,从而 避免出现链的缠绕。 拓扑异构酶Ⅱ可切 断DNA双链,使 DNA的超螺旋松 解后,再将其连接 起来。 大肠杆菌拓朴异构酶Ⅰ的结构