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体细胞 分离 我体分子 外源DNA ↓ 酶切 外源基因 连接 受体细胞 DNA重组分子 转化与扩增 重组转化子 鉴定 ①■
基因工程步骤 1、从复杂的生物体中分离出带有目的基因 的DNA片段。 2、体外将外源DNA片段连接到能够自我复 制并具有选择信号的载体分子上,形成 重组DNA分子 3、将重组DNA分子转移到适当的寄主细胞 中,并与之一起增殖。 4、筛选出获得重组DNA分子的寄主细胞克隆 5、从筛选获得的转化子克隆提取出已得到打 增的目的基因。 6、将目的基因克隆到表达载体上,导入寄主 细胞,使之在新的背景下实现功能表达
基因工程步骤 1、从复杂的生物体中分离出带有目的基因 的DNA片段。 2、体外将外源DNA片段连接到能够自我复 制并具有选择信号的载体分子上,形成 重组DNA分子。 3、将重组DNA分子转移到适当的寄主细胞 中,并与之一起增殖。 4、筛选出获得重组DNA分子的寄主细胞克隆。 5、从筛选获得的转化子克隆提取出已得到扩 增的目的基因。 6、将目的基因克隆到表达载体上,导入寄主 细胞,使之在新的背景下实现功能表达
植物转基因技术 获得高效表达外源基因的纯合稳定的转 基因植物,也就是外源基因能在这一新 的环境中“安家落户”、“稳扎稳打” 要实现这一目的,需要考虑以下三个要 素:植物受体系统、植物表达载体系统、 转基因方法
植物转基因技术 获得高效表达外源基因的纯合稳定的转 基因植物,也就是外源基因能在这一新 的环境中 “安家落户”、“稳扎稳打”。 要实现这一目的,需要考虑以下三个要 素:植物受体系统、植物表达载体系统、 转基因方法
致癌杆菌 (d)质粒重新(e)细菌将带有 限制性 导入细菌 切割位点 TDNA插到植物()在培养基上 T-DNA 质粒 细胞染色体上培养植物细胞 (a)从细菌中 提取质粒,用限 重组Ti质粒 制性酶切割T-DNA (c)外源DNA插入 )细胞克隆产生植株 (b)外源DA用同样质粒的TDNA 植株上每个细胞都带有 的限制性酶切割 外源基因,可能表达新性状