限制性核酸内切酶 (restriction endonuclease) 识别DNA的特异序列,并在识别位 点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。 是细菌內存在的保护性酶。分为I IⅠ、IIE三类。I类酶识别序列特点为回 文结构。 GGATCC ...3' 3 CCTAGG…5
限制性核酸内切酶 (restriction endonuclease) 识别DNA的特异序列,并在识别位 点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。 是细菌内存在的保护性酶。分为I、 II、III三类。II类酶识别序列特点为回 文结构。 ··· ··· GGATCC ··· ··· ··· ··· CCTAGG ··· ··· 5' 3' 5' 3
限制性核酸内切酶作用后产生两种末端 钝性末端( blunt end)粘性末端( sticky end) Hind l Bamh I GTCGAC GGATCC CAGCTG CCTAGG GTC GAC G GATCC CAG CTG CCTAG G
限制性核酸内切酶作用后产生两种末端: 钝性末端(blunt end) 粘性末端(sticky end) Hind III BamH I G CCTAG GATCC G + GTC CAG GAC CTG + GTCGAC CAGCTG GGATCC CCTAGG
5′-端突出5 性末端 3G— 3′-端突出 5G- 3'ACGTC 限制性核酸内切酶炽别序列长度为48个bpo 不同酶切产生的相同粘性末端称配伍末端 ( compatible end),可用连接酶连接
5´-端突出 粘性末端 3´-端突出 限制性核酸内切酶识别序列长度为4~8个bp。 不同酶切产生的相同粘性末端称配伍末端 (compatible end),可用连接酶连接。 AATTC G 5' 3' ACGTC 5'G 3
(三)目的基因 应用重组DNA技术所要分离、获得的基因。 1.cDNA( complementary dNA):是指经反转 录合成的,与RNA互补的单链DNA。以单链 cDNA为模板,经聚合反应可合成双链cDNA。 2.基因组DNA( genomic dna):是指代 表一个细胞或生物体整套遗传信息(染色体 及线粒体)的所有DNA序列
(三)目的基因 应用重组DNA技术所要分离、获得的基因。 1. cDNA(complementary DNA):是指经反转 录合成的,与RNA互补的单链DNA。以单链 cDNA为模板,经聚合反应可合成双链cDNA。 2. 基因组DNA(genomic DNA):是指代 表一个细胞或生物体整套遗传信息(染色体 及线粒体)的所有DNA序列
(四)基因载体( vector) 能携带目的基因,实现无性繁殖所采用的 可独立复制的完整DNA分子。又称克隆载体。 其中为表达出蛋白质设计的载体又称表达载 体。 常用的载体: 质粒、噬菌体DNA、病毒DNA
(四)基因载体(vector) 能携带目的基因,实现无性繁殖所采用的 可独立复制的完整DNA分子。又称克隆载体。 其中为表达出蛋白质设计的载体又称表达载 体。 常用的载体: 质粒、噬菌体DNA、病毒DNA