(3)周俊宜主编《现代生物技术前沿·分子医学技能》.北京:科学出版社,2006.06.(4)肖建英等主编.《生物化学与分子生物学实验》.北京:科学出版社.2011.03.(5)药立波主编,《医学分子生物学实验技术》.北京:人民卫生出版社,2002.10.七、实验项目实验一分子医学实验技术绪论及真核细胞基因组DNA提取【目的与要求】1.掌握分子医学的概念、分子医学基本实验技术。2.掌握真核细胞基因组DNA提取的方法和原理。3.在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。【内容提要】1.绪论:分子医学的概念,分子医学基本实验技术;2.实验室规章制度,实验操作基本原则及注意事项,报告书写规范,课程考核内容介绍:3.真核基因组DNA提取的实验原理、操作方法、仪器使用及注意事项:4.基因组提取后的应用:基因组文库、PCR及southernblot;5.RNA提取方法简介:6.核酸(DNA和RNA)定量及定性方法的介绍:7.微量移液器的使用:8.离心机的使用。实验二合酶链式反应(PCR)及琼脂糖凝胶电泳检测【目的与要求】1.掌握PCR技术的原理和方法,了解其应用。2.掌握PCR体系各原料的作用。3.在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。【内容提要】1.PCR技术基本原理及应用:2.PCR技术的种类及应用(自学):3.PCR仪的使用(示教):4.PCR体系各原料的作用、引物设计原则、PCR反应条件选择和优化:5.琼脂糖凝胶电泳的原理、制备凝胶过程及核酸染料;-6-
- 6 - (3)周俊宜主编. 《现代生物技术前沿•分子医学技能》.北京:科学出版社,2006.06. (4)肖建英等主编. 《生物化学与分子生物学实验》.北京:科学出版社.2011.03. (5)药立波主编,《医学分子生物学实验技术》.北京:人民卫生出版社,2002.10. 七、实验项目 实验一 分子医学实验技术绪论及真核细胞基因组 DNA 提取 【目的与要求】 1.掌握分子医学的概念、分子医学基本实验技术。 2.掌握真核细胞基因组 DNA 提取的方法和原理。 3. 在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。 【内容提要】 1. 绪论:分子医学的概念,分子医学基本实验技术; 2. 实验室规章制度,实验操作基本原则及注意事项,报告书写规范,课程考核内容介 绍; 3. 真核基因组 DNA 提取的实验原理、操作方法、仪器使用及注意事项; 4. 基因组提取后的应用:基因组文库、PCR 及 southern blot; 5. RNA 提取方法简介; 6. 核酸(DNA 和 RNA)定量及定性方法的介绍; 7. 微量移液器的使用; 8. 离心机的使用。 实验二 聚合酶链式反应(PCR)及琼脂糖凝胶电泳检测 【目的与要求】 1. 掌握 PCR 技术的原理和方法,了解其应用。 2. 掌握 PCR 体系各原料的作用。 3. 在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。 【内容提要】 1. PCR 技术基本原理及应用; 2. PCR 技术的种类及应用(自学); 3. PCR 仪的使用(示教); 4. PCR 体系各原料的作用、引物设计原则、PCR 反应条件选择和优化; 5. 琼脂糖凝胶电泳的原理、制备凝胶过程及核酸染料;
6.琼脂糖凝胶电泳点样。实验三质粒DNA的提取及监鉴定【目的与要求】1.掌握碱裂解法小量提取质粒DNA的原理和方法。2.理解限制性核酸内切酶的特点。3.掌握琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA双酶切结果的方法。4.熟悉基因克隆技术的过程。5.在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。【内容提要】1.碱裂解法提取质粒的原理;2.限制性核酸内切酶的酶切位点、黏性末端、平末端;3.载体的种类:克隆载体(质粒、噬菌体、粘粒等)、表达载体;4.