第四章抗体antibody，Ab第一节概念1抗体：由抗原致敏的B细胞分化为浆细胞分泌产生的能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。2.免疫球蛋白（Ig）：将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白称为～。免疫球蛋白的含义要比抗体更广。抗体和Ig的含义相互关联，Ab是生物学功能。Ig是化学结构相联。3．抗体主要存在于血清中又称抗血清，把以血清作为检测抗体的反应叫血清学反应。在机体的其它体液如淋巴液，乳汁中，鸡卵囊中也含有抗体，少数抗体存在于淋巴细胞的表面。4.游离型和膜型两种：MsIg。目前已知人的Ig为五种IgGIgMIgAIgEIgD家畜只有前四种二、理化性质抗体分子和其它蛋白质分子一样，可以根据其在浓盐溶液中的溶解度，静电荷，分子量进行提取和分类。1.在饱和（NH4）2SO4溶液中发生沉淀。当把含有抗体的血清与等量饱和硫酸溶液相混时，抗体球蛋白即沉淀下来，以此可从血清中粗提球蛋白(免疫球蛋白的盐析)2.在血清蛋白中Y一球蛋白在碱性溶液中所带负电荷最少由于两种球白所带电荷不同，故在电泳时向各极移动快慢不同可分离。3：单体分子量较小，利用此方法可用明胶过滤法提取之球蛋白的分子量为160000~180000（IgG）根据这一性质，可采用凝胶过滤的方法（葡萄糖凝胶）将球蛋白与其它物质分开，用于经盐析沉淀后球蛋白的脱盐及球蛋白的提纯。如根据球蛋白分子量为160000，可选用G25~G50凝胶，将盐和球蛋白分开。先流出的是球蛋白，后流出的是盐类。4．抗原性，本身为一种蛋白质抗体是球蛋白，因此凡能影响蛋白质的理化因素的物质均可影响抗体的活性。第二节IG的结构
第四章 抗体 antibody，Ab 第一节 概念 1.抗体：由抗原致敏的 B 细胞分化为浆细胞分泌产生的能与抗原 特异性结合的免疫球蛋白。 2．免疫球蛋白（Ig）：将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的 球蛋白称为~。免疫球蛋白的含义要比抗体更广。 抗体和 Ig 的含义相互关联，Ab 是生物学功能。Ig 是化学结构相 联。 3．抗体主要存在于血清中又称抗血清，把以血清作为检测抗体 的反应叫血清学反应。在机体的其它体液如淋巴液，乳汁中，鸡卵囊 中也含有抗体，少数抗体存在于淋巴细胞的表面。 4.游离型和膜型两种：MsIg。 目前已知人的 Ig 为五种 IgG IgM IgA IgE IgD 家畜只有 前四种 二、理化性质 抗体分子和其它蛋白质分子一样，可以根据其在浓盐溶液中的溶 解度，静电荷，分子量进行提取和分类。 1． 在饱和（NH4）2SO4溶液中发生沉淀。 当把含有抗体的血清与等量饱和硫酸溶液相混时，抗体球蛋白即 沉淀下来，以此可从血清中粗提球蛋白(免疫球蛋白的盐析) 2． 在血清蛋白中 Y—球蛋白在碱性溶液中所带负电荷最少 由于两种球白所带电荷不同，故在电泳时向各极移动快慢不同可 分离。 3． 单体分子量较小，利用此方法可用明胶过滤法提取之 球蛋白的分子量为 160000~180000（IgG）根据这一性质，可采 用凝胶过滤的方法(葡萄糖凝胶)将球蛋白与其它物质分开，用于经盐 析沉淀后球蛋白的脱盐及球蛋白的提纯。如根据球蛋白分子量为 160000，可选用 G25~G50凝胶，将盐和球蛋白分开。先流出的是球蛋 白，后流出的是盐类。 4． 抗原性，本身为一种蛋白质 抗体是球蛋白，因此凡能影响蛋白质的理化因素的物质均可影响 抗体的活性。 第二节 IG 的结构
