蛋白质的生物合成 (一)名词解释 1.翻译2.密码子3.密码的简并性4.同义密码子5.变偶假说6.移 码突变7.同功受体8.多核糖体 (二)问答题 1.参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能? 2.遗传密码是如何破译的? 3.遗传密码有什么特点? 4.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 5.简述核糖体的活性中心的二位点模型及三位点模型的内容。 6.氨基酸在蛋白质合成过程中是怎样被活化的 7.简述蛋白质生物合成过程。 8.蛋白质合成中如何保证其翻译的正确性? 9.原核细胞和真核细胞在合成蛋白质的起始过程有什么区别。 10.蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 11.蛋白质的高级结构是怎样形成的? 12.真核细胞与原核细胞核糖体组成有什么不同?如何证明核糖体是蛋白质 的合成场所? 13.已知一种突变的噬菌体蛋白是由于单个核苷酸插入引起的移码突变的, 将正常的蛋白质和突变体蛋白质用胰蛋白酶消化后,进行指纹图分析。结果发现 只有一个肽段的差异,测得其基酸顺序如下: 正常肽段Met-Val-Cys-Val-Arg 突变体肽段Met-Ala-Met-Arg (1)什么核苷酸插入到什么地方导致了氨基酸顺序的改变 (2)推导出编码正常肽段和突变体肽段的核苷酸序列 提示:有关氨基酸的简并密码分别为 Val: GUU GUC GUA GUG Arg: CGU CGC CGA CG AGA AGG Cys: UGU UGC Ala: GCU GCC GCA CGC 14.试列表比较核酸与蛋白质的结构。 15.试比较原核生物与真核生物的翻译。 (三)填空题 1.蛋白质的生物合成是以 为模板,以 为原料直接 供体,以 为合成杨所。 2.生物界共有 个密码子,其中 个为氨基酸编码 起始密码子为 终止密码子为 3.原核生物的起始tRNA以 表示,真核生物的起始tRNA以 表示,延伸中的甲硫氨酰tRNA以 表示
蛋白质的生物合成 (一)名词解释 1．翻译 2．密码子 3．密码的简并性 4．同义密码子 5．变偶假说 6．移 码突变 7．同功受体 8．多核糖体 (二)问答题 1．参与蛋白质生物合成体系的组分有哪些?它们具有什么功能? 2．遗传密码是如何破译的? 3．遗传密码有什么特点? 4．简述三种 RNA 在蛋白质生物合成中的作用。 5．简述核糖体的活性中心的二位点模型及三位点模型的内容。 6．氨基酸在蛋白质合成过程中是怎样被活化的? 7．简述蛋白质生物合成过程。 8．蛋白质合成中如何保证其翻译的正确性? 9．原核细胞和真核细胞在合成蛋白质的起始过程有什么区别。 10．蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 11．蛋白质的高级结构是怎样形成的? 12．真核细胞与原核细胞核糖体组成有什么不同?如何证明核糖体是蛋白质 的合成场所? 13. 已知一种突变的噬菌体蛋白是由于单个核苷酸插入引起的移码突变的， 将正常的蛋白质和突变体蛋白质用胰蛋白酶消化后，进行指纹图分析。结果发现 只有一个肽段的差异，测得其基酸顺序如下： 正常肽段 Met-Val-Cys-Val-Arg 突变体肽段 Met-Ala-Met-Arg （1）什么核苷酸插入到什么地方导致了氨基酸顺序的改变？ （2）推导出编码正常肽段和突变体肽段的核苷酸序列. 提示：有关氨基酸的简并密码分别为 Val: GUU GUC GUA GUG Arg: CGU CGC CGA CG AGA AGG Cys: UGU UGC Ala: GCU GCC GCA CGC 14. 试列表比较核酸与蛋白质的结构。 15. 试比较原核生物与真核生物的翻译。 (三)填空题 1．蛋白质的生物合成是以___________为模板，以___________为原料直接 供体，以_________为合成杨所。 2．生物界共有______________个密码子，其中___________个为氨基酸编码， 起始密码子为_________；终止密码子为_______、__________、____________。 3．原核生物的起始 tRNA 以___________表示，真核生物的起始 tRNA 以 ___________表示，延伸中的甲硫氨酰 tRNA 以__________表示