构建重组载体的过程(基因克隆技术)介绍(载体选择、感受态细胞、连接、转化、筛选及鉴定);5.基因克隆技术的应用;6.核酸部分实验的串讲(基因组DNA提取--PCR--质粒提取)。实验四GST标签蛋白亲和层析分离纯化【目的与要求】1:了解层析技术的概念及分类;2.掌握亲和层析的基本原理、方法及应用:3.熟悉Bradford法蛋白浓度测定原理及方法:4.掌握酶标仪的使用方法。5.掌握用EXCEL软件制备标准曲线的方法6.在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。【内容提要】1.蛋白质亲和层析分离纯化的基本原理及方法:2.层析技术的种类及原理;3.Bradford法蛋白浓度测定原理及方法:4.酶标仪的使用方法:5.用Excel制备标准曲线。-7-
- 7 - 6. 琼脂糖凝胶电泳点样。 实验三 质粒 DNA 的提取及鉴定 【目的与要求】 1. 掌握碱裂解法小量提取质粒 DNA 的原理和方法。 2. 理解限制性核酸内切酶的特点。 3. 掌握琼脂糖凝胶电泳检测质粒 DNA 双酶切结果的方法。 4. 熟悉基因克隆技术的过程。 5. 在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。 【内容提要】 1. 碱裂解法提取质粒的原理; 2. 限制性核酸内切酶的酶切位点、黏性末端、平末端; 3. 载体的种类:克隆载体(质粒、噬菌体、粘粒等)、表达载体; 4. 构建重组载体的过程(基因克隆技术)介绍(载体选择、感受态细胞、连接、转化、 筛选及鉴定); 5. 基因克隆技术的应用; 6. 核酸部分实验的串讲(基因组 DNA 提取-PCR-质粒提取)。 实验四 GST 标签蛋白亲和层析分离纯化 【目的与要求】 1. 了解层析技术的概念及分类; 2. 掌握亲和层析的基本原理、方法及应用; 3. 熟悉 Bradford 法蛋白浓度测定原理及方法; 4. 掌握酶标仪的使用方法。 5. 掌握用 EXCEL 软件制备标准曲线的方法; 6. 在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。 【内容提要】 1. 蛋白质亲和层析分离纯化的基本原理及方法; 2. 层析技术的种类及原理; 3. Bradford 法蛋白浓度测定原理及方法; 4. 酶标仪的使用方法; 5. 用 Excel 制备标准曲线
实验五SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)【目的与要求】1.熟悉电泳的基本原理和技术。2.掌握SDS-PAGE分离蛋白质的基本原理和方法,了解其应用。3.熟悉WesternBlot的基本原理,了解其应用。4.在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。【内容提要】1.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的基本原理和方法及基本操作流程;2.蛋白质电泳的种类及原理:3.垂直板电泳上样:4.WesternBlot的基本原理、操作过程及应用;5.总结蛋白质分离纯化、含量测定及保存的方法及相应原理。实验六酶联免疫吸附试验ELISA【目的与要求】1.掌握酶联免疫吸附实验(间接法)的原理、方法、结果判定及临床应用。2.掌握酶标仪的正确使用方法。3.熟悉酶联免疫吸附试验的分类、原理及主要应用。4.了解免疫标记技术的临床应用。【内容提要】1.抗原抗体反应的一般特点、影响因素及应用:2.免疫标记技术的常用分类、应用;3.酶联免疫吸附试验的基本原理:4、酶联免疫吸附试验的主要类型:直接法、间接法、夹心法、竞争法、捕获法、生物素-亲和素ELISA法等,介绍原理及主要用途。5.酶标仪的使用:6.使用微量移液器配制不同浓度液体:7.用Excel制备标准曲线。八、《分子医学实验技术》课程主讲教师职责分子医学实验平台负责《分子医学实验技术》课程考核方案的制定、考核过程的监督,组织主讲教师对《分子医学实验技术》课程进行考核方案的实施,对学生实验课情况进行评-8-