N端HIC端一、基本结构：1.4条链由4条多肽链组成“Y”型，其中两条链分子量为50d。称为重链（H链），另外两条分子量为25d。称轻链(L链)。四条链以双硫键相连，两条L链通过一SS链连结在H链的氨基端，形成L-H-H-L。以H链不同分为五类IgAIgGIgMIgDIgE以L链不同分为2型：2.3个功能区1.可变区（variableregion，V区）（1）组成：N端轻链的12和重链的1/4组成，含有110个氨基酸（2）（2）功能：与抗原结合，存在与抗原决定簇结合的特异性结合点。一个Ig分子在功能上是双价。2.绞链区（hingeregion）：连接可变区与稳定区，起轴承关节作用它是连结Ig分子Y头和尾的关节和中轴，使Ig分子的两臂自由转动，有利于与抗原结合，而且是连结重链和轻链的二硫链，因此具有重要的生物学作用。3.稳定区（constantregion，C区）（1）组成：轻链的1/2和重链的3/4组成，在CH又有三个亚单位即CH1，CH2和CH3组成（2）C区抗体的生物学活性的表现。在CH又有三个亚单位即CHI，CH2和CH3组成，并表现各自的功能。抗体Fc区的生物学活性(1)结合补体(CH2)(2)亲细胞：粘附巨噬C，ADCC，抗寄生虫免疫，变态反应(3)通过胎盘
H N 端 L C 端 一、 基本结构： 1.4 条链 由 4 条多肽链组成“Y”型，其中两条链分子量为 50d。称为重链（H 链），另外两条分子量为 25d。称轻链(L 链)。四条链以双硫键相连， 两条 L 链通过—S—S—链连结在 H 链的氨基端，形成 L-H-H-L。 以 H 链不同分为五类 IgA IgG IgM IgD IgE 以 L 链不同分为 2 型： 2.3 个功能区 1． 可变区（ variable region, V 区） （1）组成：N 端轻链的 1/2 和重链的 1/4 组成，含有 110 个氨基酸（2） （2）功能：与抗原结合，存在与抗原决定簇结合的特异性结合点。 一个 Ig 分子在功能上是双价。 2． 绞链区（hinge region）： 连接可变区与稳定区，起轴承关节作用 它是连结 Ig 分子 Y 头和尾的关节和中轴，使 Ig 分子的两臂自由 转动，有利于与抗原结合，而且是连结重链和轻链的二硫链 ，因 此具有重要的生物学作用。 3． 稳定区（ constant region, C 区） （1）组成：轻链的 1/2 和重链的 3/4 组成，在 CH 又有三个亚单位即 CH1，CH2 和 CH3 组成 （2）C 区抗体的生物学活性的表现。 在 CH 又有三个亚单位即 CH1，CH2 和 CH3 组成，并表现各自 的功能。抗体 Fc 区的生物学活性 （1） 结合补体(CH2) （2） 亲细胞：粘附巨噬 C，ADCC，抗寄生虫免疫，变态反 应 （3） 通过胎盘
(4)结合SPA(5)遗传标志的反映区（6）具有抗原性（本质上为蛋白质，所有蛋白质为良好抗原注射给动物产生抗抗体（第二抗体）抗体双重性：具有抗体的活性又有抗原性（抗体是一种蛋白质，因此也具有刺激机体产生免疫应答的性能，由抗体免疫动物产生的抗体称为抗抗体(第二抗体)例：抗大肠杆菌（E。COLI）抗体E.COLI一一鸡一一抗ECOLI抗体（第一抗体）兔一一抗鸡抗体（第二抗体）3.