4.2液相色谱分离原理及分类 ●被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定 相及流动相中的吸附能力、分配、离子交换作用或分子尺寸大小的 差异进行分离。 ●色谱分离的实质是样品分子（以下称溶质）与溶剂（即流动相或 洗脱液)以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程 的保留行为。 ●根据分离机制不同，液相色谱可分为：液固吸附色谱、 液液分配色谱、化学键合相色谱、离子交换色谱以及分 子排阻色谱等类型
4.2 液相色谱分离原理及分类 ⚫被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定 相及流动相中的吸附能力、分配、离子交换作用或分子尺寸大小的 差异进行分离。 ⚫色谱分离的实质是样品分子（以下称溶质）与溶剂（即流动相或 洗脱液）以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程 的保留行为。 ⚫根据分离机制不同，液相色谱可分为：液固吸附色谱、 液液分配色谱、化学键合相色谱、离子交换色谱以及分 子排阻色谱等类型
HPLC适于非挥发性和热 不稳定组分的分析，因此 极性增加 不溶于水 溶于水 ,在工业、科学研究，尤 非极性 离子 其是在生物学和医学等方 非离子极性 面应用极为广泛。如氨基 102 分配 吸附 反相分配 正相分配 离子交换 酸、蛋白质、核酸、烃、 碳水化合物、药品、多糖 103 、高聚物、农药、抗生素 分子量 10 、胆固醇、金属有机物等 尺寸排阻 分析，大多是通过HPLC 105 凝胶渗透 来完成的。 凝胶过滤 右图是各种HPLC方法 105 的应用范围及对象
HPLC适于非挥发性和热 不稳定组分的分析，因此 ，在工业、科学研究，尤 其是在生物学和医学等方 面应用极为广泛。如氨基 酸、蛋白质、核酸、烃、 碳水化合物、药品、多糖 、高聚物、农药、抗生素 、胆固醇、金属有机物等 分析，大多是通过HPLC 来完成的。 右图是各种HPLC方法 的应用范围及对象 极性增加 不溶于水 溶于水 非极性 离子 非离子极性 吸附 反相分配 分配 正相分配 离子交换 尺寸排阻 凝胶渗透 凝胶过滤 分 子 量
4.3液相色谱仪的组成 ●输液系统（包括流动相贮存器，高压输液 泵等) ●进样系统（六通阀，自动进样器) ·分离系统（包括色谱柱，连接管和恒温器） ●检测系统 ●辅助系统（如梯度淋洗、脱气及数据处理 学习使我快乐 等) 储液器→ 泵一→进样器一分离柱检测器一→记录仪 仪器控制系统及数据处理系统
4.3 液相色谱仪的组成 ⚫输液系统（包括流动相贮存器，高压输液 泵等） ⚫进样系统（六通阀，自动进样器） ⚫分离系统（包括色谱柱，连接管和恒温器） ⚫检测系统 ⚫辅助系统（如梯度淋洗、脱气及数据处理 等） 储液器 泵 进样器 分离柱 检测器 记录仪 仪器控制系统及数据处理系统
首先高压泵将贮液器 中流动相溶剂经过进 样器送入色谱柱， ● 然后从控制器的出口 6 流出。当注入欲分离 2 的样品时，流经进样 器的流动相将样品同 时带入色谱柱进行分 离， 然后依先后顺序进入 检测器，记录仪将检 测器送出的信号记录 下来，由此得到液相 色谱图
⚫ 首先高压泵将贮液器 中流动相溶剂经过进 样器送入色谱柱， ⚫ 然后依先后顺序进入 检测器，记录仪将检 测器送出的信号记录 下来，由此得到液相 色谱图
输液系统 进样系统 分离系统 检测系统 辅助系统 储液系统 六通阀 色谱柱 紫外检测 脱气装置 器 过滤器 自动进样 卫柱 DAD检测 器 器 高压输液 恒温器 荧光检测 泵 器 阻尼器 连接管 电导检测 器 梯度洗脱 安培检测 器 示差折光 检测器
输液系统 进样系统 分离系统 检测系统 辅助系统 储液系统 过滤器 高压输液 泵 阻尼器 六通阀 自动进样 器 色谱柱 脱气装置 卫柱 恒温器 连接管 紫外检测 器 荧光检测 器 电导检测 器 安培检测 器 示差折光 检测器 DAD检测 器 梯度洗脱