- 8 - 实验五 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 【目的与要求】 1.熟悉电泳的基本原理和技术。 2.掌握 SDS-PAGE 分离蛋白质的基本原理和方法,了解其应用。 3. 熟悉 Western Blot 的基本原理,了解其应用。 4. 在虚拟实验教学中心网站上预习和复习相关实验技术。 【内容提要】 1. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的基本原理和方法及基本操作流程; 2. 蛋白质电泳的种类及原理; 3. 垂直板电泳上样; 4. Western Blot 的基本原理、操作过程及应用; 5. 总结蛋白质分离纯化、含量测定及保存的方法及相应原理。 实验六 酶联免疫吸附试验 ELISA 【目的与要求】 1. 掌握酶联免疫吸附实验(间接法)的原理、方法、结果判定及临床应用。 2. 掌握酶标仪的正确使用方法。 3. 熟悉酶联免疫吸附试验的分类、原理及主要应用。 4. 了解免疫标记技术的临床应用。 【内容提要】 1. 抗原抗体反应的一般特点、影响因素及应用; 2. 免疫标记技术的常用分类、应用; 3. 酶联免疫吸附试验的基本原理; 4. 酶联免疫吸附试验的主要类型:直接法、间接法、夹心法、竞争法、捕获法、生物 素-亲和素 ELISA 法等,介绍原理及主要用途。 5. 酶标仪的使用; 6. 使用微量移液器配制不同浓度液体; 7. 用 Excel 制备标准曲线。 八、《分子医学实验技术》课程主讲教师职责 分子医学实验平台负责《分子医学实验技术》课程考核方案的制定、考核过程的监督, 组织主讲教师对《分子医学实验技术》课程进行考核方案的实施,对学生实验课情况进行评
估考核,对学生实验课考核资料(实验报告等)进行归类存档等。主讲教师在《分子医学实验技术》课程的考核中,主要负责《分子医学实验技术》课程考核方案的实施、考核结果的汇总与记录等。(一)依据教学大纲安排授课内容及进度。要求任课教师参加每次集体理论备课及预实验,以保证能将当次课程的所有理论内容对学生进行讲解,以及实验过程的顺利进行。(二)第一次课对学生公布《分子医学实验技术》课程考核方案,使全体学生知情本课程考核相关要求、考核时间、考核方式、考核内容及评分标准。(三)平台要依据教学大纲要求及讲授内容,制定考核实施办法及步骤。协助主讲教师根据考核计划安排对学生日常实验课情况进行记录评估:收取学生的实验报告,并进行评分。(四)主讲教师协助平台完成期末实践操作考核的各项组织工作。(五)本课程各部分考核成绩按相应分值记录,按权重折合后累加获得本课程最后总成绩。(六)每学期未,分子医学实验平台组织主讲教师,对本课程考核方案的科学性、执行情况和教学效果进行系统评价,并形成评价分析报告和整改意见上报学校教务处。(七)为保证教学质量、保证考核过程顺利进行,每位主讲教师需承担授课班级的所有六次实验课,无特殊情况不得中途更换教师。-9-
- 9 - 估考核,对学生实验课考核资料(实验报告等)进行归类存档等。 主讲教师在《分子医学实验技术》课程的考核中,主要负责《分子医学实验技术》课程 考核方案的实施、考核结果的汇总与记录等。 (一)依据教学大纲安排授课内容及进度。要求任课教师参加每次集体理论备课及预实 验,以保证能将当次课程的所有理论内容对学生进行讲解,以及实验过程的顺利进行。 (二)第一次课对学生公布《分子医学实验技术》课程考核方案,使全体学生知情本课 程考核相关要求、考核时间、考核方式、考核内容及评分标准。 (三)平台要依据教学大纲要求及讲授内容,制定考核实施办法及步骤。协助主讲教师 根据考核计划安排对学生日常实验课情况进行记录评估;收取学生的实验报告,并进行评分。 (四)主讲教师协助平台完成期末实践操作考核的各项组织工作。 (五)本课程各部分考核成绩按相应分值记录,按权重折合后累加获得本课程最后总成 绩。 (六)每学期末,分子医学实验平台组织主讲教师,对本课程考核方案的科学性、执行 情况和教学效果进行系统评价,并形成评价分析报告和整改意见上报学校教务处。 (七)为保证教学质量、保证考核过程顺利进行,每位主讲教师需承担授课班级的所有 六次实验课,无特殊情况不得中途更换教师