两个水解片段：两个抗原结合片断Fab(捕捉抗原）一个可结晶片段：Fc(抗体活性的体现)用番木瓜蛋白酶将上述单体Ig水解后可形成三个相等的片段，相当于Y字形分子的两臂和尾，从分子的两臂得到的两片段是相同，而且具有结合抗原的能力，为抗原结合部位又称Fab片段，从尾得到的第三个片段不能结合抗原，但可结晶，称为可结晶片段，Fc片段，抗体的许多生物活性存在Fc段上。二特殊结构1.连接链（joiningchain，J链）2.分泌片（secretorypiece,SP）总结：Ig的结构可理解为：1.四肽链，两条L，两条H，各自用SS---连结，两条L相同，两条H不同2.分为三个水解片段，两个Fab片段，一个Fc片段3.分为三个功能区，可变区(V)绞链区，稳定区(C)，V区为抗原结合区，C区为抗体生物效应区和遗传标志区。一、抗体的生物学活性Fab表现为抗体的识别Ag，Fc表现为抗体的效应1．结合特异性抗原（体内清除Ag，破坏靶C，产生过敏反应，体内监测疾病）抗体作为Ig分子的区别就在于抗体能与相应的抗原发生特异性结合，这种结合是由抗体的抗原结合点与抗原决定簇，通过静电力，氢键和范德堡力的作用相结合。由于抗原表面有许多决定
（4） 结合 SPA （5） 遗传标志的反映区 （6） 具有抗原性（本质上为蛋白质，所有蛋白质为良好抗原 注射给动物产生抗抗体（第二抗体） 抗体双重性：具有抗体的活性又有抗原性(抗体是一种蛋白质， 因此也具有刺激机体产生免疫应答的性能，由抗体免疫动物产生的抗 体称为抗抗体(第二抗体)) 例：抗大肠杆菌（E。COLI）抗体 E．COLI——鸡——抗 ECOLI 抗体（第一抗体） 兔——抗鸡抗体（第二抗体） 3.两个水解片段： 两个抗原结合片断 Fab(捕捉抗原) 一个可结晶片段：Fc(抗体活 性的体现) 用番木瓜蛋白酶将上述单体 Ig 水解后可形成三个相等的片段， 相当于 Y 字形分子的两臂和尾，从分子的两臂得到的两片段是相同， 而且具有结合抗原的能力，为抗原结合部位又称 Fab 片段，从尾得到 的第三个片段不能结合抗原，但可结晶，称为可结晶片段，Fc 片段， 抗体的许多生物活性存在 Fc 段上。 二.特殊结构 1.连接链（joining chain，J 链) 2.分泌片（secretory piece, SP） 总结：Ig 的结构可理解为： 1． 四肽链，两条 L，两条 H，各自用—S—S-连结，两条 L 相同，两条 H 不同 2．分为三个水解片段，两个 Fab 片段，一个 Fc 片段 3．分为三个功能区，可变区(V)绞链区，稳定区(C)，V 区为抗 原结合区，C 区为抗体生物效应区和遗传标志区。 一、 抗体的生物学活性 Fab 表现为抗体的识别 Ag，Fc 表现为抗体的效应 1． 结合特异性抗原（体内清除 Ag，破坏靶 C，产生过敏反应， 体内监测疾病）抗体作为 Ig 分子的区别就在于抗体能与相应的抗原 发生特异性结合，这种结合是由抗体的抗原结合点与抗原决定簇，通 过静电力，氢键和范德堡力的作用相结合。由于抗原表面有许多决定
簇，是多价的，可以与抗体结合，结果在体外形成抗原抗体复合物，应用此现象，可进行血清学试验，以诊断某些疾病。在体内抗原抗体结合导致一系列生理和病理效应。2：激活补体：（抗体与相应抗原结合，借助暴露的补体结合性与补体系统中的C1。9结合，以激活补体，导致一系列免疫学效应）CH3体内形成AgAb补体复合物，大（小）分子的被清除，中等大小沉积于血管基膜（IV系过敏反应）3．结合细胞：很多细胞都具有IgFc受体，不同类型的Ig结合不同的细胞产生不同的效应而参于免疫应答。