4.植物细胞中蛋白质生物合成可在 和 三种细胞器内进行 5.延长因子T由Tu和Ts两个亚基组成,Tu为对热 蛋白质, Ts为对热 蛋白质。 6.原核生物中的释放因子有三种,其中RF-1识别终止密码子 RF-2识别 真核中 的释放因子只有 7.氨酰-tRNA合成酶对 和相应的 有高度的选择性 8.原核细胞的起始氨基酸是 起始氨酰-tRNA是 9.原核细胞核糖体的 亚基上的 协助辨认起始密码 子 10.每形成一个肽键要消耗 个高能磷酸键,但在合成起始时 还需多消耗 个高能磷酸键。 11.肽基转移酶在蛋白质生物合成中的作用是催化 形成和 的水解。 12.肽链合成终止时 进人“A”位,识别出 ,同时 终止因子使 的催化作用转变为 13.原核生物的核糖体由 小亚基和 大亚基组成, 真核生物核糖体由 小亚基和 大亚基组成 14.蛋白质中可进行磷酸化修饰的氨基酸残基主要为 (四)选择题 1.蛋白质生物合成的方向是()。 ①从C→N端②定点双向进行③从N端、C端同时进行④从N→C端 2.不能合成蛋白质的细胞器是()。 ①线粒体②叶绿体③高尔基体④核糖体 3.真核生物的延伸因子是()。 ①EF-Tu②EF一2③EF-G④EF-1 4.真核生物的释放因子是()。 ①RF②RF→1③RF一2④RF-3 5.能与tRNA反密码子中的I碱基配对的是()。 ①A、G②C、U③U④U、C、A 6.蛋白质合成所需能量来自()。 ①ATP②GTP③ATP、GTP④GTP 7.tRNA的作用是()。 ①将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上②把氨基酸带到mRNA位置上 ③将mRNA接到核糖体上④增加氨基酸的有效浓度 8.关于核糖体的移位,叙述正确的是() ①空载tRNA的脱落发生在“A”位上②核糖体沿mNA的3’→5’方向 相对移动 ③核糖体沿mRNA的5’→3’方向相对移动 ④核糖体在皿RNA上一次移动的距离相当于二个核苷酸的长度 9.在蛋白质合成中,下列哪一步不需要消耗高能磷酸键()。 ①肽基转移酶形成肽键②氨酰一tRNA与核糖体的“A,’位点结合
4．植物细胞中蛋白质生物合成可在__________、___________和___________ 三种细胞器内进行。 5．延长因子 T 由 Tu 和 Ts 两个亚基组成，Tu 为对热___________蛋白质， Ts 为对热________蛋白质。 6 ． 原 核 生 物 中 的 释 放 因 子 有 三 种 ， 其 中 RF-1 识 别 终 止 密 码 子 _____________、____________；RF-2 识别__________、____________；真核中 的释放因子只有___________一种。 7．氨酰-tRNA 合成酶对__________和相应的________有高度的选择性。 8．原核细胞的起始氨基酸是_______，起始氨酰-tRNA 是____________。 9．原核细胞核糖体的___________亚基上的 __________协助辨认起始密码 子。 l0．每形成一个肽键要消耗_____________个高能磷酸键，但在合成起始时 还需多消耗___________个高能磷酸键。 11．肽基转移酶在蛋白质生物合成中的作用是催化__________形成和 _________的水解。 