第二十章高效液相色谱法high performance liquidchromatograph HPLC
第二十章 高效液相色谱法 high performance liquid chromatograph HPLC
口慢色谱分离中等●快淋洗液川RTemporal串course8豆
慢 中等 快 色谱分离 Temporal course 淋洗液
由于液体与气体性质的以下差异: 溶质在液体中的扩散系数处比它在气体中小105倍左右 液体粘度比气体约大102倍 液体表面张力比气体大104倍左右 液体密度比气体约大103倍 液体不可压缩 我们通常所说的高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography)实际也是高压液相色谱(High Pressure Liquid Chromatography),因为没有很高的压力 就不可能产生很高的分离效率
由于液体与气体性质的以下差异: •溶质在液体中的扩散系数比它在气体中小105倍左右 •液体粘度比气体约大102倍 •液体表面张力比气体大104倍左右 •液体密度比气体约大103倍 •液体不可压缩 我们通常所说的高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography)实际也是高压液相色谱(High Pressure Liquid Chromatography),因为没有很高的压力 就不可能产生很高的分离效率
一、HPLC与GC差别 ·相同:兼具分离和分析功能,均可以在线检测 。 主要差别:分析对象和流动相的差别 1.分析对象 GC:能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品 高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及 高聚物的样品不可检测 占有机物的20% HPLC:溶解后能制成溶液的样品 不受样品挥发性和热稳定性的限制 分子量大、难气化、热稳定性差及高分子 和离子型样品均可检测 用途广泛,占有机物的80%
一、HPLC与GC差别 • 相同:兼具分离和分析功能,均可以在线检测 • 主要差别:分析对象和流动相的差别 1.分析对象 GC:能气化、热稳定性好、且沸点较低的样品, 高沸点、挥发性差、热稳定性差、离子型及 高聚物的样品不可检测 占有机物的20% HPLC:溶解后能制成溶液的样品, 不受样品挥发性和热稳定性的限制 分子量大、难气化、热稳定性差及高分子 和离子型样品均可检测 用途广泛,占有机物的80%
2.流动相差别&GC:流动相为情性气体·组分与流动相无亲合作用力,只与固定相作用HPLC:流动相为液体流动相与组分间有亲合作用力,为提高柱的选择性改善分离度增加了因素,对分离起很大作用流动相种类较多,选余地厂流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相可以增大分离选择性3.操作条件差别GC:加温操作HPLC:室温;高压(液体粘度大,峰展宽小)
2.流动相差别 ❖ GC:流动相为惰性气体 • 组分与流动相无亲合作用力,只与固定相作用 ❖ HPLC:流动相为液体 • 流动相与组分间有亲合作用力,为提高柱的选择性、 改善分离度增加了因素,对分离起很大作用 • 流动相种类较多,选择余地广 • 流动相极性和pH值的选择也对分离起到重要作用 选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相 可以增大分离选择性 3.操作条件差别 GC:加温操作 HPLC:室温;高压(液体粘度大,峰展宽小)