BKNK巨噬C中性粒C1）IgE+肥大C=过敏反应(IgE对肥大细胞和嗜咸性细胞有亲和性，IgE与它们结合后可引起态反应。）2）IgGIgM+巨噬C=吞噬作用(IgM和IgG的Fc段可与巨噬细胞，中性粒细胞的Fc受体结合，可起到免疫调理作用，促进吞噬效果。）3）IgGIgM+K=ADCC结合带有抗原的靶细胞(其Fc段可与K细胞，巨噬细胞结合，发生抗体依赖性的细胞毒作用，以杀伤靶细胞)4）通过胎盘与粘膜IgG一人，兔，灵长类胎盘一胎儿体内，形成血绒毛膜型胎盘(Ig能借助Fc段主动经过胎盘进入胎儿血流中，形成胎儿的天然被动免疫（只有人））SIgA一局部粘膜一局部免疫(IgA可通过消化道和呼吸道粘膜，是局部免疫的重要因素）5）结合葡萄球菌A蛋白（SPA）（已知Ab+SPA=诊断试剂+未知细菌）IgG+金黄色葡萄球菌表面A蛋白（SPA含有FC受体）一协同凝集反应(IgG的Fc段能与金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)的Fc受体结合）6）具有抗原性（本质上为蛋白质，所有蛋白质为良好抗原注射给动物产生抗抗体（第二抗体）抗体双重性：具有抗体的活性又有抗原性（抗体是一种蛋白质，因此也具有刺激机体产生免疫应答的性能，由抗体免疫动物产生的抗体称为抗抗体（第二抗体）例：抗大肠杆菌（E。COLI）抗体
簇，是多价的，可以与抗体结合，结果在体外形成抗原抗体复合物， 应用此现象，可进行血清学试验，以诊断某些疾病。在体内抗原抗体 结合导致一系列生理和病理效应。 2． 激活补体：（抗体与相应抗原结合，借助暴露的补体结合性， 与补体系统中的 C1。9 结合，以激活补体，导致一系列免疫学效应） CH3 体内形成 Ag Ab 补体复合物，大（小）分子的被清除，中等大 小沉积于血管基膜 （Ⅳ系过敏反应） 3． 结合细胞：很多细胞都具有 IgFc 受体，不同类型的 Ig 结 合不同的细胞产生不同的效应而参于免疫应答。B K NK 巨噬 C 中 性粒 C 1） IgE+肥大 C=过敏反应(IgE 对肥大细胞和嗜咸性细胞有亲 和性，IgE 与它们结合后可引起态反应。) 2） IgG IgM+巨噬 C=吞噬作用(IgM 和 IgG 的 Fc 段可与巨噬 细胞，中性粒细胞的 Fc 受体结合，可起到免疫调理作用，促进吞噬 效果。) 3） IgG IgM+K=ADCC 结合带有抗原的靶细胞(其Fc 段可 与 K 细胞，巨噬细胞结合，发生抗体依赖性的细胞毒作用，以杀伤 靶细胞) 4） 通过胎盘与粘膜 IgG—人，兔，灵长类胎盘—胎儿体内，形成血绒毛膜型胎盘(Ig 能借助 Fc 段主动经过胎盘进入胎儿血流中，形成胎儿的天然被动免 疫（只有人）) SIgA—局部粘膜—局部免疫(IgA 可通过消化道和呼吸道粘膜， 是局部免疫的重要因素) 5） 结合葡萄球菌 A 蛋白（SPA）（已知 Ab+SPA=诊断试剂+未 知细菌）IgG+金黄色葡萄球菌表面 A 蛋白（SPA 含有 FC 受体）—协 同凝集反应(IgG 的 Fc 段能与金黄色葡萄球菌 A 蛋白(SPA)的 Fc 受体 结合) 6） 具有抗原性（本质上为蛋白质，所有蛋白质为良好抗原 注射给动物产生抗抗体（第二抗体） 抗体双重性：具有抗体的活性又有抗原性(抗体是一种蛋白质， 因此也具有刺激机体产生免疫应答的性能，由抗体免疫动物产生的抗 体称为抗抗体(第二抗体)) 例：抗大肠杆菌（E。COLI）抗体