12．肽链合成终止时，___________进人“A”位，识别出_________，同时 终止因子使________的催化作用转变为____________。 13．原核生物的核糖体由____________小亚基和____________大亚基组成， 真核生物核糖体由_________小亚基和_______________大亚基组成。 14. 蛋白质中可进行磷酸化修饰的氨基酸残基主要为_____________、 ____________、___________。 (四)选择题 1．蛋白质生物合成的方向是( )。 ①从 C→N 端 ②定点双向进行 ③从 N 端、C 端同时进行 ④从 N→C 端 2．不能合成蛋白质的细胞器是( )。 ①线粒体 ②叶绿体 ③高尔基体 ④核糖体 3．真核生物的延伸因子是( )。 ①EF—Tu ②EF 一 2 ③EF--G ④EF 一 1 4．真核生物的释放因子是( )。 ①RF②RF 一 1 ③RF 一 2 ④RF 一 3 5．能与 tRNA 反密码子中的 I 碱基配对的是( )。 ①A、G ②C、U ③U ④U、C、A 6．蛋白质合成所需能量来自( )。 ①ATP ②GTP ③ATP、GTP ④GTP 7．tRNA 的作用是( )。 ①将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上 ②把氨基酸带到 mRNA 位置上 ③将 mRNA 接到核糖体上 ④增加氨基酸的有效浓度 8．关于核糖体的移位，叙述正确的是( )。 ①空载 tRNA 的脱落发生在“A”位上 ②核糖体沿 mRNA 的 3’→5’方向 相对移动 ③核糖体沿 mRNA 的 5’→3’方向相对移动 ④核糖体在 mRNA 上一次移动的距离相当于二个核苷酸的长度 9．在蛋白质合成中，下列哪一步不需要消耗高能磷酸键( )。 ①肽基转移酶形成肽键 ②氨酰一 tRNA 与核糖体的“A，’位点结合
③核糖体沿mRNA移动 ④fMet- tRNAf与mRNA的起始密码子结合以及与大、小亚基的结合 10.在真核细胞中肽链合成的终止原因是( ①已达到mRNA分子的尽头②具有特异的tRNA识别终止密码子 ③终止密码子本身具有酯酶作用,可水解肽酰与tRNA之是的酯键 ④终止密码子被终止因子(RF)所识别 11.蛋白质生物合成中的终止密码是() ①UAA②UAU③UAC④UAG⑤UGA 12.根据摆动假说,当tRNA反密码子第1位碱基是Ⅰ时,能够识别哪几种 密码子() ①A②C③G④T⑤U 13.下列哪些因子是真核生物蛋白质合成的起始因子( ①IF1②IF2③eIF2④eIF4⑤elF 14.蛋白质生物合成具有下列哪些特征()。 ①氨基酸必须活化②需要消耗能量③每延长一个氨基酸必须经过进 位、转肽、移位、税落四个步骤④合成肽链由C端向N端不断延长⑤新生肽 链需加工才能成为活性蛋白质 15.下列哪些内容属于蛋白质合成后的加工、修饰()。 ①切除内含子,连接外显子 ②切除信号肽 ③切除N 端Met ④形成二硫键 ⑤氨的侧链修饰 16.蛋白质生物合成过程中,下列哪些步骤需要消耗能量()。 ①氨基酸分子的活化②70S起始复合物的形成③氨酰tRNA进入核 糖体A位 ④肽键形成⑤核糖体移位 17.原核生物的肽链延伸过程有下列哪些物质参与()。 ①肽基转移酶 ②鸟苷三磷酸 ③mRNA ④甲酰甲硫氨酰 -tRNA ⑤EF-Tu、EF-Ts、EF- 18. Shine- Dalgarno顺序(SD-顺序)是指 ①在mRMA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序 ②在DNA分子上转录起始点前8-13个核苷酸处的顺序 ③l6 SrRNA3’端富含嘧啶的互补顺序④启动基因的顺序特征⑤以上 都正确 19.在研究蛋白合成中,可利用嘌呤霉素,这是因为它:() ①使大小亚基解聚②使肽链提前释放③抑制氨基酰-tRNA合成酶 活性④防止多核糖体形成⑤以上都正确 20.氨基酸活化酶:() ①活化氨基酸的氨基②利用GTP作为活化氨基酸的能量来源 ③催化在tRNA的5’磷酸与相应氨基酸间形成酯键 ④每一种酶特异地作用于一种氨基酸及相应的tRNA⑤以上都不正 确 (五)是非题 1.DNA不仅决定遗传性状,而且还直接表现遗传性状。(
