1.ABO血型鉴定的原理是什么？2.不同ABO血型之间输血时为何会发生输血反应？Rh血型鉴定一、实验目的通过学习Rh血型抗原的检测，使学生掌握红细胞膜上的抗原分子、Rh抗体以及凝集反应的发生机制，结合理论上所学的抗原抗体反应的类型及特点，为临床上科学地指导输血工作及新生儿溶血症的预防工作打好基础。三、实验原理Rh是恒河猴（Rhesusmacacus）外文名称的头两个字母。兰德斯坦纳等科学家在1940年做动物实验时，发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存在Rh血型的抗原物质，故而命名。Rh血型抗原中，以D抗原免疫原性最强，出现频率最高，所以临床上一般只作D抗原的鉴定，受检者红细胞能与抗D血清凝集者为Rh阳性，不凝集者为阴性。Rh血型抗体多系不完全抗体，属IgG型。因分子短小，与红细胞上的抗原作用后，不能使红细胞靠拢凝集。木瓜酶能破坏红细胞表面上的睡液酸，降低其表面电荷，减少红细胞之间的排斥力，使红细胞得以靠拢，在不完全抗体的作用下，红细胞便出现凝集。随着对Rh血型的不断研究，认为Rh血型系统是红细胞血型中最为复杂的一个血型系统。Rh血型的发现，对更加科学地指导输血工作和进一步提高新生儿溶血病的实验诊断和维护母婴健康，都有非常重要的作用。Rh阳性血型在我国汉族及大多数民族人中约占99.7%，Rh阴性血型汉族人所占的比例极少，属稀有血型。三、实验材料1.试剂抗Rh试剂（抗RhD试剂)。2.器材载玻片、酒清棉球、采血针、牙签。四、实验方法1.用已知抗Rh试剂一滴，滴在玻片上。2.用酒精棉球消毒耳垂或手指，以消毒采血针刺破皮肤，用采血针取适当血加入玻片试剂中，用牙签混匀，2～10min观察结果，根据有无凝集现象判定血型。五、实验结果抗Rh试剂凝集则为Rh（D）阳性，不凝集则为Rh（D）阴性。六、思考题1．根据实验结果，试分析凝集反应的发生机制。2.Rh血型抗体属于何种抗体？实验二类风湿因子检测4
4 1．ABO 血型鉴定的原理是什么？ 2．不同 ABO 血型之间输血时为何会发生输血反应？ Rh 血型鉴定 一、实验目的 通过学习 Rh 血型抗原的检测，使学生掌握红细胞膜上的抗原分子、Rh 抗体以及凝集反 应的发生机制，结合理论上所学的抗原抗体反应的类型及特点，为临床上科学地指导输血工 作及新生儿溶血症的预防工作打好基础。 三、实验原理 Rh 是恒河猴（Rhesus macacus）外文名称的头两个字母。兰德斯坦纳等科学家在 1940 年做动物实验时，发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存在 Rh 血型的抗原物质，故而命名。 Rh 血型抗原中，以 D 抗原免疫原性最强，出现频率最高，所以临床上一般只作 D 抗原的鉴 定，受检者红细胞能与抗 D 血清凝集者为 Rh 阳性，不凝集者为阴性。 Rh 血型抗体多系不完全抗体，属 IgG 型。因分子短小，与红细胞上的抗原作用后，不 能使红细胞靠拢凝集。木瓜酶能破坏红细胞表面上的唾液酸，降低其表面电荷，减少红细胞 之间的排斥力，使红细胞得以靠拢，在不完全抗体的作用下，红细胞便出现凝集。 随着对Rh血型的不断研究，认为Rh血型系统是红细胞血型中最为复杂的一个血型系统。 Rh 血型的发现，对更加科学地指导输血工作和进一步提高新生儿溶血病的实验诊断和维护 母婴健康，都有非常重要的作用。Rh 阳性血型在我国汉族及大多数民族人中约占 99.7%，Rh 阴性血型汉族人所占的比例极少，属稀有血型。 三、实验材料 1．试剂 抗 Rh 试剂（抗 Rh D 试剂）。 2. 器材 载玻片、酒清棉球、采血针、牙签。 四、实验方法 1．用已知抗 Rh 试剂一滴，滴在玻片上。 2．用酒精棉球消毒耳垂或手指，以消毒采血针刺破皮肤，用采血针取适当血加入玻片 试剂中，用牙签混匀，2～10min 观察结果，根据有无凝集现象判定血型。 五、实验结果 抗 Rh 试剂凝集则为 Rh（D）阳性，不凝集则为 Rh（D）阴性。 六、思考题 1. 根据实验结果，试分析凝集反应的发生机制。 2. Rh 血型抗体属于何种抗体？ 实验二 类风湿因子检测