E.COLI一一鸡一一抗ECOLI抗体（第一抗体）兔一一抗鸡抗体（第二抗体）第三节各类IG的理化特性与功能（一）IG：（中和性Ab，C依赖性Ab）1、IgG多为单体，分子量160000~180000d，分子量是Ig中最小的一种。2.血清中含量最多，占Ig的70~80%。持续时间最长，半衰期约为23天。在体液免疫中发挥主导作用。3.IgG是唯一能通过人、灵长类动物、兔胎盘的抗体。4、IgG的CH2能通过经典途径激活补体。5、通过Fc段与细胞表面FcR结合。与吞噬细胞结合发挥调理作用：与K细胞结合，发挥ADCC作用：与葡萄球菌A蛋白结合。6、参与II、III型超敏反应。7.具有抗菌、抗毒素、抗病毒和杀伤肿瘤细胞的作用。（二）IgM一一凝集抗体1.为五聚体，是分子量最大的Ig，称巨球蛋白。2.免疫应答最早产生IgM，但持续时间短。可用于早期诊断，新生儿宫内感染的诊断。3.IgM激活补体能力比IgG强，活性最强的凝集抗体。4.也可参与II、III型超敏反应5.凝集细菌，溶菌。体内产生初次应答最早首先产生IgM(血清含量仅次于IgG，是抗早期感染的主要Ig，由于其有较多的抗原结合价，一分子IgG可同时与多个靶细胞结合，故IgM的凝集作用用及在补体参于的溶血作用要比IgG大1000倍，因此IgM是活性最强的凝集抗体，具有抗菌，溶菌作用。它的产生不需要T细胞辅助，为非细胞依赖性抗体。在感染的早期，检查IgM可对疾病作出早期诊断，胎儿脐带血检出IgM可作为胚胎感染的指标。功能：1）凝集细菌（是体内活性最强的凝集Ab）抗菌，溶菌（靠补体作用）1）用于胎盘感染的诊断（属非C依赖性Ab感染早期主要是IgM(三）IgA
E．COLI——鸡——抗 ECOLI 抗体（第一抗体） 兔——抗鸡抗体（第二抗体） 第三节 各类 IG 的理化特性与功能 （一） IG：（中和性 Ab，C 依赖性 Ab） 1、IgG 多为单体，分子量 160000~180000d，分子量是 Ig 中最小 的一 种。 2.血清中含量最多,占 Ig 的 70~80%。持续时间最长，半衰期约 为 23 天。在体液免疫中发挥主导作用。 3. IgG 是唯一能通过人、灵长类动物、兔胎盘的抗体。 4、IgG 的 CH2 能通过经典途径激活补体。 5、通过 Fc 段与细胞表面 FcR 结合。 与吞噬细胞结合发挥调理作用；与 K 细胞结合，发挥 ADCC 作用；与葡萄球菌 A 蛋白 结合。 6、参与 II、III 型超敏反应。 7. 具有抗菌、抗毒素、抗病毒和杀伤肿瘤细胞的作用。 （二） IgM——凝集抗体 1.为五聚体，是分子量最大的 Ig，称巨球蛋白。 2.免疫应答最早产生 IgM，但持续时间短。可用于早期诊断，新 生儿宫内感染的诊断。 3.IgM 激活补体能力比 IgG 强，活性最强的凝集抗体。 4.也可参与 II、III 型超敏反应 5.凝集细菌，溶菌。 体内产生初次应答最早首先产生 IgM(血清含量仅次于 IgG，是抗 早期感染的主要 Ig，由于其有较多的抗原结合价，一分子 IgG 可同时 与多个靶细胞结合，故 IgM 的凝集作用用及在补体参于的溶血作用 要比 IgG 大 1000 倍，因此 IgM 是活性最强的凝集抗体，具有抗菌， 溶菌作用。它的产生不需要 T 细胞辅助，为非细胞依赖性抗体。在感 染的早期，检查 IgM 可对疾病作出早期诊断，胎儿脐带血检出 IgM, 可作为胚胎感染的指标。 功能：1） 凝集细菌（是体内活性最强的凝集 Ab）抗菌，溶菌 （靠补体作用） 1） 用于胎盘感染的诊断（属非 C 依赖性 Ab 感染早期主要是 IgM （三） IgA