DNA提取前样本采集、预处理和保存抗凝剂处理血(一)全血肝素柠檬酸*EDTA*1.抗凝剂-80℃保存2个月,第10天收率90%EDTA-Na2第四天收率90%或枸橡酸钠℃4作为抗凝剂第10天提取效第十天收率85%果差不宜使用肝素提取效果差第四天收率90%室温第十天提取效果差
DNA提取前样本采集、预处理和保存: (一)全血 1.抗凝剂 EDTA-Na2 或枸橼酸钠 作为抗凝剂 不宜使用肝素 抗凝剂处理血 肝素 柠檬酸* EDTA* -80℃ 保存2个月,第10天收率90% 4 ℃ 第四天收率90% 第10天提取效 果差 第十天收率85% 室温 提取效果差 第四天收率90% 第十天提取效果差
cBDA←560bp-560bp-560bpmRNA逆转录后RT-PCR结果(0、3、6个月)
mRNA逆转录后RT-PCR结果(0、3、6个月) A B C D
血浆和血清(二)1血浆和血清是检测释放入血的游离核酸最主要的标本来源,用来检测病毒、细菌,以及肿瘤细胞等等释放出来的游离核酸和蛋白质产物,在临床上被广泛应用于病原微生物和肿瘤标志基因的检测中
(二)血浆和血清 ◼ 血浆和血清是检测释放入血的游离核酸最主要的 标本来源,用来检测病毒、细菌,以及肿瘤细胞 等等释放出来的游离核酸和蛋白质产物,在临床 上被广泛应用于病原微生物和肿瘤标志基因的检 测中
血浆DNA又称为循环DNA,是一种无细胞状态的胞外DNA,主要是游离的单链、双链DNA或DNA-蛋白质的混合物它在未来分子诊断的应用中具有广阔前景血浆DNA成分的来源分为内源性和外源性两个部分,其中入侵的病毒、细菌等病原体释放入血液的核酸是外源性血浆DNA最重要的成分
◼ 血浆DNA又称为循环DNA,是一种无细胞状态的 胞外DNA,主要是游离的单链、双链DNA或DNA- 蛋白质的混合物 ◼ 它在未来分子诊断的应用中具有广阔前景 ◼ 血浆DNA成分的来源分为内源性和外源性两个部 分,其中入侵的病毒、细菌等病原体释放入血液 的核酸是外源性血浆DNA最重要的成分
血浆DNA内源性循环DNA外源性循环DNA入侵的病毒、细菌等病原体自身基因组来源DNA死亡细胞活细胞释放
血浆DNA 内源性循环DNA 外源性循环DNA 自身基因组来源DNA 入侵的病毒、细菌等病原体 死亡细胞 活细胞释放