一、实验目的通过学习类风湿因子检测，使学生掌握间接凝集反应的原理，熟悉间接凝集法检测类风湿因子的方法，了解类风湿因子检测的临床意义。二、实验原理将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上形成致敏颗粒，然后与相应的抗体结合出现的凝集现象，称为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性更高，可用于血清中微量抗原或抗体的检查。类风湿因子（rheumatoidfactor，RF）是由于细菌、病毒等感染引起体内产生的以变性IgG为抗原的一种自身抗体。一般医院主要采用胶乳凝集法测定类风湿因子。将IgG吸附于聚苯乙烯胶乳上，RF与其反应可产生凝集现象。此方法只能定性或以滴度半定量，其灵敏度和特异性均不高。三、实验材料1.试剂类风湿因子测定试剂盒（胶乳凝集法），包括胶乳液（人IgG包被胶乳）、阳性对照、阴性对照、反应片（6孔/板）；待检标本（模拟患者血清）、生理盐水。2.器材移液器、吸头、Ep管。四、实验方法1.加样本：在反应片孔中加入待检样本50ul（待检标本以生理盐水倍比稀释，稀释倍数为1：2、1：4、1：8、1：16），余2孔各加阴性对照、阳性对照1滴（约50u1）。2.加胶乳液：每孔加1滴胶乳液于各样本中，轻微晃动反应片充分混匀。3.数分钟后仔细观察凝集反应发生情况。五、实验结果以出现白色凝集颗粒为阳性，说明待检标本中存在RF，若不凝集则无RF。六、注意事项1.注意样本及胶乳液加样量的比例。2.本试剂样本血清加样量和阴性、阳性对照加样量均为50ul，保证液滴大小一致。3.若阴阳性对照结果出现异常，则试剂不可使用。4.试剂盒贮存于2～10℃，受热会导致试剂阳性率偏高，切勿冷冻。七、思考题1.间接凝集反应和直接凝集反应的区别？2.检测到类风湿因子就一定是类风湿关节炎吗？5
5 一、实验目的 通过学习类风湿因子检测，使学生掌握间接凝集反应的原理，熟悉间接凝集法检测类风 湿因子的方法，了解类风湿因子检测的临床意义。 二、实验原理 将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上形成致敏颗粒，然后与相应的抗体结 合出现的凝集现象，称为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性更高，可用于 血清中微量抗原或抗体的检查。 类风湿因子（rheumatoid factor，RF）是由于细菌、病毒等感染引起体内产生的以变 性 IgG 为抗原的一种自身抗体。一般医院主要采用胶乳凝集法测定类风湿因子。将 IgG 吸附 于聚苯乙烯胶乳上，RF 与其反应可产生凝集现象。此方法只能定性或以滴度半定量，其灵 敏度和特异性均不高。 三、实验材料 1. 试剂 类风湿因子测定试剂盒（胶乳凝集法），包括胶乳液（人 IgG 包被胶乳）、阳 性对照、阴性对照、反应片（6 孔/板）；待检标本（模拟患者血清）、生理盐水。 2. 器材 移液器、吸头、Ep 管。 四、实验方法 1．加样本：在反应片孔中加入待检样本 50ul（待检标本以生理盐水倍比稀释，稀释倍 数为 1：2、1：4、1：8、1：16），余 2 孔各加阴性对照、阳性对照 1 滴（约 50ul）。 2. 加胶乳液：每孔加 1 滴 胶乳液于各样本中，轻微晃动反应片充分混匀。 3. 数分钟后仔细观察凝集反应发生情况。 五、实验结果 以出现白色凝集颗粒为阳性，说明待检标本中存在 RF，若不凝集则无 RF。 六、注意事项 1．注意样本及胶乳液加样量的比例。 2. 本试剂样本血清加样量和阴性、阳性对照加样量均为 50ul，保证液滴大小一致。 3. 若阴阳性对照结果出现异常，则试剂不可使用。 4. 试剂盒贮存于 2～10 ℃，受热会导致试剂阳性率偏高，切勿冷冻。 七、思考题 1．间接凝集反应和直接凝集反应的区别？ 2．检测到类风湿因子就一定是类风湿关节炎吗？