③核糖体沿 mRNA 移动 ④fMet—tRNAf 与 mRNA 的起始密码子结合以及与大、小亚基的结合 10．在真核细胞中肽链合成的终止原因是( )。 ①已达到 mRNA 分子的尽头 ②具有特异的 tRNA 识别终止密码子 ③终止密码子本身具有酯酶作用，可水解肽酰与 tRNA 之是的酯键 ④终止密码子被终止因子(RF)所识别 11．蛋白质生物合成中的终止密码是( )。 ①UAA ②UAU ③UAC ④UAG⑤UGA 12．根据摆动假说，当 tRNA 反密码子第 1 位碱基是 I 时，能够识别哪几种 密码子( ) ①A ②C ③G ④T ⑤U 13．下列哪些因子是真核生物蛋白质合成的起始因子( )。 ①IF1 ②IF2 ③eIF2 ④eIF4 ⑤elF4A 14．蛋白质生物合成具有下列哪些特征( )。 ①氨基酸必须活化 ②需要消耗能量 ③每延长一个氨基酸必须经过进 位、转肽、移位、税落四个步骤 ④合成肽链由 C 端向 N 端不断延长 ⑤新生肽 链需加工才能成为活性蛋白质 15．下列哪些内容属于蛋白质合成后的加工、修饰( )。 ①切除内含子，连接外显子 ②切除信号肽 ③切除 N- 端 Met ④形成二硫键 ⑤氨的侧链修饰 16．蛋白质生物合成过程中，下列哪些步骤需要消耗能量( )。 ①氨基酸分子的活化 ②70S 起始复合物的形成 ③氨酰 tRNA 进入核 糖体 A 位 ④肽键形成 ⑤核糖体移位 17．原核生物的肽链延伸过程有下列哪些物质参与( )。 ①肽基转移酶 ②鸟苷三磷酸 ③mRNA ④甲酰甲硫氨酰 -tRNA ⑤EF-Tu、EF-Ts、 EF-G 18.Shine-Dalgarno 顺序(SD-顺序)是指: ( ) ①在 mRNA 分子的起始码上游 8-13 个核苷酸处的顺序 ②在 DNA 分子上转录起始点前 8-13 个核苷酸处的顺序 ③16srRNA3'端富含嘧啶的互补顺序 ④启动基因的顺序特征 ⑤以上 都正确 19. 在研究蛋白合成中,可利用嘌呤霉素,这是因为它: ( ) ①使大小亚基解聚 ②使肽链提前释放 ③抑制氨基酰-tRNA 合成酶 活性 ④防止多核糖体形成 ⑤以上都正确 20. 氨基酸活化酶：( ) ①活化氨基酸的氨基 ②利用 GTP 作为活化氨基酸的能量来源 ③催化在 tRNA 的 5’磷酸与相应氨基酸间形成酯键 ④每一种酶特异地作用于一种氨基酸及相应的 tRNA ⑤以上都不正 确 (五)是非题 1．DNA 不仅决定遗传性状，而且还直接表现遗传性状。( )
2.密码子在mRNA上的阅读方向为5’→3’。() 3.每一种氨基酸都有两种以上密码子。() 4.一种tRNA只能识别一种密码子。() 5.线粒体和叶绿体的核糖体的亚基组成与原核生物类似。( 6.大肠杆菌的核糖体的小亚基必须在大亚基存在时,才能与mRNA结合。 7.大肠杆菌的核糖体的大亚基必须在小亚存在时,才能与mRNA结合。( 8.在大肠杆菌中,一种氨基酸只对应于一种氨酰-tRNA合成酶。( 9.氨基酸活化时,在氨酰-tRNA合成酶的催化下,由ATP供能,消耗一个 高能磷酸键。() 10.线粒体和叶绿体内的蛋白质生物合成起始与原核生物相同。( 11.每种氨基酸只能有一种特定的tRNA与之对应。( 12.AUG既可作为fMet-tRNA1和Met-tNA的密码子,又可作为肽链内部Met 的密码子。() 13.构成密码子和反密码子的碱基都只是A、U、C、G。( 14.核糖体大小亚基的结合和分离与Mg2,的浓度有关 15.核糖体的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亚基上。