1、限制酶的命名 ●根据其来源命名。如： 属名 菌株名 E coRI 种名 编号 EcoRI来源于大肠杆菌E.coIi的RY13菌株，I 指在该菌株中分离的第一个限制酶。 6
1、限制酶的命名 根据其来源命名。如： 属名 菌株名 E co R I 种名 编号 EcoRI来源于大肠杆菌E.coli的RY13菌株,I 指在该菌株中分离的第一个限制酶。 6
2、限制酶识别序列和切割形成 每种限制酶能识别和切割的通常4~8个核苷酸 序列，称为限制性位点或切点。 如：Hare川5-GGCC-3 Bam HI 5'-GGATCC-3 平未端(blunt end)对称轴切，连接效果差 切割形成粘性末端(sticky end)交错切
2、限制酶识别序列和切割形成 每种限制酶能识别和切割的通常4～8个核苷酸 序列，称为限制性位点或切点。 如：Hare Ⅲ 5’-GGCC-3’ Bam HI 5’-GGATCC-3` 平末端(blunt end) 对称轴切，连接效果差 切割形成 粘性末端（sticky end）交错切。 7
Hpa I 5-GHTHT AAHC3 3CAA☒TIG5 CUT Eco RI so AA回可H⊙3 cHTHTHAHAG5 3 CUT Hind Ill A☒AH©H©T3 5" 3 T-T▣aAA5 CUT 5©TsHc-Aa3 3 GAHCHGHTH⊙ CUT Pst I 8
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Restriction site in Enzyme Source organism double-stranded DNA EcoRI Echerichia coli 5" -G-A-A-T-T-C. -C-T-T-A-A-G- 51 m EcoRII E.coli 5· GCeT-G-G-C- -C-G-G-A-C-C-G- 5 部分常用限制酶及切点 m个 Hindil Haemophilus 5 -G-T-Py-Pu-A-C- influenzae -C-A-Pu-Py-T-G- ↑ Findl H.infuenzae 5 -A-A-G-C-T-T- -T-T-C-G-A-A- 5 个m Haelll FI.aegyptius 5 O-G-C-C- ---雪 54 Hpell H.parainfluenzae C-C-G-G- G-G-C-C 5 Pstl Providencia 5 -C-T-G-C-A-G- stuartii -G-A-C-G-T-C-5 Smal Serratia 5'-c-C-C-G-G-G- a产CSCe2国 G-G-Gi-●--●-5 Barl Bacilfus 5, -G-G-A.T-C-C. amnylollquefactens -C-C-T-A-G-G5 Bgill B.globiggi A-G-A-TCT 51 9
部分常用限制酶及切点 9
互补末端连接 AATT工 35 3 TTAA工 3 annealing AATT 3 工 TT AA AAT工 ATAT 十 3 ■工 10
互补末端连接 10