1、革兰氏染色 ◆涂片 挑一环水于洁净载玻片中央 无菌操作取金黄葡萄球菌,在水滴中涂布4~5周 灼烧环上残菌后,无菌操作取克雷伯氏菌,在水滴中反复涂布5圈 ×10,具体是从中央向外逐渐涂布5圈,然后再从中央向外涂布5圈。 将两种菌涂布均匀,成为直径约0.5cm的菌膜。 杀灭环上残菌。 ◆固定 载玻片在火焰上方来回过火数次,但要控制载玻片微热,不烫手,防 止过热,否则菌体聚集乃至变形严重。 固定不牢,染色过程中细菌会大量从载玻片上脱落,即载玻片上菌膜 必须干燥彻底
1、革兰氏染色 涂片 • 挑一环水于洁净载玻片中央； • 无菌操作取金黄葡萄球菌，在水滴中涂布4~5周； • 灼烧环上残菌后，无菌操作取克雷伯氏菌，在水滴中反复涂布5圈 ×10，具体是从中央向外逐渐涂布5圈，然后再从中央向外涂布5圈。 将两种菌涂布均匀，成为直径约0.5 cm的菌膜。 • 杀灭环上残菌。 固定 • 载玻片在火焰上方来回过火数次，但要控制载玻片微热，不烫手，防 止过热，否则菌体聚集乃至变形严重。 • 固定不牢，染色过程中细菌会大量从载玻片上脱落，即载玻片上菌膜 必须干燥彻底
◆染色 初染:加草酸铵结晶紫,染色1.5min,弃去染色液后水洗,稍干 媒染:加路德尔碘液,1.5min后弃去,水洗,稍干 脱色:滴加95%乙醇,稍摇动几下后马上弃去,重复1次,立即水洗; 复染:加沙黄染液,染色2min后弃去,水洗,用吸水纸轻轻吸干 ◆镜检观察,记录结果
染色 • 初染：加草酸铵结晶紫，染色1.5 min，弃去染色液后水洗，稍干； • 媒染：加路德尔碘液，1.5 min后弃去，水洗，稍干； • 脱色：滴加95％乙醇，稍摇动几下后马上弃去，重复1次，立即水洗； • 复染：加沙黄染液，染色2 min后弃去，水洗，用吸水纸轻轻吸干。 镜检观察，记录结果