南京发业大学NANJINGAGRICULTURALUNIVERSITY实验四酶联免疫吸附试验(ELISA)
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 实验四 酶联免疫吸附试验 (ELISA)
南京发业大学实验目的NANJING AGRICULTURALUNIVERSITY掌握ELISA的操作方法了解ELISA在动物疫病诊断中的意义
一、实验目的 NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY ◆掌握ELISA的操作方法 ◆了解ELISA在动物疫病诊断中的意义
二、实验原理南京发业大学NANJING AGRICULTURALUNIVERSITY免疫酶技术(enzyme immunoassay)是将抗原和抗体的特异性免疫反应与酶的催化反应的敏感性相结合而建立的一种免疫检测技术。利用酶标记抗体或抗原,以检测相应抗原或抗体的一种免疫学标记技术。*化学比色法敏感度为mg/mL;免疫酶技术敏感度为μg/mL
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 二、实验原理 免疫酶技术(enzyme immunoassay) 是将抗原和抗体的特异性免疫反应与酶的催化反 应的敏感性相结合而建立的一种免疫检测技术。 利用酶标记抗体或抗原,以检测相应抗原或抗体 的一种免疫学标记技术。 *化学比色法敏感度为mg/mL;免疫酶技术敏感度为μg/mL
南京发业大学NANJINGAGRICULTURALUNIVERSITY酶联免疫吸附试验(ELISA)(Enzyme Linked Immunosorbent Assay)是一类常用的免疫酶技术,是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使抗原抗体反应在固相表面进行。固相表面:酶标板、酶标条(聚苯乙烯材料)常用的酶:辣根过氧化物酶(HRP)碱性磷酸酶(AP)
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY 酶联免疫吸附试验(ELISA) (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) 是一类常用的免疫酶技术,是将已知的抗原或抗体吸附 在固相载体表面,使抗原抗体反应在固相表面进行。 固相表面:酶标板、酶标条 (聚苯乙烯材料) 常用的酶:辣根过氧化物酶(HRP) 碱性磷酸酶(AP)
常见的酶联免疫吸附试验南京发业大学NANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYAb3·直接法AblAb2Me-Ag·间接法AblAblA间接法夹心法双夹心法·(双)夹心法·竞争法Ab.F·阻断法AbAbAb试验组 酶标抗原竞争法对照组酶-抗酶抗体法图16-3酶联免疫吸附试验(ELISA)的类型Ag为抗原;Abl为特异性抗体;Ab2为抗抗体:Ab3为用另一种动物制备的特异性抗体;Ab·E为酶与抗酶抗体复合物;E为酶;黑色小点为底物酶解后的色素,白色小环为未酶解的底物
NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY • 直接法 • 间接法 • (双)夹心法 • 竞争法 • 阻断法 常见的酶联免疫吸附试验