《分子医学实验技术》实验教学大纲适用专业:口腔医学总学时:36学时一、课程的性质和任务分子医学是随着分子生物学的飞速发展及向医学研究和应用领域的广泛渗透而派生出的一门全新的学科。它的主体内容是分子生物学在医学中的应用,涵盖了其主要的理论和技术体系,又侧重于医学领域中的应用,其中的技术体系是开展该领域研究的核心内容。《分子医学实验技术》是一门集分子生物学基本技能、科研探索和医学应用于一体的全新的综合性实验课程。《分子医学实验技术》为临床医学(含英文班、综合教学改革班)、口腔医学、麻醉医学、预防医学、检验技术等专业的专业基础必修课,由基础医学实验教学中心分子医学实验平台承担本课程的教学工作,使学生能掌握分子医学的经典理论和基本技能,开发学生的科研潜能和创新思维。本课程改革了传统的以单纯教师授课为主的单一教学方法,建立了一个以主体课程和学生动手为框架的,以课内课外结合、老师学生互动、课程学习和科研探索交叉,多种教学手段并进为特色的立体化教学模式,使学生在学习过程中得到全方位、多层面的综合训练。结合临床医学等相关专业本科生的培养目标,我们致力于加强教学过程管理,强化学生素质教育,提高教学质量,深化考核方式和方法的改革,调动学生学习的积极性,加强学生平时学习的主动性,让学生重视课程的全过程学习,提高学习效果。二、相关课程的衔接《分子医学实验技术》涵盖了分子医学常用技术,是以现代生物化学与分子生物学技术为基础,同时结合免疫学、生理学和化学等技术而形成的。生物化学与分子生物学是一门重要的医学基础课,主要采用化学的原理和方法探讨生命奥秘。医学免疫学是研究人体免疫系统的组成及功能,免疫应答的规律、特点及其产物,免疫性疾病的发病机理以及免疫学诊断和防治的一门学科。这两门课程作为分子医学实验技术的基础课为本课程的开设奠定了理论基础,同时,分子医学实验技术课程也使得学生能更好的领会生物化学与分子生物学及免疫学的相关理论,并为今后学习临床诊断及开展大学生科研创新奠定基础。三、教学的基本要求(一)分子医学实验技术实验课主要基于如下基本理论:- 10 -
- 10 - 《分子医学实验技术》实验教学大纲 适用专业:口腔医学 总学时: 36 学时 一、课程的性质和任务 分子医学是随着分子生物学的飞速发展及向医学研究和应用领域的广泛渗透而派生出 的一门全新的学科。它的主体内容是分子生物学在医学中的应用,涵盖了其主要的理论和技 术体系,又侧重于医学领域中的应用,其中的技术体系是开展该领域研究的核心内容。《分 子医学实验技术》是一门集分子生物学基本技能、科研探索和医学应用于一体的全新的综合 性实验课程。 《分子医学实验技术》为临床医学(含英文班、综合教学改革班)、口腔医学、麻醉医 学、预防医学、检验技术等专业的专业基础必修课,由基础医学实验教学中心分子医学实验 平台承担本课程的教学工作,使学生能掌握分子医学的经典理论和基本技能,开发学生的科 研潜能和创新思维。本课程改革了传统的以单纯教师授课为主的单一教学方法,建立了一个 以主体课程和学生动手为框架的,以课内课外结合、老师学生互动、课程学习和科研探索交 叉,多种教学手段并进为特色的立体化教学模式,使学生在学习过程中得到全方位、多层面 的综合训练。 结合临床医学等相关专业本科生的培养目标,我们致力于加强教学过程管理,强化学生 素质教育,提高教学质量,深化考核方式和方法的改革,调动学生学习的积极性,加强学生 平时学习的主动性,让学生重视课程的全过程学习,提高学习效果。 二、相关课程的衔接 《分子医学实验技术》涵盖了分子医学常用技术,是以现代生物化学与分子生物学技术 为基础,同时结合免疫学、生理学和化学等技术而形成的。生物化学与分子生物学是一门重 要的医学基础课,主要采用化学的原理和方法探讨生命奥秘。医学免疫学是研究人体免疫系 统的组成及功能,免疫应答的规律、特点及其产物,免疫性疾病的发病机理以及免疫学诊断 和防治的一门学科。这两门课程作为分子医学实验技术的基础课为本课程的开设奠定了理论 基础,同时,分子医学实验技术课程也使得学生能更好的领会生物化学与分子生物学及免疫 学的相关理论,并为今后学习临床诊断及开展大学生科研创新奠定基础。 三、教学的基本要求 (一)分子医学实验技术实验课主要基于如下基本理论: