Enzyme Recognition, Source cleavage sequence EcoRI A-A-IICTTT A-A-T-T-CTTT E.coli ⊥⊥LCT-T-A-A GLL⊥ HindIll A-A-G-C-T-T TA A-G-C-T-ITTT Hemophilus influenza A⊥L⊥ BamHI TTT9-GA-T-CCTTT G-A-T-C-C Bacillus amyloliquefaciens LLC-C-T-A-G Taql C-G-ATTTT Thermus aquaticus 十⊥上上 Alul TTTA-G STTT Arthrobacter luteus G-A⊥上L Haelll TTT9-9-C-CTTTT Hemophilus aegypticus 11LC-C.G-G11L Ball C-ATTTT Brevibacterium albidum G-G.TL Sau3A G-A-T-CTTTT G-A-T-CTT Staphylococcus aureus TTTT T ⊥LC-T-A-G LL⊥
同裂酶(isoschizomers) 指来源不同但识别相同靶序列的核酸内 切酶。同裂酶进行同样的切割,产生同样的 末端。但有些同裂酶对甲基化位点的敏感性 不同。 Example: 限制酶HpaⅡ和MspⅠ是一对同裂酶(CCGG) , 当靶序列中一个5-甲基胞嘧啶时HpaⅡ不能进行 切割,而MspⅠ可以
同裂酶(isoschizomers) 指来源不同但识别相同靶序列的核酸内 切酶。同裂酶进行同样的切割,产生同样的 末端。但有些同裂酶对甲基化位点的敏感性 不同。 Example: 限制酶HpaⅡ和MspⅠ是一对同裂酶(CCGG) , 当靶序列中一个5-甲基胞嘧啶时HpaⅡ不能进行 切割,而MspⅠ可以
同尾酶(isocaudamer) 指来源不同、识别靶序列不同但产生相同的 粘性末端的核酸内切酶。利用同尾酶可使切割 位点的选择余地更大。 杂种位点(hybrid site):由一对同尾酶分别产 生的粘性末端共价结合形成的位点。 一般不能被原来的任何一种同尾酶识别。 BamHⅠ G GATC C BclⅠ T GATC A C CTAG G A CTAG T
同尾酶(isocaudamer) 指来源不同、识别靶序列不同但产生相同的 粘性末端的核酸内切酶。利用同尾酶可使切割 位点的选择余地更大。 杂种位点(hybrid site):由一对同尾酶分别产 生的粘性末端共价结合形成的位点。 一般不能被原来的任何一种同尾酶识别。 BamHⅠ G GATC C BclⅠ T GATC A C CTAG G A CTAG T
杂种位点(hybrid site) 由一对同尾酶分别 产生的粘性末端共价结合形成的位点。 一般不能被原来的任何一种同尾酶识别。 BamHⅠ G GATC C BclⅠ T GATC A C CTAG G A CTAG T 杂种位点: GATC C ( BamHⅠ ) CTAG T( BclⅠ)
杂种位点(hybrid site) 由一对同尾酶分别 产生的粘性末端共价结合形成的位点。 一般不能被原来的任何一种同尾酶识别。 BamHⅠ G GATC C BclⅠ T GATC A C CTAG G A CTAG T 杂种位点: GATC C ( BamHⅠ ) CTAG T( BclⅠ)
限制片断的末端连接作用 分子间的连接:不同的DNA片断通过互 补的粘性末端之间的碱基配对而彼此连 接起来。 分子内的连接:由同一片断的两个互补 末端之间的碱基配对而形成的环形分子
限制片断的末端连接作用 分子间的连接:不同的DNA片断通过互 补的粘性末端之间的碱基配对而彼此连 接起来。 分子内的连接:由同一片断的两个互补 末端之间的碱基配对而形成的环形分子