( 16.E.coli中,DnaA与复制起始区DNA结合,决定复制的起始。 参考答案 (一)名词解释 1.翻译( translation):以mRNA为模板,氨酰-tRNA为原料直接供体,在 多种蛋白质因子和酶的参与下,在核糖体上将 mRNA分子上的核苷酸顺序表达为 有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。 2.密码子( codon):mRNA中碱基顺序与蛋白质中氨基酸顺序的对应关系是 通过密码实现的,皿RNA中每三个相邻的碱基决定一个氨基酸,这三个相邻的碱 基称为一个密码子。 3.密码的简并性( degeneracy):一个氨基酸具有两个以上密码子的现象 4.同义密码子( synonym codon):为同一种氨基酸编码的各个密码子,称 为同义密码了 5.变偶假说( wobble hypothesis):指反密码子的前两个碱基(3’-端)按 照标准与密码子的前两个碱基(5’-端)配对,而反密码子中的第三个碱墓则有某 种程度的变动,使其有可能与几种不同的碱基配对。 6.移码突变( frame- shift mutation):在mRNA中,若插入或删去一个核 苷酸,就会使读码发错误,称为移码,由于移码而造成的突变、称移码突变。 7,同功受体( I isoacceptor):转运同一种氨基酸的几种tRNA称为同功受体。 8.反密码子( anticodon):指tRNA反密码子环中的三个核苷酸的序列,在 蛋白质合成过程中通过碱基配对,识别并结合到mRNA的特殊密码上 9.多核糖体( polysome):mRNA同时与若干个核糖体结合形成的念珠状结构, 称为多核糖体。 (二)问答题 1.①mRNA:蛋白质合成的模板:②tRNA:蛋白质合成的氨基酸运载工具; ③核糖体:蛋白质合成的场所;④辅助因子:(a)起始因子一一参与蛋白质合成 起始复合物形成;(b)延长因子一肽链的延伸作用;(c)释放因子一一终止肽链 合成并从核糖体上释放出来
2．密码子在 mRNA 上的阅读方向为 5’→ 3’。( ) 3．每—种氨基酸都有两种以上密码子。( ) 4．一种 tRNA 只能识别一种密码子。( ) 5．线粒体和叶绿体的核糖体的亚基组成与原核生物类似。( ) 6．大肠杆菌的核糖体的小亚基必须在大亚基存在时，才能与 mRNA 结合。 ( ) 7．大肠杆菌的核糖体的大亚基必须在小亚存在时，才能与 mRNA 结合。( ) 8．在大肠杆菌中，一种氨基酸只对应于一种氨酰-tRNA 合成酶。( ) 9．氨基酸活化时，在氨酰-tRNA 合成酶的催化下，由 ATP 供能，消耗—个 高能磷酸键。( ) 10．线粒体和叶绿体内的蛋白质生物合成起始与原核生物相同。( ) 11．每种氨基酸只能有一种特定的 tRNA 与之对应。( ) 12．AUG 既可作为 fMet-tRNAf和 Met-tRNAi的密码子，又可作为肽链内部 Met 的密码子。( ) 13．构成密码子和反密码子的碱基都只是 A、U、C、G。( ) 14．核糖体大小亚基的结合和分离与 Mg2+，的浓度有关。( ) 15．核糖体的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亚基上。( ) 16. E.coli 中，DnaA 与复制起始区 DNA 结合，决定复制的起始。( ) 二、参考答案 (一)名词解释 1．翻译(translation)：以 mRNA 为模板，氨酰-tRNA 为原料直接供体，在 多种蛋白质因子和酶的参与下，在核糖体上将 mRNA 分子上的核苷酸顺序表达为 有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。 2．密码子(codon)：mRNA 中碱基顺序与蛋白质中氨基酸顺序的对应关系是 通过密码实现的， mRNA 中每三个相邻的碱基决定一个氨基酸，这三个相邻的碱 基称为一个密码子。 