目的基因克隆的技术路线 利用表型特性,核酸杂交 黏性未端 以及免疫化学等方法对克 隆进行筛选 ○ 染色体DNA重组DNA 目的基因 限制性 接酶 多克隆位点 内切酶切 接 转化入 宿主细胞(如细菌) 重组DNA ○ 遗传标记复制位点 载体DNA(如质粒,噬菌体等) 筛选目的基因Y 目的基因扩增、表达 ○o
黏性末端 (如质粒,噬菌体等) (如细菌) 目的基因克隆的技术路线 利用表型特性,核酸杂交 以及免疫化学等方法对克 隆进行筛选
目的基因的制备 直接从染色体中分离 人工合成 逆转录合成cDNA cDNA文库:用细胞全部mRNA经反转录制备全套cDNA后建库。 构建基因文库 PcR扩增
目的基因的制备 直接从染色体中分离 人工合成 逆转录合成cDNA cDNA文库:用细胞全部mRNA经反转录制备全套cDNA后建库。 构建基因文库 PCR扩增