3．密码的简并性(degeneracy)：—个氨基酸具有两个以上密码子的现象。 4．同义密码子(synonym codon)：为同—种氨基酸编码的各个密码子，称 为同义密码了。 5．变偶假说(wobble hypothesis)：指反密码子的前两个碱基(3’-端)按 照标准与密码子的前两个碱基(5’-端)配对，而反密码子中的第三个碱墓则有某 种程度的变动，使其有可能与几种不同的碱基配对。 6．移码突变(frame-shift mutation)：在 mRNA 中，若插入或删去一个核 苷酸，就会使读码发错误，称为移码，由于移码而造成的突变、称移码突变。 7，同功受体(isoacceptor)：转运同一种氨基酸的几种 tRNA 称为同功受体。 8．反密码子(anticodon)：指 tRNA 反密码子环中的三个核苷酸的序列，在 蛋白质合成过程中通过碱基配对，识别并结合到 mRNA 的特殊密码上。 9．多核糖体(polysome)：mRNA 同时与若干个核糖体结合形成的念珠状结构， 称为多核糖体。 (二)问答题 1．①mRNA：蛋白质合成的模板；②tRNA：蛋白质合成的氨基酸运载工具； ③核糖体：蛋白质合成的场所；④辅助因子：(a)起始因子—--参与蛋白质合成 起始复合物形成；(b)延长因子—--肽链的延伸作用；(c)释放因子一--终止肽链 合成并从核糖体上释放出来
2.提示:三个突破性工作(1)体外翻译系统的建立;(2)核糖体结合技术 (3)核酸的人工合成。 3.(1)密码无标点:从起始密码始到终止密码止,需连续阅读,不可中断。 增加 加或删除某个核苷酸会发生移码突变。 (2)密码不重叠:组成一个密码的三个核苷酸只代表一个氨基酸,只使用一 次,不重叠使用 (3)密码的简并性:在密码子表中,除Met、Trp各对应一个密码外,其余氨 基酸均有两个以上的密码,对保持生物遗传的稳定性具有重要意义。 (4)变偶假说:密码的专一性主要由头两位碱基决定,第三位碱基重要性不 大,因此在与反密码子的相互作用中具有一定的灵活性。 (5)通用性及例外:地球上的一切生物都使用同一套遗传密码,但近年来已 发现某些个别例外现象,如某些哺乳动物线粒体中的UGA不是终止密码而是色氨 酸密码子。 (6)起始密码子AUG,同时也代表Met,终止密码子UAA、UAG、UGA使用频率 不同 4.(1)mRNA:DNA的遗传信息通过转录作用传递给mRMA,mRNA作为蛋白质 合成模板,传递遗传信息,指导蛋白质合成 (2)tRNA:蛋白质合成中氨基酸运载工具,tRNA的反密码子与mRNA上的密 码子相互作用,使分子中的遗传信息转换成蛋白质的氨基酸顺序是遗传信息的转 换器。 (3)rRNA核糖体的组分,在形成核糖体的结构和功能上起重要作用,它与 核糖体中蛋白质以及其它辅助因子一起提供了翻译过程所需的全部酶活性 5.(1)二位点模型A位:氨酰-tRNA进入并结合的部位;P位:起始氨酰 tRNA或正在延伸的肽基-tRNA结合部位,也是无载的tRNA从核糖体上离开的部 位。(②2)三位点模型大肠杆菌上的70S核糖体上除A位和P位外,还存在第三 个结合tRNA的位点,称为E位,它特异地结合无负载的tRNA及无负载的tRNA 最后从核糖体上离开的位点 6.催化氨基酸活化的酶称氨酰-tRNA合成酶,形成氨酰-tRNA,反应分两步 进行 (1)活化需Mg2+和Mn2+,由ATP供能,由合成酶催化,生成氨基酸-AMP- 酶复合物。 (2)转移在合成酶催化下将氨基酸从氨基酸一AMP一酶复合物上转移到相 应的tRNA上,形成氨酰-tRNA。 7.蛋白质合成可分四个步骤,以大肠杆菌为例: (1)氨基酸的活化:游离的氨基酸必须经过活化以获得能量才能参与蛋白质 合成,由氨酰-tRNA合成酶催化,消耗1分子ATP,形成氨酰-tRNA (2)肽链合成的起始:由起始因子参与,mRNA与30S小亚基、50S大亚基及 起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet- trnAt)形成70S起始复合物,整个过程需GTP水 解提供能量。 (3)肽链的延长:起始复合物形成后肽链即开始延长。首先氨酰-tRNA结合 到核糖体的A位,然后,由肽酰转移酶催化与P位的起始氨基酸或肽酰基形成 肽键,tRNA或空载tRNA仍留在P位.最后核糖体沿mRNA53→3方向移动一 个密码子距离,A位上的延长一个氨基酸单位的肽酰RNA转移到P位,全部过 程需延伸因子EF-lu、EF-Ts,能量由GTP提供
2．提示：三个突破性工作 (1)体外翻译系统的建立；(2)核糖体结合技术； (3)核酸的人工合成。 3．(1)密码无标点：从起始密码始到终止密码止，需连续阅读，不可中断。 增加或删除某个核苷酸会发生移码突变。 (2)密码不重叠：组成一个密码的三个核苷酸只代表一个氨基酸，只使用一 次，不重叠使用。 (3)密码的简并性：在密码子表中，除 Met、Trp 各对应一个密码外，其余氨 基酸均有两个以上的密码，对保持生物遗传的稳定性具有重要意义。 (4)变偶假说：密码的专一性主要由头两位碱基决定，第三位碱基重要性不 大，因此在与反密码子的相互作用中具有一定的灵活性。 (5)通用性及例外：地球上的一切生物都使用同一套遗传密码，但近年来已 发现某些个别例外现象，如某些哺乳动物线粒体中的 UGA 不是终止密码而是色氨 酸密码子。 (6)起始密码子 AUG，同时也代表 Met，终止密码子 UAA、UAG、UGA 使用频率 不同。 4．(1)mRNA：DNA 的遗传信息通过转录作用传递给 mRNA，mRNA 作为蛋白质 合成模板，传递遗传信息，指导蛋白质合成。 (2)tRNA：蛋白质合成中氨基酸运载工具，tRNA 的反密码子与 mRNA 上的密 码子相互作用，使分子中的遗传信息转换成蛋白质的氨基酸顺序是遗传信息的转 换器。 (3)rRNA 核糖体的组分，在形成核糖体的结构和功能上起重要作用，它与 核糖体中蛋白质以及其它辅助因子一起提供了翻译过程所需的全部酶活性。 5．(1)二位点模型 A 位：氨酰-tRNA 进入并结合的部位；P 位：起始氨酰 -tRNA 或正在延伸的肽基-tRNA 结合部位，也是无载的 tRNA 从核糖体上离开的部 位。(2)三位点模型 大肠杆菌上的 70S 核糖体上除 A 位和 P 位外，还存在第三 个结合 tRNA 的位点，称为 E 位，它特异地结合无负载的 tRNA 及无负载的 tRNA 最后从核糖体上离开的位点。 6．催化氨基酸活化的酶称氨酰-tRNA 合成酶，形成氨酰-tRNA，反应分两步 进行： (1)活化 需 Mg2+和 Mn2+，由 ATP 供能，由合成酶催化，生成氨基酸-AMP- 酶复合物。 ， (2)转移 在合成酶催化下将氨基酸从氨基酸—AMP—酶复合物上转移到相 应的 tRNA 上，形成氨酰-tRNA。 7．蛋白质合成可分四个步骤，以大肠杆菌为例： (1)氨基酸的活化：游离的氨基酸必须经过活化以获得能量才能参与蛋白质 合成，由氨酰-tRNA 合成酶催化，消耗 1 分子 ATP，形成氨酰-tRNA。 (2)肽链合成的起始：由起始因子参与，mRNA 与 30S 小亚基、50S 大亚基及 起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成 70S 起始复合物，整个过程需 GTP 水 解提供能量。 (3)肽链的延长：起始复合物形成后肽链即开始延长。首先氨酰-tRNA 结合 到核糖体的 A 位，然后，由肽酰转移酶催化与 P 位的起始氨基酸或肽酰基形成 肽键，tRNAf 或空载 tRNA 仍留在 P 位．最后核糖体沿 mRNA5’→3’方向移动一 个密码子距离，A 位上的延长一个氨基酸单位的肽酰-tRNA 转移到 P 位，全部过 程需延伸因子 EF-Tu、EF-Ts，能量由 GTP 提供